衛(wèi)亞麗+鐘簫+湯洪敏

摘要：利用紫外可見分光光度儀，在400～800 nm范圍內(nèi)對(duì)1，8-二羥基蒽醌的吸收光譜進(jìn)行掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)；探討提取次數(shù)、提取濃度、提取時(shí)間、料液比等單因素對(duì)茜草中總蒽醌的提取效果，在此基礎(chǔ)上，通過L9（34）正交試驗(yàn)，確定總蒽醌的最佳提取工藝。結(jié)果表明，茜草總蒽醌的最大吸收波長(zhǎng)為511 nm；對(duì)照品1，8-二羥基蒽醌的吸收度與濃度線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.999 46；茜草總蒽醌最佳提取工藝為料液比1 g ∶12 mL、提取時(shí)間1.5 h、提取次數(shù)3次、乙醇濃度70%。

關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；茜草；總蒽醌；提取

中圖分類號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2014）08-0268-02

茜草（Rubia Cordifolia L.）為茜草科植物，別稱活血草、鋸子草、拉拉草、纏老鼠、粘粘草、血見愁等，多年生攀援草本，主產(chǎn)于陜西、江蘇、安徽、河南、山東，春、秋2季采挖，根及根莖干燥藥用，性寒、味苦，歸肝經(jīng)，具有涼血、止血、祛瘀、通經(jīng)之功效，臨床上用于吐血、崩漏下血、外傷出血、經(jīng)閉瘀阻、關(guān)節(jié)痹痛、跌打腫痛等病癥^[1-2]，特別對(duì)心腦血管疾病療效顯著。

蒽醌類物質(zhì)不僅在藥用方面有極大的發(fā)展?jié)摿Γ铱勺鳛樘烊簧赜糜谑称诽砑觿?，安全性高，具有營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值，逐漸受到人們的重視^[3-5]。茜草蒽醌類物質(zhì)的研究報(bào)道較多^[6-11]，大多是對(duì)其組成和結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，對(duì)提取工藝的研究報(bào)道較少。采用正交試驗(yàn)，研究4因素（乙醇濃度、提取次數(shù)、時(shí)間、料液比）3水平醇提工藝，采用紫外可見分光光度儀測(cè)定總蒽醌含量，確定最佳醇提條件，為工業(yè)化提取茜草總蒽醌提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器材料

UV-cary300型紫外可見分光光度儀；W201B恒溫水浴鍋，上海中生生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；AEG-45SM電子天平（1/100 000），日本島津公司生產(chǎn)；1，8-二羥基蒽醌，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；R-201型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海中生科技有限公司生產(chǎn)；無水乙醇、三氯甲烷及其他試劑均為分析純。茜草購自貴陽市醫(yī)藥公司，產(chǎn)地陜西。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定 精確稱取1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，甲醇溶解，定容至100 mL；吸取1 mL水浴蒸干，加0.5%醋酸鎂-甲醇溶液，搖勻使之溶解，10 mL容量瓶定容；以0.5%醋酸鎂-甲醇溶液作空白溶液，用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)溶液在500～800 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，確定其最大吸收波長(zhǎng)。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精確稱取1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，甲醇溶解，定容至100 mL；分別精確吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL減壓蒸干，加0.5%醋酸鎂-甲醇溶液，搖勻使之溶解，10 mL容量瓶定容；以0.5%醋酸鎂-甲醇溶液作空白，在波長(zhǎng)511 nm處測(cè)量吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3 茜草總蒽醌的提取和含量測(cè)定^[6]精確稱取茜草10.0 g，按照不同料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)和提取劑濃度對(duì)茜草總蒽醌進(jìn)行提取，制成提取液并記錄其體積；精確量取10.0 mL提取液于50 mL圓底燒瓶中，減壓回收溶劑，加20%硫酸溶液20 mL、10%三氯化鐵溶液100 mL，沸水加熱回流水解60 min，并不斷搖振；回流液冷卻至室溫，依次加入30、20、20 mL三氯甲烷，回流10 min，吸出三氯甲烷層，反復(fù)抽提至三氯甲烷層無色，合并三氯甲烷層，減壓回收溶劑；殘?jiān)尤?.5%醋酸鎂-甲醇液溶解，25 mL容量瓶定容，于511 nm處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線讀出樣品中總蒽醌化合物的含量。

