張衛(wèi)群等

【摘要】 目的 通過對(duì)不同時(shí)期糖尿病腎?。―N）患者血清和尿中轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β1）的檢測， 探討TGF-β1在DN早期診斷中的意義。方法 根據(jù)24 h尿白蛋白排泄率（UAER）分為單純糖尿?。―M）組（T1組）32例， 早期DN組（T2組）41例和晚期DN組（T3組）13例， 并與23例正常人（C1組）作比較。用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）分別檢測各組血清pTGF-β1和尿液中uTGF-β1水平， 比較各組之間兩項(xiàng)指標(biāo)的差異， 以正常組單側(cè)95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定陽性判定標(biāo)準(zhǔn)， 并以UAER為金標(biāo)準(zhǔn)， 進(jìn)行T1組和T2組的診斷性能評(píng)價(jià)。同時(shí)用相應(yīng)方法檢測各標(biāo)本中尿微量白蛋白（mAlb）， 最后確定TGF-β1對(duì)DN早期診斷的價(jià)值。結(jié)果 T1、T2、T3組pTGF-β1、uTGF-β1、mAlb較C1組明顯升高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。相關(guān)分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關(guān)， pTGF-β1和uTGF-β1的異常比UAER出現(xiàn)更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發(fā)現(xiàn)DN的敏感指標(biāo)之一， 其中以u(píng)TGF-β1的臨床靈敏度更高。結(jié)論 uTGF-β1聯(lián)合尿mAlb能早期診斷DN， 并提高診斷的性能。

【關(guān)鍵詞】 糖尿病腎病；轉(zhuǎn)化生長因子；尿微量白蛋白

【Abstract】 Objective To explore the clinical significance of transforming growth factor beta-1 （TGF-β1） in the early diagnosis of diabetic nephropathy （DN）， through detections of plasma TGF-β1 （pTGF-β1） and urinary TGF-β1 （uTGF-β1） levels in different periods of DN patients. Methods According to 24 h urinary albumin excretion rate （UAER）， patients were divided into diabetes mellitus （DM） group （T1 group， n=32）， early DN group （T2 group， n=41）， and advanced DN group （T3 group， n=13）. These groups were compared with healthy people （C1 group， n=23）. Enzyme linked immune sorbent assay （ELISA） was used to detect levels of pTGF-β1 and uTGF-β1 in all the groups. The differences between the two indexes of the groups were compared. The upper limit value of normal group unilateral 95 % （X±1.64S） was set as maximum normal value to determine positive decision standard， and UAER was taken as golden standard to assess the effects of T1 and T2 groups. Urinary microalbuminuria （mAlb） levels were detected in all groups to determine the early diagnostic value of TGF-β1 for DN. Results Levels of pTGF-β1 and uTGF-β1 and mAlb significantly increased in T1， T2 and T3 groups， compared with that in C1 group. and the difference was statistically significant （P<0.05）. Correlation analysis showed that pTGF-β1 and uTGF-β1 were positively correlated with UAER. The changes of pTGF-β1 and uTGF-β1 appeared earlier than UAER， thus the detection of pTGF-β1 and uTGF-β1 could be one of the sensitive indexes of early DN， and uTGF-β1 had the higher clinical sensitivity. Conclusion Combination of uTGF-β1 and mAlb can provide early diagnosis of DN and improve diagnostic performance.

【Key words】 Diabetic nephropathy； Transforming growth factor； Microalbuminuria

TGF-β1是一種分子量為25 kD的多肽， TGF-β1是對(duì)細(xì)胞生長、分化和多種生理、病理過程起重要調(diào)節(jié)的細(xì)胞因子， 可抑制腎小管、腎小球上皮細(xì)胞生長。在糖尿病腎病中起重要作用， 它可以導(dǎo)致腎臟的多種病理形態(tài)的改變[1， 2]。作者通過檢測2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1并確定指標(biāo)， 提高對(duì)DN的早期診斷水平。endprint

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年3～11月本院內(nèi)分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年齡35～75歲， 根據(jù)UAER分為三組：T1組為單純DM組， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2組為早期DN組， 41例（出現(xiàn)持續(xù)性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3組為晚期DN組， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月門診體檢者23 例為正常對(duì)照組（C1組）， 其中男10例， 女13例， 年齡42～56歲， 為空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血壓正常， 無心、肝、腎等重要臟器疾病， 無內(nèi)分泌及遺傳代謝性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取靜脈血， 離心分離血清， 收集24 h尿液， 準(zhǔn)確記錄尿量， 混勻后取5 ml， -70℃保存待測。血、尿TGF-β1采用雙抗體夾心ELISA 法， 定量檢測。mAlb采用免疫增強(qiáng)比濁法， 使用日立7600-020全自動(dòng)生化分析儀。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 研究所得數(shù)據(jù)采用SPSS15.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。相關(guān)分析應(yīng)用Person相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2. 1 各組TGF-β1、mAlb檢測結(jié)果見表1。

