鄭繼宇，孫長(zhǎng)山，席雪嬌

(1.遼寧好護(hù)士藥業(yè)(集團(tuán))有限責(zé)任公司，遼寧 桓仁 117201;2.沈陽(yáng)藥科大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110016)

參芪五味子濃縮丸是由黃芪、黨參、五味子及酸棗仁等中藥精制而成，其中黃芪與黨參為常用中藥，其性微溫，味甘，具有補(bǔ)氣固表、升陽(yáng)止汗、利水消腫、托毒排膿生機(jī)等作用［1-2］。酸棗仁味甘，性平，有寧心安神、斂汗、養(yǎng)肝功能。用于虛煩不眠，驚悸怔忪，頭暈眼花等癥。五味子提取物能促進(jìn)肝糖元異生，又能促進(jìn)肝糖元分解，并使腦、肝肌肉中果糖的葡萄糖磷酸化過(guò)程加強(qiáng)，其乙醇提取物能明顯降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶，對(duì)四氯化碳引起的肝臟損傷具有保護(hù)作用。五味子提取物能增加中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性，有血管舒張作用，當(dāng)循環(huán)衰竭時(shí)，又有顯著升壓作用。此外還具有一定強(qiáng)心作用［3］。

參芪五味子制劑［4］適用于健脾益氣，寧心安神。用于氣血不足，心脾兩虛所致的失眠、多夢(mèng)、健忘、乏力、心悸、氣短、自汗。目前，國(guó)內(nèi)外尚無(wú)參芪五味子濃縮丸制劑上市。本文對(duì)自制的參芪五味子濃縮丸進(jìn)行了質(zhì)量研究。

1 試藥與儀器

1.1 藥品

參芪五味子濃縮丸:自制，規(guī)格:每丸重0.3 g。

南五味子對(duì)照藥材(批號(hào):121118-200502)購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

五味子甲素(批號(hào):0764-200107)購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

黃芪甲苷(批號(hào):110781-200613)購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.2 儀器

電子天平BS124S (北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);三用紫外分析儀(上?？岛坦怆妰x器有限公司，型號(hào):ZF-C 型);高效液相色譜儀(日立公司，型號(hào):L-7000)。

2 方法與結(jié)果

2.1 參芪五味子濃縮丸的處方及制法

處方:南五味子180 g，黨參60 g，黃芪120 g，酸棗仁(炒)30 g。

制法:以上四味，黨參與南五味子60 g 粉碎成細(xì)粉;黃芪、酸棗仁和剩余的南五味子照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法［5］，分別用45% 乙醇、70%乙醇、60%乙醇作溶劑，浸漬24 h 后進(jìn)行滲漉;收集滲漉液，回收乙醇后合并，濃縮至適量;加入上述細(xì)粉和適量的輔料，按照濃縮水蜜丸的制備工藝制成1 000 丸，即得。

2.2 參芪五味子濃縮丸的質(zhì)量研究

2.2.1 性狀

本品為深棕色的水蜜丸，味微甜，苦。

2.2.2 鑒別

(1)取本品適量(約0.6 g)，切碎，加硅藻土4 g，研勻，加三氯甲烷25 mL，加熱回流30 min，濾過(guò)，濾液蒸干三氯甲烷，殘留物加三氯甲烷至5 mL，搖勻，作為供試品溶液。另取南五味子對(duì)照藥材1 g，加三氯甲烷25 mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取五味子甲素對(duì)照品，加三氯甲烷制成每1 mL 含0.2 mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010 年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚 (30 ℃～60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈 (254 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

(2)取本品適量(約0.6 g)，切碎，加硅藻土4 g，研勻，加甲醇25 mL，加熱回流1 h，濾過(guò)，濾液蒸干甲醇，殘留物加水10 mL，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2 次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌2 次，每次20 mL，再用水洗滌2 次，每次20 mL，正丁醇蒸干，殘?jiān)蛹状?.5 mL 使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL 含1 mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010 年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷—甲醇—水(13∶6∶1)10 ℃以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光和紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同顏色的斑點(diǎn);紫外光下顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

另取陰性樣品適量，同法操作。結(jié)果陰性樣品對(duì)各項(xiàng)鑒別均無(wú)影響。結(jié)果:三批樣品的鑒別檢查均符合規(guī)定。

2.2.3 檢查

2.2.3.1 重量差異 照丸劑重量差異檢查法(中國(guó)藥典2010 年版一部附錄ⅠA)項(xiàng)下進(jìn)行試驗(yàn)。

方法:取供試品10 份，分別稱(chēng)定重量，再與平均重量相比較，超出重量差異限度的不得多于2份，并不得有1 份超出限度一倍。本品重量差異限度為±9%。結(jié)果:三批樣品的重量差異均在±9%之內(nèi)，符合規(guī)定。