1.2.4 茜草總蒽醌單因素試驗(yàn) （1）不同提取次數(shù)。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比1 g ∶10 mL、提取時(shí)間2 h、70%乙醇 100 mL 作為浸提劑的條件下，分別提取1、2、3、4次，過濾、合并所得濾液即為提取液，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（2）不同浸提劑濃度。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比1 g ∶10 mL、提取時(shí)間1 h、提取次數(shù)為1次的條件下，分別以濃度為60%、70%、75%、80%乙醇溶液進(jìn)行提取，并對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（3）不同提取時(shí)間。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比為 1 g ∶10 mL、乙醇濃度70%、提取次數(shù)為1次的條件下，分別提取1.0、1.5、2.0、3.0 h，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（4）不同料液比。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在乙醇濃度70%、提取次數(shù)為1次、時(shí)間1.0 h的條件下，分別以料液比為1 g ∶6 mL、1 g ∶8 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL加入乙醇溶液進(jìn)行提取，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。

1.2.5 正交試驗(yàn)優(yōu)化工藝設(shè)計(jì) 以總蒽醌化合物含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法L9（34）對(duì)茜草樣品進(jìn)行總蒽醌的提取，考察茜草總蒽醌最優(yōu)提取工藝（表1）。

為B、C、D，即提取時(shí)間﹥提取次數(shù)﹥料液比﹥乙醇濃度；總蒽醌最佳提取條件為A2B3C3D2，即浸提時(shí)間為1.5 h、提取次數(shù)為3次、乙醇濃度為70%、料液比為1 g ∶12 mL。在最優(yōu)提取條件下，茜草總蒽醌的提取率為12.45%。

3 小結(jié)

茜草中含有豐富的蒽醌類化合物，本試驗(yàn)詳細(xì)探討茜草中蒽醌類物質(zhì)的提取工藝，為茜草的進(jìn)一步開發(fā)利用提供了有益的參考。雖然提取的次數(shù)和時(shí)間越多越好，但結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐，最佳提取工藝為浸提時(shí)間為1.5 h、提取次數(shù)為3次、乙醇濃度為70%、料液比為1 g ∶12 mL，此時(shí)，總蒽醌的提取率最高，為12.45%。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典：一部[M]. 2010版. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010，218.

[2]楊連榮，周慶華，張哲鋒，等. 茜草的化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中醫(yī)藥信息，2007，24（1）：21-23.

[3]張 琳，彭 亮，胡本祥. 茜草的化學(xué)成分研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代中醫(yī)藥，2008，28（2）：52-54.

[4]余旭東，楊季菱. 茜草與茜草炭藥理作用比較研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2007，13（9）：53-56.

[5]許蘭芝，趙世琴，胡慶偉，等. 茜草總蒽醌抗炎抗風(fēng)濕作用及機(jī)制[J]. 濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，24（1）：11-13.

[6]陳 星，王 侃，單鳴秋，等. UPLC測(cè)定茜草炭中4種醌類成分的含量[J]. 中國(guó)中藥雜志，2012，37（19）：2922-2925.

[7]陳小全，楊曉東，邵輝瑩，等. 超聲波作用下提取茜草色素及穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)[J]. 泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，34（3）：173-176.

[8]浦益瓊，王 冰，張 彤，等. 大孔樹脂柱層析法制備茜草總醌提取物的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中成藥，2013，35（9）：1900-1905.

[9]衛(wèi)亞麗，梁 芳，湯洪敏. 中藥茜草中總蒽醌含量的測(cè)定[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（8）：51-53.

[10]蘇靜慧，呂強(qiáng)三，李紅霞. 超聲波法提取茜草中蒽醌成分[J]. 河北理工大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，33（4）：101-104.

