吉維民

(江蘇省寶應(yīng)縣人民醫(yī)院，江蘇 寶應(yīng) 225800)

慢性阻塞性肺病(COPD)下呼吸道細(xì)菌感染的檢測(cè)越來(lái)越普及，革蘭陰性致病菌是臨床COPD患者感染的主要病原菌，由于廣譜抗菌藥物的大量使用，其耐藥菌株日益增多，且非發(fā)酵菌有增高趨勢(shì)［1］。對(duì)其近期江蘇省寶應(yīng)縣人民醫(yī)院分離的下呼吸道革蘭陰性致病菌的分布情況及耐藥性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1 材料與方法

1.1 材料

標(biāo)本來(lái)源為江蘇省寶應(yīng)縣人民醫(yī)院2011年1月至2013年7月就診的門診及住院COPD患者深咳的合格痰標(biāo)本，所分離出的革蘭陰性桿菌病原菌，去除同一患者的重復(fù)菌株，共355株。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn) 采用API試劑盒，按微生物室常規(guī)方法進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌 ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603和銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.2.2 超廣譜 β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的檢測(cè) 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs檢測(cè)采用頭孢他啶或頭孢噻肟單藥MIC與加入克拉維酸后MIC相比，降低超過(guò)3個(gè)倍比稀釋濃度，即判定為ESBLs陽(yáng)性［2］。

2 結(jié)果與分析

2.1 慢性阻塞性肺病(COPD)患者下呼吸道感染革蘭陰性桿菌的分布情況

COPD患者下呼吸道檢出細(xì)菌的種類及分布，近期共分離出516株細(xì)菌，其中革蘭陰性桿菌355株，占68.8%。革蘭陰性桿菌的分布情況見表1。

表1 慢性阻塞性肺病(COPD)患者下呼吸道感染革蘭陰性桿菌的分布情況Table 1 Constituent ratios of the Lower respiratory tract infection COPD patient pathogenic bacteria causing the gram-negative bacilli infections

2.2 腸桿菌科常見革蘭陰性細(xì)菌對(duì)13種抗菌藥物的耐藥率

大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率分別為 37.6%(38/101)、32.9%(24/73)。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌及其產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)13種抗菌藥物的耐藥率見表2。

表2 腸桿菌科常見革蘭陰性細(xì)菌對(duì)13種抗菌藥物的耐藥率(%)Table 2 13 kinds drug resistance rates of the main gram-negative bacilli bacteria(%)

2.3 非發(fā)酵革蘭陰性桿菌對(duì)10種抗菌藥物的耐藥率

檢驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 常見非發(fā)酵革蘭陰性細(xì)菌對(duì)10種藥物的耐藥率(%)Table 3 10 kinds drug resistance rates of the main non-fermenting gram-negative bacteria(%)

3 討論

β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的關(guān)鍵酶，由質(zhì)粒介導(dǎo)，通過(guò)質(zhì)粒傳播，可水解含氧亞氨基的β-內(nèi)酰胺類抗生素，使其失活，能被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制［3］。本研究分離出革蘭陰性細(xì)菌355株，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株分別為37.6%、32.9%，其對(duì)大多數(shù)抗菌藥物耐藥，產(chǎn)酶株明顯高于非產(chǎn)酶株。如頭孢唑啉、頭孢呋辛，不同地區(qū)產(chǎn)ESBLs類型不同，在歐美流行的以水解頭孢他啶為主的TEM和SHV型，在我國(guó)較少見，尤其是TEM型，我國(guó)流行的ESBLs主要是以水解頭孢噻肟為主的CTX-M型，可能與大量使用頭孢噻肟有關(guān)。腸桿菌科細(xì)菌還可產(chǎn)生另外一種β-內(nèi)酰胺酶即AmpC酶，它是由染色體介導(dǎo)的一種頭孢菌素酶，自然狀況下細(xì)菌產(chǎn)生此種酶較少，這可能是頭孢他啶和頭孢西丁對(duì)腸桿菌屬細(xì)菌抗菌活性低的原因［4］。碳青霉烯類對(duì)腸桿菌科細(xì)菌有極強(qiáng)的抗菌活性，耐藥率為0～1.6%，其次為哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星;喹諾酮類藥物環(huán)丙沙星出現(xiàn)較高耐藥，可能是病人及院內(nèi)長(zhǎng)期使用此類抗菌藥物，產(chǎn)生耐藥菌株［5］。對(duì)于腸桿菌科產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，碳青霉烯類仍具極強(qiáng)的抗菌活性，耐藥率為0～1.6%，其次為含酶抑制劑復(fù)合物和頭霉素類。

非發(fā)酵菌銅綠假單胞菌臨床較常見，本研究證實(shí)占革蘭陰性菌分離株的16.6%。它具有多重耐藥，銅綠假單胞菌對(duì)10種抗菌藥物的耐藥率均在20%以上，較好的抗菌藥物有美羅培南、阿米卡星和頭孢吡肟。銅綠假單胞菌可產(chǎn)生多種β-內(nèi)酰胺酶，如 ESBLs、AmpC 酶和金屬 β-內(nèi)酰胺酶等，其中產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶是銅綠假單胞菌耐碳青霉烯類抗生素的主要原因之一。鮑曼不動(dòng)桿菌占18.3%，對(duì)碳青霉烯類較為敏感，耐藥率為6.2%，對(duì)其他抗菌藥物的耐藥率均在40%以上，耐藥機(jī)制包括產(chǎn)生多種β-內(nèi)酰胺酶和氨基糖甙類修飾酶，DNA旋轉(zhuǎn)酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ的基因突變，青霉素結(jié)合蛋白(PBPs)親合力的改變等。研究發(fā)現(xiàn)鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥株與敏感株的區(qū)別在于基因序列中是否存在86 kb的耐藥基因片段，耐藥株的基因序列中具有此基因片段，而敏感株缺乏［6］。對(duì)于多重耐藥的銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌引起的感染，臨床上可采用聯(lián)合多種抗菌藥物給予治療［7］。嗜麥芽窄食單胞菌占5.9%，對(duì)碳青霉烯類高度耐藥為100%，但對(duì)環(huán)丙沙星和替卡西林/克拉維酸較敏感。

［1］吉維民.慢性阻塞性肺病患者下呼吸道感染細(xì)菌培養(yǎng)及耐藥分析［J］.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，16(32):39-40.

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［5］吉維民.ICU患者醫(yī)院內(nèi)感染病原菌分布及耐藥分析［J］.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31(4):402-404.

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