王益華+俞俊萍+來麗麗

[摘要] 目的 探討孟魯司特鈉片降解產物的測定方法，以有效控制藥品的質量。方法 采用用高效液相色譜法測定孟魯司特鈉片降解產物，Agilent ZORBAX XDB C8色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以磷酸鹽緩沖液為流動相A，乙腈為流動相B梯度洗脫，流速1.2 mL/min，檢測波長為254 nm，采用雜質對照品法測定降解產物。結果 孟魯司特鈉濃度在1.035 648～6.213 888 μg/mL范圍內與峰面積呈良好的線性關系，主藥與降解產物能達到較好的基線分離。結論 該方法靈敏度高，專屬性強，準確可靠，可用于藥品控制。

[關鍵詞] 高效液相色譜法；孟魯司特鈉；降解產物

[中圖分類號] R9 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）03（b）-0023-02

[Abstract] Objective To investigate a method for the determination of montelukast sodium tablets degradation products， in order to effectively control the quality of drugs. Methods HPLC for determination of montelukast sodium tablets degradation product， Agilent ZORBAX XDB C8 column （4.6 × 250mm， 5 μ m）， phosphate buffer as mobile phase A， acetonitrile as mobile phase B gradient elution， flow rate 1.2ml/min， the detection wavelength was 254nm， the impurity determination of degradation products in the control sample method. Results Montelukast sodium concentration in the range of 1.035648-6.213888 μg/ml had a good linear relationship with peak area， the main drug and degradation products can achieve good baseline separation. Conclusion This method is of high sensitivity， strong specificity， accurate and reliable， and can be used for drug control.

[Key words] HPLC； Montelukast sodium； Degradation products

孟魯司特鈉化學名為[R-（E）]-1-[[[1-[3-[2-（7-氯-2-喹啉基）乙烯基]苯基]-3-[2-（1-羥基-1-甲基乙基）苯基]丙基]硫代]甲基]環(huán)丙基乙酸鈉，為選擇性白三烯D4受體拮抗劑[1]，可與氣道中的白三烯選擇性地結合，阻斷過敏介質的作用，改善呼吸道炎癥[2]，使氣道暢通，是一種高效、低毒、安全性好的平喘抗炎和抗過敏藥[3]。該實驗于2012年9月—2013年3月完成，采用高效液相色譜法測定孟魯司特鈉片的降解產物，以期為質量控制提供可靠的實驗依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試劑

高效液相色譜儀（型號：Waters2695-2489，廠家：美國Waters公司）、紫外檢測器（型號：TU-1900，廠家：北京普析通用公司）、孟魯司特鈉對照品（批號F089F11015）、孟魯司特鈉峰鑒別用對照品（批號20120216）、雜質A對照品（批號F0891MPE333R009）、雜質C對照品（批號F0891MPB259R055）、雜質D對照品（批號F0891MPD277R099）均由企業(yè)提供，孟魯司特鈉片（批號：120312），乙腈和甲醇均為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 實驗方法

2.1 色譜條件

色譜柱Agilent ZORBAX XDB C8色譜柱（4.6 mm×250 mm，

5 μm），流動相磷酸鹽緩沖液為流動相A，乙腈為流動相B，梯度洗脫見表1，檢測波長254 nm；流速1.2 mL/min；柱溫35 ℃；進樣量10 μL。

2.2 系統(tǒng)適用性

分離度溶液：稱取孟魯司特鈉峰鑒別用對照品約10 mg，精密稱定，置10 mL白色量瓶中，用稀釋劑溶解并稀釋至刻度，混勻。

雜質A儲備液：準確稱取約10 mg的雜質A對照品，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，混勻。

雜質D儲備液：準確稱取約10 mg 的雜質D對照品，置100 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，混勻。

孟魯司特鈉標準儲備液：準確稱取約10 mg孟魯司特鈉對照品，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度。混勻。

標準溶液：精密量取2.0 mL孟魯司特鈉標準儲備液、10.0mL的雜質A儲備液、 5.0 mL的雜質D儲備液，置100 mL量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度。