[11]浦益瓊，王 冰，張 彤，等. 茜草提取物中大葉茜草素測(cè)定的方法研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（6）：94-96.endprint

摘要：利用紫外可見分光光度儀，在400～800 nm范圍內(nèi)對(duì)1，8-二羥基蒽醌的吸收光譜進(jìn)行掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)；探討提取次數(shù)、提取濃度、提取時(shí)間、料液比等單因素對(duì)茜草中總蒽醌的提取效果，在此基礎(chǔ)上，通過L9（34）正交試驗(yàn)，確定總蒽醌的最佳提取工藝。結(jié)果表明，茜草總蒽醌的最大吸收波長(zhǎng)為511 nm；對(duì)照品1，8-二羥基蒽醌的吸收度與濃度線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.999 46；茜草總蒽醌最佳提取工藝為料液比1 g ∶12 mL、提取時(shí)間1.5 h、提取次數(shù)3次、乙醇濃度70%。

關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；茜草；總蒽醌；提取

中圖分類號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2014）08-0268-02

茜草（Rubia Cordifolia L.）為茜草科植物，別稱活血草、鋸子草、拉拉草、纏老鼠、粘粘草、血見愁等，多年生攀援草本，主產(chǎn)于陜西、江蘇、安徽、河南、山東，春、秋2季采挖，根及根莖干燥藥用，性寒、味苦，歸肝經(jīng)，具有涼血、止血、祛瘀、通經(jīng)之功效，臨床上用于吐血、崩漏下血、外傷出血、經(jīng)閉瘀阻、關(guān)節(jié)痹痛、跌打腫痛等病癥^[1-2]，特別對(duì)心腦血管疾病療效顯著。

蒽醌類物質(zhì)不僅在藥用方面有極大的發(fā)展?jié)摿?，而且可作為天然色素用于食品添加劑，安全性高，具有營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值，逐漸受到人們的重視^[3-5]。茜草蒽醌類物質(zhì)的研究報(bào)道較多^[6-11]，大多是對(duì)其組成和結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，對(duì)提取工藝的研究報(bào)道較少。采用正交試驗(yàn)，研究4因素（乙醇濃度、提取次數(shù)、時(shí)間、料液比）3水平醇提工藝，采用紫外可見分光光度儀測(cè)定總蒽醌含量，確定最佳醇提條件，為工業(yè)化提取茜草總蒽醌提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器材料

UV-cary300型紫外可見分光光度儀；W201B恒溫水浴鍋，上海中生生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；AEG-45SM電子天平（1/100 000），日本島津公司生產(chǎn)；1，8-二羥基蒽醌，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；R-201型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海中生科技有限公司生產(chǎn)；無水乙醇、三氯甲烷及其他試劑均為分析純。茜草購自貴陽市醫(yī)藥公司，產(chǎn)地陜西。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定 精確稱取1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，甲醇溶解，定容至100 mL；吸取1 mL水浴蒸干，加0.5%醋酸鎂-甲醇溶液，搖勻使之溶解，10 mL容量瓶定容；以0.5%醋酸鎂-甲醇溶液作空白溶液，用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)溶液在500～800 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，確定其最大吸收波長(zhǎng)。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精確稱取1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，甲醇溶解，定容至100 mL；分別精確吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL減壓蒸干，加0.5%醋酸鎂-甲醇溶液，搖勻使之溶解，10 mL容量瓶定容；以0.5%醋酸鎂-甲醇溶液作空白，在波長(zhǎng)511 nm處測(cè)量吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3 茜草總蒽醌的提取和含量測(cè)定^[6]精確稱取茜草10.0 g，按照不同料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)和提取劑濃度對(duì)茜草總蒽醌進(jìn)行提取，制成提取液并記錄其體積；精確量取10.0 mL提取液于50 mL圓底燒瓶中，減壓回收溶劑，加20%硫酸溶液20 mL、10%三氯化鐵溶液100 mL，沸水加熱回流水解60 min，并不斷搖振；回流液冷卻至室溫，依次加入30、20、20 mL三氯甲烷，回流10 min，吸出三氯甲烷層，反復(fù)抽提至三氯甲烷層無色，合并三氯甲烷層，減壓回收溶劑；殘?jiān)尤?.5%醋酸鎂-甲醇液溶解，25 mL容量瓶定容，于511 nm處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線讀出樣品中總蒽醌化合物的含量。