2. 2 Person相關(guān)分析 L1AER與pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 結(jié)果正性相關(guān)。

2. 3 TGF-β1對(duì)DN的診斷性能以以C1組單側(cè)95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml為陽性。據(jù)此進(jìn)行DN的早期診斷， 結(jié)果見表2。

由表2可知， T1組pTGF-β1對(duì)DN 診斷的陽性率為53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的陽性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常時(shí)UAER陽性率分別為28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可見pTGF-β1， uTGF-β1的異常較UAER早。以UAER為金標(biāo)準(zhǔn)， 進(jìn)行pTGF-β1對(duì)DN 診斷的性能評(píng)價(jià)， pTGF-β1靈敏度為85.36%， 特異度為46.87%；uTGF-β1靈敏度為90.24%， 特異度為43.75%。

3 討論

DN的發(fā)生是隱蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的診斷和干預(yù)。近年來也有研究發(fā)現(xiàn)， UAER<30 mg/24 h時(shí)， 其腎臟也可存在較嚴(yán)重的損害[3， 4]。因此作為一種反映腎小球損害的非侵入性指標(biāo)， UAER也有一定的局限性， 出現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿、高血壓、水腫及腎功能不全表現(xiàn)時(shí)， 雖診斷明確， 但腎病已達(dá)2級(jí)以上， 屬不可逆性變， 已失去了預(yù)防和有效治療時(shí)機(jī)[5， 6]。

本研究結(jié)果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1較正常人明顯升高， 在微量蛋白尿組血清pTGF-β1、uTGF-β1較正常人升高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。相關(guān)分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關(guān)， pTGF-β1和uTGF-β1的變化比mAlb出現(xiàn)更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發(fā)現(xiàn)DN的敏感指標(biāo)之一， 其中以u(píng)TGF-β1的臨床靈敏度更高。提示過度表達(dá)TGF-β1是糖尿病腎病發(fā)生進(jìn)展的一個(gè)重要機(jī)制。

參考文獻(xiàn)

[1] Tamaki K， Yoshimura J， Okuda S. Molecular biology in regulation ofkidney function： TGF-beta （transforming growth factor-beta）. Nippon Rinsho， 2006， 64（ Suppl2）：297-301.

[2] Chen S， Hong SW， Iglesia-dela， et al. The key role of the transforming growth factor-beta system in the pathogenesis of diabetic nephropathy. Ren Fail， 2001， 23（3-4）：470-481.

[3] 蘇琴， 朱關(guān)則.尿微量白蛋白在糖尿病腎損傷早期診斷中的價(jià)值.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2005， 28（7）：740-741.

[4] 肖嫵. 2型糖尿病尿微量白蛋白與大血管病變的相關(guān)關(guān)系研究.中國基層醫(yī)藥， 2004， 11（3）：338.

[5] 江中林， 姜國良. TGF-β1在糖尿病腎病早期診斷中的應(yīng)用. 放射免疫學(xué)雜志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

[收稿日期：2014-06-03]endprint

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年3～11月本院內(nèi)分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年齡35～75歲， 根據(jù)UAER分為三組：T1組為單純DM組， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2組為早期DN組， 41例（出現(xiàn)持續(xù)性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3組為晚期DN組， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月門診體檢者23 例為正常對(duì)照組（C1組）， 其中男10例， 女13例， 年齡42～56歲， 為空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血壓正常， 無心、肝、腎等重要臟器疾病， 無內(nèi)分泌及遺傳代謝性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取靜脈血， 離心分離血清， 收集24 h尿液， 準(zhǔn)確記錄尿量， 混勻后取5 ml， -70℃保存待測。血、尿TGF-β1采用雙抗體夾心ELISA 法， 定量檢測。mAlb采用免疫增強(qiáng)比濁法， 使用日立7600-020全自動(dòng)生化分析儀。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 研究所得數(shù)據(jù)采用SPSS15.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。相關(guān)分析應(yīng)用Person相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2. 1 各組TGF-β1、mAlb檢測結(jié)果見表1。

2. 2 Person相關(guān)分析 L1AER與pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 結(jié)果正性相關(guān)。

2. 3 TGF-β1對(duì)DN的診斷性能以以C1組單側(cè)95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml為陽性。據(jù)此進(jìn)行DN的早期診斷， 結(jié)果見表2。

由表2可知， T1組pTGF-β1對(duì)DN 診斷的陽性率為53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的陽性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常時(shí)UAER陽性率分別為28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可見pTGF-β1， uTGF-β1的異常較UAER早。以UAER為金標(biāo)準(zhǔn)， 進(jìn)行pTGF-β1對(duì)DN 診斷的性能評(píng)價(jià)， pTGF-β1靈敏度為85.36%， 特異度為46.87%；uTGF-β1靈敏度為90.24%， 特異度為43.75%。