2.3 線性關系考察

線性儲備溶液-1[4-6]：分別吸取10.0 mL孟魯司特鈉標準儲備液、50.0 mL的雜質A 儲備溶液和25.0 mL的雜質D儲備溶液，至100 mL的容量瓶中， 用甲醇稀釋至刻度，混勻。

線性儲備溶液-2：分別吸取5.0 mL的雜質A儲備溶液、5.0 mL的雜質D儲備溶液 和5.0 mL的孟魯司特鈉標準儲備溶液，至20 mL的量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，混勻。

按照下表用稀釋劑進一步稀釋線性儲備溶液（1和2），得到線性測試溶液，濃度為QL至相當于標準溶液的300%，每份線性測試溶液各進樣1次。見表2。

2.4 定量限

取線性項下的最低濃度作為定量限，連續(xù)進樣6針，記錄峰面積。

2.5 方法精密度

取不少于20片樣品，稱重，磨粉，準確稱取相當于25 mg的孟魯司特的粉末，置25 mL的量瓶中，加入20 mL的稀釋劑，機械振搖20 min，稀釋劑稀釋至刻度，混勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去2 mL初濾液。按照測試方法制備6份孟魯司特鈉片樣品溶液。

2.6 準確度

使用線性下的線性貯備液（1和2）作為準確度測試的標準貯備液。準確稱取約500 mg的孟魯司特鈉片（10 mg）的粉末（相當于25 mg孟魯司特），至25 mL的容量瓶中，按照表3精密移取線性儲備溶液，加入適量的稀釋劑，機械振搖20 min，稀釋劑稀釋至刻度，混勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去2 mL初濾液。分別對9份準確度測試樣品溶液各進樣1次。

2.7 穩(wěn)定性試驗

在室溫下保存分離度溶液（SS溶液）、標準溶液（Std）、樣品溶液，在所有溶液制備后的0、8、24、48 h分別對SS溶液、對照品溶液、樣品溶液進行進樣。

3 實驗結果

3.1 系統(tǒng)適用性

按上述色譜條件進樣，得到，分離度溶液中，雜質B與孟魯司特的分離度≥2.5，雜質C與孟魯司特的分離度≥1.2，符合要求。標準溶液中，理論板數(shù)按孟魯司特鈉峰計≥4 000，拖尾因子（T）≤2.0，符合要求。

3.2 線性關系考察

以峰面積（Y）對濃度（X）作線性回歸。線性方程分別為：Y孟魯司特鈉=22720X-771.11（r=0.9999），Y雜質A=23468X-1993.2（r=0.9999），Y雜質D=27121X-1074.8（r=0.9999）。線性范圍分別為孟魯司特鈉 1.014935-6.089610 μg/ mL，雜質A 1.028-30.84 μg/ mL，雜質D 1.027-15.405 μg/ mL。

3.3 定量限

取線性項下的最低濃度作為定量限，連續(xù)進樣6針，記錄峰面積，孟魯司特鈉、雜質A、雜質D的RSD分別為0.8%、0.8%、1.3%。

按照下表用稀釋劑進一步稀釋線性儲備溶液（1和2），得到線性測試溶液，濃度為QL至相當于標準溶液的300%，每份線性測試溶液各進樣1次。見表2。

2.4 定量限

取線性項下的最低濃度作為定量限，連續(xù)進樣6針，記錄峰面積。

2.5 方法精密度

取不少于20片樣品，稱重，磨粉，準確稱取相當于25 mg的孟魯司特的粉末，置25 mL的量瓶中，加入20 mL的稀釋劑，機械振搖20 min，稀釋劑稀釋至刻度，混勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去2 mL初濾液。按照測試方法制備6份孟魯司特鈉片樣品溶液。

2.6 準確度

使用線性下的線性貯備液（1和2）作為準確度測試的標準貯備液。準確稱取約500 mg的孟魯司特鈉片（10 mg）的粉末（相當于25 mg孟魯司特），至25 mL的容量瓶中，按照表3精密移取線性儲備溶液，加入適量的稀釋劑，機械振搖20 min，稀釋劑稀釋至刻度，混勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去2 mL初濾液。分別對9份準確度測試樣品溶液各進樣1次。