1.2.4 茜草總蒽醌單因素試驗(yàn) （1）不同提取次數(shù)。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比1 g ∶10 mL、提取時(shí)間2 h、70%乙醇 100 mL 作為浸提劑的條件下，分別提取1、2、3、4次，過濾、合并所得濾液即為提取液，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（2）不同浸提劑濃度。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比1 g ∶10 mL、提取時(shí)間1 h、提取次數(shù)為1次的條件下，分別以濃度為60%、70%、75%、80%乙醇溶液進(jìn)行提取，并對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（3）不同提取時(shí)間。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比為 1 g ∶10 mL、乙醇濃度70%、提取次數(shù)為1次的條件下，分別提取1.0、1.5、2.0、3.0 h，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（4）不同料液比。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在乙醇濃度70%、提取次數(shù)為1次、時(shí)間1.0 h的條件下，分別以料液比為1 g ∶6 mL、1 g ∶8 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL加入乙醇溶液進(jìn)行提取，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。

1.2.5 正交試驗(yàn)優(yōu)化工藝設(shè)計(jì) 以總蒽醌化合物含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法L9（34）對(duì)茜草樣品進(jìn)行總蒽醌的提取，考察茜草總蒽醌最優(yōu)提取工藝（表1）。

為B、C、D，即提取時(shí)間﹥提取次數(shù)﹥料液比﹥乙醇濃度；總蒽醌最佳提取條件為A2B3C3D2，即浸提時(shí)間為1.5 h、提取次數(shù)為3次、乙醇濃度為70%、料液比為1 g ∶12 mL。在最優(yōu)提取條件下，茜草總蒽醌的提取率為12.45%。

3 小結(jié)

茜草中含有豐富的蒽醌類化合物，本試驗(yàn)詳細(xì)探討茜草中蒽醌類物質(zhì)的提取工藝，為茜草的進(jìn)一步開發(fā)利用提供了有益的參考。雖然提取的次數(shù)和時(shí)間越多越好，但結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐，最佳提取工藝為浸提時(shí)間為1.5 h、提取次數(shù)為3次、乙醇濃度為70%、料液比為1 g ∶12 mL，此時(shí)，總蒽醌的提取率最高，為12.45%。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典：一部[M]. 2010版. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010，218.

[2]楊連榮，周慶華，張哲鋒，等. 茜草的化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中醫(yī)藥信息，2007，24（1）：21-23.

[3]張 琳，彭 亮，胡本祥. 茜草的化學(xué)成分研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代中醫(yī)藥，2008，28（2）：52-54.

[4]余旭東，楊季菱. 茜草與茜草炭藥理作用比較研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2007，13（9）：53-56.

[5]許蘭芝，趙世琴，胡慶偉，等. 茜草總蒽醌抗炎抗風(fēng)濕作用及機(jī)制[J]. 濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，24（1）：11-13.

[6]陳 星，王 侃，單鳴秋，等. UPLC測(cè)定茜草炭中4種醌類成分的含量[J]. 中國(guó)中藥雜志，2012，37（19）：2922-2925.

[7]陳小全，楊曉東，邵輝瑩，等. 超聲波作用下提取茜草色素及穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)[J]. 泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，34（3）：173-176.

[8]浦益瓊，王 冰，張 彤，等. 大孔樹脂柱層析法制備茜草總醌提取物的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中成藥，2013，35（9）：1900-1905.

[9]衛(wèi)亞麗，梁 芳，湯洪敏. 中藥茜草中總蒽醌含量的測(cè)定[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（8）：51-53.

[10]蘇靜慧，呂強(qiáng)三，李紅霞. 超聲波法提取茜草中蒽醌成分[J]. 河北理工大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，33（4）：101-104.

[11]浦益瓊，王 冰，張 彤，等. 茜草提取物中大葉茜草素測(cè)定的方法研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（6）：94-96.endprint

摘要：利用紫外可見分光光度儀，在400～800 nm范圍內(nèi)對(duì)1，8-二羥基蒽醌的吸收光譜進(jìn)行掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)；探討提取次數(shù)、提取濃度、提取時(shí)間、料液比等單因素對(duì)茜草中總蒽醌的提取效果，在此基礎(chǔ)上，通過L9（34）正交試驗(yàn)，確定總蒽醌的最佳提取工藝。結(jié)果表明，茜草總蒽醌的最大吸收波長(zhǎng)為511 nm；對(duì)照品1，8-二羥基蒽醌的吸收度與濃度線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.999 46；茜草總蒽醌最佳提取工藝為料液比1 g ∶12 mL、提取時(shí)間1.5 h、提取次數(shù)3次、乙醇濃度70%。