2.2.3.2 溶散時(shí)限 方法:取本品，照丸劑溶散時(shí)限檢查法(中國(guó)藥典2010 版一部附錄ⅠA)測(cè)定，應(yīng)在2 h 內(nèi)全部溶散。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2.4 含量測(cè)定

2.2.4.1 高效液相色譜測(cè)定方法 本品中五味子的含量采用高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010 年版一部附錄ⅥD)測(cè)定。含量測(cè)定方法如下:

以C18鍵合硅膠為固定相;以乙腈—水—醋酸(64∶35∶1)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為249 nm。理論板數(shù)按五味子甲素峰計(jì)算應(yīng)不低于4 000。

對(duì)照品溶液的制備 取五味子甲素對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1 mL 含60 μg 的溶液。

供試品溶液的制備 取本品適量，精密稱(chēng)定，剪碎，混勻，精密稱(chēng)取3 g，加硅藻土2 g，研細(xì)(過(guò)3 號(hào)篩)，混勻，取約5 g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理 (功率250 W，頻率50 KHz)20 min，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，取上清液，即得。測(cè)定法 分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定。

表1 3 批樣品溶散時(shí)限測(cè)定結(jié)果

2.2.4.2 線性關(guān)系試驗(yàn) 精密稱(chēng)取五味子甲素對(duì)照品15.1 mg，置25 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1.0 mL，置10 mL 量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取3、5、8、10、12、15、20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，五味子甲素峰的保留時(shí)間為8.1 min。

回歸方程:A=1 772 140.65M-18 631.65 r=0.999 9 (單位:μg)

五味子甲素在0.181 2～1.208 0 μg 范圍內(nèi)進(jìn)樣量和峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.4.3 精密度試驗(yàn) 取含量測(cè)定項(xiàng)下的同一供試品溶液，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6 次，記錄色譜圖?？疾毂痉ǖ木芏取＝Y(jié)果:本法精密度較好。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2.4.4 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn) 取含量測(cè)定項(xiàng)下的同一供試品溶液，分別于0，2，4，6，8 和12 h 各精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，考察供試品溶液的穩(wěn)定性。結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2.4.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取本品，按含量測(cè)定項(xiàng)下的方法制備供試品溶液6 份，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算含量?？疾毂痉ǖ闹貜?fù)性。結(jié)果見(jiàn)表4。

2.2.4.6 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的本品(批次:第一批)，剪碎，混勻，精密稱(chēng)取3 g，加硅藻土2 g，研細(xì)(過(guò)3 號(hào)篩)，混勻，精密稱(chēng)取約2.5 g，置同25 mL 具塞錐形瓶中，加入一定量的五味子甲素，按含量測(cè)定方法測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表5。

2.2.4.7 三批樣品的含量測(cè)定 取本品，照上述含量測(cè)定方法依法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表6。

表2 精密度試驗(yàn)數(shù)據(jù)(批次:第一批)

表3 穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)(批次:第一批)

表4 重復(fù)性試驗(yàn)數(shù)據(jù)(批次:第一批)

表5 五味子甲素加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

表6 3 批樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 結(jié) 論

本文研究了參芪五味子濃縮丸的質(zhì)量檢查方法，包括:性狀、鑒別、檢查及含量測(cè)定。結(jié)果表明:所制得的3 批樣品各項(xiàng)指標(biāo)均符合中國(guó)藥典2010 版一部丸劑項(xiàng)下的相關(guān)規(guī)定。含量測(cè)定的線性、精密度、溶液穩(wěn)定性、重現(xiàn)性及回收率試驗(yàn)等均達(dá)到測(cè)定要求。表明:本文所建立的實(shí)驗(yàn)方法可行，可以控制本品質(zhì)量。

［1］王蘭霞，黃曉萍，馮祥瑞，等.參芪五味子片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中成藥，1998，20 (11):16-18.

［2］韓越，孫暉，孫文軍，等.參芪五味子片的臨床研究進(jìn)展［J］.甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，30 (5):58-60.

［3］馬育軒，黃艷霞，周海純，等.五味子現(xiàn)代藥理及臨床研究進(jìn)展［J］.中醫(yī)藥信息，2014，31 (1):125-126.

［4］楊宏，韓樹(shù)欣.簡(jiǎn)述黃芪的藥理作用及臨床應(yīng)用［J］.實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2004，20 (9):517.

［5］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:附錄.