2.7 穩(wěn)定性試驗

在室溫下保存分離度溶液（SS溶液）、標準溶液（Std）、樣品溶液，在所有溶液制備后的0、8、24、48 h分別對SS溶液、對照品溶液、樣品溶液進行進樣。

3 實驗結果

3.1 系統(tǒng)適用性

按上述色譜條件進樣，得到，分離度溶液中，雜質B與孟魯司特的分離度≥2.5，雜質C與孟魯司特的分離度≥1.2，符合要求。標準溶液中，理論板數(shù)按孟魯司特鈉峰計≥4 000，拖尾因子（T）≤2.0，符合要求。

3.2 線性關系考察

以峰面積（Y）對濃度（X）作線性回歸。線性方程分別為：Y孟魯司特鈉=22720X-771.11（r=0.9999），Y雜質A=23468X-1993.2（r=0.9999），Y雜質D=27121X-1074.8（r=0.9999）。線性范圍分別為孟魯司特鈉 1.014935-6.089610 μg/ mL，雜質A 1.028-30.84 μg/ mL，雜質D 1.027-15.405 μg/ mL。

3.3 定量限

取線性項下的最低濃度作為定量限，連續(xù)進樣6針，記錄峰面積，孟魯司特鈉、雜質A、雜質D的RSD分別為0.8%、0.8%、1.3%。

按照下表用稀釋劑進一步稀釋線性儲備溶液（1和2），得到線性測試溶液，濃度為QL至相當于標準溶液的300%，每份線性測試溶液各進樣1次。見表2。

2.4 定量限

取線性項下的最低濃度作為定量限，連續(xù)進樣6針，記錄峰面積。

2.5 方法精密度

取不少于20片樣品，稱重，磨粉，準確稱取相當于25 mg的孟魯司特的粉末，置25 mL的量瓶中，加入20 mL的稀釋劑，機械振搖20 min，稀釋劑稀釋至刻度，混勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去2 mL初濾液。按照測試方法制備6份孟魯司特鈉片樣品溶液。

2.6 準確度

使用線性下的線性貯備液（1和2）作為準確度測試的標準貯備液。準確稱取約500 mg的孟魯司特鈉片（10 mg）的粉末（相當于25 mg孟魯司特），至25 mL的容量瓶中，按照表3精密移取線性儲備溶液，加入適量的稀釋劑，機械振搖20 min，稀釋劑稀釋至刻度，混勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去2 mL初濾液。分別對9份準確度測試樣品溶液各進樣1次。

2.7 穩(wěn)定性試驗

在室溫下保存分離度溶液（SS溶液）、標準溶液（Std）、樣品溶液，在所有溶液制備后的0、8、24、48 h分別對SS溶液、對照品溶液、樣品溶液進行進樣。

3 實驗結果

3.1 系統(tǒng)適用性

按上述色譜條件進樣，得到，分離度溶液中，雜質B與孟魯司特的分離度≥2.5，雜質C與孟魯司特的分離度≥1.2，符合要求。標準溶液中，理論板數(shù)按孟魯司特鈉峰計≥4 000，拖尾因子（T）≤2.0，符合要求。

3.2 線性關系考察

以峰面積（Y）對濃度（X）作線性回歸。線性方程分別為：Y孟魯司特鈉=22720X-771.11（r=0.9999），Y雜質A=23468X-1993.2（r=0.9999），Y雜質D=27121X-1074.8（r=0.9999）。線性范圍分別為孟魯司特鈉 1.014935-6.089610 μg/ mL，雜質A 1.028-30.84 μg/ mL，雜質D 1.027-15.405 μg/ mL。

3.3 定量限

取線性項下的最低濃度作為定量限，連續(xù)進樣6針，記錄峰面積，孟魯司特鈉、雜質A、雜質D的RSD分別為0.8%、0.8%、1.3%。