張晶晶 天津醫(yī)科大學(xué)（天津300070）

宮頸癌是女性生殖器官腫瘤中最常見(jiàn)的腫瘤，為分析RNA結(jié)合蛋白La在宮頸癌組織表達(dá)的臨床意義，筆者對(duì)我院2009年5月至2011年5月收治的103例宮頸癌患者病理標(biāo)本與100例健康門(mén)診體檢婦女正常宮頸組織標(biāo)本進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)將研究過(guò)程與結(jié)論報(bào)道如下。

臨床資料選取我院2009年5月至2011年5月收治的103例宮頸癌患者病理標(biāo)本，其宮頸癌均經(jīng)術(shù)前檢查及術(shù)后病理組織學(xué)檢查確診，且均未接受術(shù)前放、化療或其他藥物治療，納入治療組，同時(shí)選取100例健康門(mén)診體檢婦女正常宮頸組織標(biāo)本，納入對(duì)照組。將上述203例標(biāo)本均使用10%福爾馬林進(jìn)行固定。

檢測(cè)方法 制片 將上述203例固定標(biāo)本進(jìn)行5 um連續(xù)切片，采取免疫組化法進(jìn)行染色，染色方法［1］。

切片觀察 參照相關(guān)文獻(xiàn)La染色評(píng)分公式進(jìn)行結(jié)果判定［2］：百分比評(píng)分共分5級(jí)：①＜10%；②10%～25%；③25%～50%；④50%～75%；⑤＞75%。評(píng)分按照0～4分遞增；染色強(qiáng)度評(píng)分共分4級(jí)：①未染色；②淺棕色；③棕色；④暗褐色。評(píng)分按照0～3分遞增。評(píng)分≥6則判定為陽(yáng)性結(jié)果。

治療方法治療組103例患者均接受中藥保婦康栓（國(guó)藥準(zhǔn)字Z46020058）治療，洗凈外陰部后直接陰道給藥，每日1次，每次1粒（1.74g）。

觀察指標(biāo) ①觀察RNA結(jié)合蛋白La在宮頸癌組織及正常宮頸組織中的表達(dá)差異，并觀察宮頸癌組織細(xì)胞中La表現(xiàn)；②比較治療組患者接受中藥保婦康栓治療后免疫功能變化，并記錄其不良反應(yīng)情況，其中免疫功能檢測(cè)指標(biāo)包括CD3＋、CD4＋/CD8＋、自然殺傷（NK）細(xì)胞及腫瘤壞死因子－α（TNF－α）含量，不良反應(yīng)包括惡心、嘔吐、頭痛、頭暈、肝腎功能損害等。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 對(duì)本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0進(jìn)行分析，對(duì)計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)設(shè)定為a＝0.05，當(dāng)P＜0.05時(shí)，認(rèn)為其有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性。

治療結(jié)果陽(yáng)性率分析 治療組標(biāo)本陽(yáng)性表達(dá)率為62.3%，對(duì)照組為8.9%，治療組標(biāo)本陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

切片觀察 正常宮頸組織中，La蛋白陽(yáng)性表達(dá)率較低，多為未染色，少數(shù)為淺棕色，見(jiàn)圖1；宮頸癌組織中，La蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高，多數(shù)為棕色，少數(shù)為暗褐色或淺棕色，且陽(yáng)性表達(dá)主要集中于細(xì)胞核位置，見(jiàn)圖2。

預(yù)后觀察 患者接受中藥保婦康栓治療后CD3＋、CD4＋/CD8＋、NK 細(xì)胞及 TNF－α均顯著升高（P＜0.05），見(jiàn)表1，治療期間共出現(xiàn)惡心嘔吐13例，頭暈頭痛11例，肝腎功能損害8例，不良反應(yīng)發(fā)生率為31.07%。

表1 宮頸癌患者治療前后免疫功能指標(biāo)變化（±s）

表1 宮頸癌患者治療前后免疫功能指標(biāo)變化（±s）

0.05指 標(biāo) 治療前 治療后0.05 CD4＋/CD8＋ 1.26±0.39 2.13±0.86 4.536 ＜0.05 NK細(xì)胞（%）7.26±1.05 9.22±1.63 5.508 ＜0.05 TNF－α（ng/L）1.01±0.31 1.68±0.40 3.214 ＜t P CD3＋（%）58.53±9.25 68.36±10.57 9.286 ＜

討論宮頸癌多由高危型人乳頭瘤狀病毒持續(xù)導(dǎo)致，早期可導(dǎo)致陰道出血、陰道排液等，晚期患者可出現(xiàn)尿頻、下肢腫痛、貧血甚至全身衰竭等癥狀。