3 討論

DN的發(fā)生是隱蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的診斷和干預(yù)。近年來也有研究發(fā)現(xiàn)， UAER<30 mg/24 h時(shí)， 其腎臟也可存在較嚴(yán)重的損害[3， 4]。因此作為一種反映腎小球損害的非侵入性指標(biāo)， UAER也有一定的局限性， 出現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿、高血壓、水腫及腎功能不全表現(xiàn)時(shí)， 雖診斷明確， 但腎病已達(dá)2級(jí)以上， 屬不可逆性變， 已失去了預(yù)防和有效治療時(shí)機(jī)[5， 6]。

本研究結(jié)果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1較正常人明顯升高， 在微量蛋白尿組血清pTGF-β1、uTGF-β1較正常人升高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。相關(guān)分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關(guān)， pTGF-β1和uTGF-β1的變化比mAlb出現(xiàn)更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發(fā)現(xiàn)DN的敏感指標(biāo)之一， 其中以u(píng)TGF-β1的臨床靈敏度更高。提示過度表達(dá)TGF-β1是糖尿病腎病發(fā)生進(jìn)展的一個(gè)重要機(jī)制。

參考文獻(xiàn)

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[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

[收稿日期：2014-06-03]endprint

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年3～11月本院內(nèi)分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年齡35～75歲， 根據(jù)UAER分為三組：T1組為單純DM組， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2組為早期DN組， 41例（出現(xiàn)持續(xù)性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3組為晚期DN組， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月門診體檢者23 例為正常對(duì)照組（C1組）， 其中男10例， 女13例， 年齡42～56歲， 為空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血壓正常， 無心、肝、腎等重要臟器疾病， 無內(nèi)分泌及遺傳代謝性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取靜脈血， 離心分離血清， 收集24 h尿液， 準(zhǔn)確記錄尿量， 混勻后取5 ml， -70℃保存待測。血、尿TGF-β1采用雙抗體夾心ELISA 法， 定量檢測。mAlb采用免疫增強(qiáng)比濁法， 使用日立7600-020全自動(dòng)生化分析儀。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 研究所得數(shù)據(jù)采用SPSS15.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。相關(guān)分析應(yīng)用Person相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2. 1 各組TGF-β1、mAlb檢測結(jié)果見表1。

2. 2 Person相關(guān)分析 L1AER與pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 結(jié)果正性相關(guān)。

2. 3 TGF-β1對(duì)DN的診斷性能以以C1組單側(cè)95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml為陽性。據(jù)此進(jìn)行DN的早期診斷， 結(jié)果見表2。

由表2可知， T1組pTGF-β1對(duì)DN 診斷的陽性率為53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的陽性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常時(shí)UAER陽性率分別為28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可見pTGF-β1， uTGF-β1的異常較UAER早。以UAER為金標(biāo)準(zhǔn)， 進(jìn)行pTGF-β1對(duì)DN 診斷的性能評(píng)價(jià)， pTGF-β1靈敏度為85.36%， 特異度為46.87%；uTGF-β1靈敏度為90.24%， 特異度為43.75%。

3 討論

DN的發(fā)生是隱蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的診斷和干預(yù)。近年來也有研究發(fā)現(xiàn)， UAER<30 mg/24 h時(shí)， 其腎臟也可存在較嚴(yán)重的損害[3， 4]。因此作為一種反映腎小球損害的非侵入性指標(biāo)， UAER也有一定的局限性， 出現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿、高血壓、水腫及腎功能不全表現(xiàn)時(shí)， 雖診斷明確， 但腎病已達(dá)2級(jí)以上， 屬不可逆性變， 已失去了預(yù)防和有效治療時(shí)機(jī)[5， 6]。

本研究結(jié)果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1較正常人明顯升高， 在微量蛋白尿組血清pTGF-β1、uTGF-β1較正常人升高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。相關(guān)分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關(guān)， pTGF-β1和uTGF-β1的變化比mAlb出現(xiàn)更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發(fā)現(xiàn)DN的敏感指標(biāo)之一， 其中以u(píng)TGF-β1的臨床靈敏度更高。提示過度表達(dá)TGF-β1是糖尿病腎病發(fā)生進(jìn)展的一個(gè)重要機(jī)制。

參考文獻(xiàn)

[1] Tamaki K， Yoshimura J， Okuda S. Molecular biology in regulation ofkidney function： TGF-beta （transforming growth factor-beta）. Nippon Rinsho， 2006， 64（ Suppl2）：297-301.

[2] Chen S， Hong SW， Iglesia-dela， et al. The key role of the transforming growth factor-beta system in the pathogenesis of diabetic nephropathy. Ren Fail， 2001， 23（3-4）：470-481.

[3] 蘇琴， 朱關(guān)則.尿微量白蛋白在糖尿病腎損傷早期診斷中的價(jià)值.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2005， 28（7）：740-741.

[4] 肖嫵. 2型糖尿病尿微量白蛋白與大血管病變的相關(guān)關(guān)系研究.中國基層醫(yī)藥， 2004， 11（3）：338.

[5] 江中林， 姜國良. TGF-β1在糖尿病腎病早期診斷中的應(yīng)用. 放射免疫學(xué)雜志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

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