劉 倩，董 鳳，李桂秋，陳淑蘭，宋熙瑤，劉文博，路 娟

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，黑龍江 哈爾濱 150001)

血培養(yǎng)可為臨床診斷菌血癥、敗血癥提供可靠的依據(jù)。對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性病原菌的監(jiān)測(cè)，是監(jiān)測(cè)醫(yī)院感染、指導(dǎo)臨床早期合理用藥、控制細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的重要手段［1-2］。為了解血培養(yǎng)病原菌構(gòu)成及耐藥性，對(duì)哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2008年1月至2012年12月血培養(yǎng)情況及藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 材料

菌株來(lái)源 收集哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2008年1月至2012年12月血培養(yǎng)陽(yáng)性患者的非重復(fù)菌株4245株。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)與鑒定、藥敏 血培養(yǎng)采用法國(guó)生物梅里埃公司的BacT/Alert 3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀、美國(guó)碧迪公司的BACTEC FX全自動(dòng)血培養(yǎng)儀及其各自配套的血培養(yǎng)瓶。病原菌鑒定及藥敏用法國(guó)生物梅里埃公司的VITEK 2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀及配套的鑒定、藥敏卡，補(bǔ)充藥敏試驗(yàn)采用紙片(K-B)法，培養(yǎng)基和藥敏紙片由英國(guó)Oxoid公司生產(chǎn)。

1.2.2 判讀標(biāo)準(zhǔn) 判定標(biāo)準(zhǔn)按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)2012年制定的標(biāo)準(zhǔn)［3］。質(zhì)控菌株:金黃色葡萄球菌ATCC29213、金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC29212等。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)方法 病原菌分布及耐藥性采用WHONET 5.6統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原菌分布

2008年1月至2012年12月共檢出病原菌4245株。病原菌分布及構(gòu)成比見(jiàn)表1。

2.2 主要革蘭陽(yáng)性及陰性菌的耐藥性

耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)檢出率為81.1%，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率為38.8%。主要革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性見(jiàn)表2。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌檢出率分別為55.2%和53.8%。主要革蘭陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性見(jiàn)表3。

表1 血培養(yǎng)病原菌分布及構(gòu)成比(%)Table 1 Distribution of the blood culture positive pathogens(%)

表2 葡萄球菌屬對(duì)抗菌藥物的耐藥率(%)Table 2 Drug resistance rates of Staphylococcus SPP(%)

表3 主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率(%)Table 3 Drug resistance rates of the main gram-negative bacteria(%)

3 討論

本研究收集了哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2008年1月至2012年12月五年間臨床送檢血培養(yǎng)標(biāo)本中分離出的病原菌共4245株。病原菌居前5位的依次為凝固酶陰性葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、金黃色葡萄球菌，與中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院報(bào)道一致［4］。

葡萄球菌屬在血培養(yǎng)分離出的病原菌中占主要地位，尤其是凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)分離量達(dá)22.3%，可能與侵入性治療、假肢替換、標(biāo)本污染等因素有關(guān)。凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素、利奈唑胺及替考拉寧高度敏感，未發(fā)現(xiàn)耐藥株;對(duì)奎奴普丁/達(dá)福普汀耐藥率較低，分別為3.4%、2.0%;對(duì)利福平耐藥率也較低，可能與臨床少用有關(guān);對(duì)其余抗菌藥物的耐藥率普遍較高。MRCNS和MRSA檢出率較高，分別為81.1%、38.8%，而耐甲氧西林的葡萄球菌對(duì)青霉素類(lèi)、頭孢類(lèi)、β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物和碳青霉烯類(lèi)均耐藥［5］，故萬(wàn)古霉素、利奈唑胺及替考拉寧可作為MRCNS和MRSA感染的有效藥物。

大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌是血培養(yǎng)最常見(jiàn)的革蘭陰性菌，占分離菌的第2位和第3位。由表3可見(jiàn)，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物較敏感，對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、頭孢西丁、阿米卡星的耐藥率較低，對(duì)其余抗菌藥物的耐藥率普遍較高。大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株檢出率較高，分別為55.2%和53.8%。一旦檢出產(chǎn)ESBLs菌株，無(wú)論體外藥敏結(jié)果如何，對(duì)一、二、三代頭孢、氨曲南均應(yīng)報(bào)告耐藥［6］，應(yīng)選用加酶抑制劑類(lèi)、碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物。而大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南、美羅培南等碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物也存在部分耐藥現(xiàn)象，可能與產(chǎn)KPC-2酶腸桿菌科細(xì)菌在我國(guó)流行有關(guān)［7］。由于血培養(yǎng)中ESBLs的高檢出率及產(chǎn)KPC酶腸桿菌科細(xì)菌的威脅，因此腸桿菌科細(xì)菌的耐藥問(wèn)題需要密切關(guān)注。血培養(yǎng)分離出的非發(fā)酵菌中，以鮑曼不動(dòng)桿菌為主。由于廣譜頭孢菌素和碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，鮑曼不動(dòng)桿菌出現(xiàn)多藥耐藥、泛耐藥，甚至是全耐藥。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率普遍較高;對(duì)妥布霉素、左旋氧氟沙星的耐藥率為50%～60%;對(duì)其他抗菌藥物的耐藥率均大于60.0%;對(duì)氨曲南的耐藥率達(dá)100.0%。哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院血培養(yǎng)分離出的病原菌分布廣泛，耐藥差異較大，為提高患者菌血癥、敗血癥的診斷及治愈率，控制細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，應(yīng)及時(shí)、準(zhǔn)確地對(duì)血培養(yǎng)分離出的病原菌進(jìn)行監(jiān)測(cè)，指導(dǎo)臨床早期合理使用抗菌藥物。

［1］覃凌，王慕云.血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的目標(biāo)性監(jiān)測(cè)與假陽(yáng)性的控制［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(19):4374-4375.

［2］Bhattacharya S，Mondal AS.Clinical microbiology in the intensive care unit:strategic and operational characteristics［J］.Indian J Mde Microbiol，2010，28(1):5-10.

［3］Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Twenty-Second Informational Supplement［S］.CLSI，2012.

［4］孫國(guó)全，王倩，褚云卓，等.28179例血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析［J］.微生物學(xué)雜志，2013，33(5):102-105.

［5］劉行超，曾桂芬，費(fèi)燕楠，等.3年醫(yī)院感染主要病原菌的耐藥性及應(yīng)對(duì)措施［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(9):1903-1905.

［6］洪亞明，范國(guó)萍，朱月霞.血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(24):5645-5647.

［7］Shen P，Wei ZQ，Jiang Y，et al.Novel Genetic Environment of the Carbapenem-Hydrolyzingβ-Lactamase KPC-2 among Enterobacteriaceae in China［J］.Antimicrob Agents Chemother，2009，54(10):4333-4338.