La蛋白存在于細(xì)胞核中，是一種功能豐富的RNA結(jié)合蛋白，已被證實(shí)為病毒代謝的重要宿主［3］，其功能包括啟動(dòng)病毒mRNA翻譯、保護(hù)病毒RNA穩(wěn)定性及促進(jìn)病毒RNA復(fù)制，而患者體內(nèi)人乳頭瘤狀病毒在La蛋白調(diào)控下可獲得安全的繁殖環(huán)境，使得該病毒得到短時(shí)間內(nèi)大量繁殖，從而誘發(fā)宮頸癌的發(fā)生。Moody C A等［4］研究表明，上皮細(xì)胞癌、頭頸癌、口腔癌甚至慢性乙肝患者病灶處病理組織學(xué)檢查均提示La蛋白陽(yáng)性率大幅上升，顯示La蛋白在多種慢性疾病或癌癥中均起到了重要作用。近年來(lái)，又有研究指出，La蛋白可作為RNA合成的一種分子伴侶，以磷酸化依賴(lài)模式結(jié)合在腫瘤細(xì)胞核內(nèi)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖與遷移［5］。因此，其致病機(jī)制可以總結(jié)為：La蛋白可上調(diào)Catein、MMP－2等促腫瘤細(xì)胞因子的表達(dá)，并影響HeLa細(xì)胞的周期蛋白，從而影響其細(xì)胞周期，調(diào)控腫瘤的繁殖；同時(shí)，低La蛋白水平可抑制Cyclin D1表達(dá)，使得細(xì)胞在通過(guò)G1/S檢查點(diǎn)時(shí)即得到阻斷，從而使細(xì)胞周期被阻滯在G1期，影響細(xì)胞增殖，而宮頸癌患者的高La蛋白水平促使細(xì)胞周期啟動(dòng)得到推進(jìn)，從而促進(jìn)了腫瘤的進(jìn)展。因此，針對(duì)RNA結(jié)合蛋白La的分子靶向治療可以成為今后宮頸癌治療的新方向，且la Cruz－Hernández D 等［6］研究指出，TNF－α、IFN－γ對(duì)人 RNA 結(jié)合蛋白La的表達(dá)具有明顯的抑制作用，在今后的治療中，可聯(lián)合應(yīng)用TNF－α、IFN－γ促進(jìn)藥物，以控制腫瘤增殖、延緩患者宮頸癌病情進(jìn)展。中藥治療腫瘤的主要機(jī)制即為調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，起到促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞殺傷、控制其轉(zhuǎn)移的效果，在接受中藥保婦康栓治療后，患者CD3＋、CD4＋/CD8＋、NK細(xì)胞及 TNF－α均顯著升高。保婦康栓的主要成分為莪術(shù)油，可調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的mRNA表達(dá)，對(duì)促進(jìn)TNF－α水平上升具有重要意義，亦可在一定程度上降低La蛋白陽(yáng)性率，改善患者的預(yù)后；治療期間共出現(xiàn)惡心嘔吐13例，頭暈頭痛11例，肝腎功能損害8例，不良反應(yīng)發(fā)生率為31.07%，顯示中藥對(duì)于腫瘤的選擇作用較為明顯，能夠有效避免西藥抗腫瘤對(duì)機(jī)體的較大損傷，保證機(jī)體的正氣。

［1］趙 琳，劉朝奇，李志英，等.HPV16E7siRNA表達(dá)載體對(duì)宮頸癌CaSki細(xì)胞生物學(xué)活性的影響［J］.山東醫(yī)藥，2012，52（29）：10－13.

［2］史永華，尼加提，熱合木，等.慢病毒介導(dǎo)的水通道蛋白8短發(fā)卡RNA抑制SiHa人子宮頸癌細(xì)胞的遷移研究［J］.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2013，29（2）：123－127.

［3］Do C L，Mankame T P，Langerman A，et al.Characterization of NOL7gene point mutations，promoter methylation，and protein expression in cervical cancer［J］.International journal of gynecological pathology：official journal of the International Society of Gynecological Pathologists，2012，31（1）：15.

［4］Moody C A，Laimins L A.Human papillomavirus oncoproteins：pathways to transformation［J］.Nature Reviews Cancer，2010，10（8）：550－560.

［5］于利利，吳莉英，蔡 晶，等.Livin基因短發(fā)夾狀RNA對(duì)子宮頸癌Siha細(xì)胞增殖遷移的影響［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，2012，47（007）：538－540.

［6］la Cruz－Hernández D，Perez－Plasencia C，Pérez－Cardenas E，et al.Transcriptional changes induced by epigenetic therapy with hydralazine and magnesium valproate in cervical carcinoma［J］.Oncology reports，2011，25（2）：399－407.