關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；茜草；總蒽醌；提取

中圖分類號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2014）08-0268-02

茜草（Rubia Cordifolia L.）為茜草科植物，別稱活血草、鋸子草、拉拉草、纏老鼠、粘粘草、血見愁等，多年生攀援草本，主產(chǎn)于陜西、江蘇、安徽、河南、山東，春、秋2季采挖，根及根莖干燥藥用，性寒、味苦，歸肝經(jīng)，具有涼血、止血、祛瘀、通經(jīng)之功效，臨床上用于吐血、崩漏下血、外傷出血、經(jīng)閉瘀阻、關(guān)節(jié)痹痛、跌打腫痛等病癥^[1-2]，特別對(duì)心腦血管疾病療效顯著。

蒽醌類物質(zhì)不僅在藥用方面有極大的發(fā)展?jié)摿?，而且可作為天然色素用于食品添加劑，安全性高，具有營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值，逐漸受到人們的重視^[3-5]。茜草蒽醌類物質(zhì)的研究報(bào)道較多^[6-11]，大多是對(duì)其組成和結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，對(duì)提取工藝的研究報(bào)道較少。采用正交試驗(yàn)，研究4因素（乙醇濃度、提取次數(shù)、時(shí)間、料液比）3水平醇提工藝，采用紫外可見分光光度儀測(cè)定總蒽醌含量，確定最佳醇提條件，為工業(yè)化提取茜草總蒽醌提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器材料

UV-cary300型紫外可見分光光度儀；W201B恒溫水浴鍋，上海中生生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；AEG-45SM電子天平（1/100 000），日本島津公司生產(chǎn)；1，8-二羥基蒽醌，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；R-201型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海中生科技有限公司生產(chǎn)；無水乙醇、三氯甲烷及其他試劑均為分析純。茜草購自貴陽市醫(yī)藥公司，產(chǎn)地陜西。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定 精確稱取1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，甲醇溶解，定容至100 mL；吸取1 mL水浴蒸干，加0.5%醋酸鎂-甲醇溶液，搖勻使之溶解，10 mL容量瓶定容；以0.5%醋酸鎂-甲醇溶液作空白溶液，用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)溶液在500～800 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，確定其最大吸收波長(zhǎng)。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精確稱取1，8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，甲醇溶解，定容至100 mL；分別精確吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL減壓蒸干，加0.5%醋酸鎂-甲醇溶液，搖勻使之溶解，10 mL容量瓶定容；以0.5%醋酸鎂-甲醇溶液作空白，在波長(zhǎng)511 nm處測(cè)量吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3 茜草總蒽醌的提取和含量測(cè)定^[6]精確稱取茜草10.0 g，按照不同料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)和提取劑濃度對(duì)茜草總蒽醌進(jìn)行提取，制成提取液并記錄其體積；精確量取10.0 mL提取液于50 mL圓底燒瓶中，減壓回收溶劑，加20%硫酸溶液20 mL、10%三氯化鐵溶液100 mL，沸水加熱回流水解60 min，并不斷搖振；回流液冷卻至室溫，依次加入30、20、20 mL三氯甲烷，回流10 min，吸出三氯甲烷層，反復(fù)抽提至三氯甲烷層無色，合并三氯甲烷層，減壓回收溶劑；殘?jiān)尤?.5%醋酸鎂-甲醇液溶解，25 mL容量瓶定容，于511 nm處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線讀出樣品中總蒽醌化合物的含量。

1.2.4 茜草總蒽醌單因素試驗(yàn) （1）不同提取次數(shù)。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比1 g ∶10 mL、提取時(shí)間2 h、70%乙醇 100 mL 作為浸提劑的條件下，分別提取1、2、3、4次，過濾、合并所得濾液即為提取液，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（2）不同浸提劑濃度。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比1 g ∶10 mL、提取時(shí)間1 h、提取次數(shù)為1次的條件下，分別以濃度為60%、70%、75%、80%乙醇溶液進(jìn)行提取，并對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（3）不同提取時(shí)間。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在料液比為 1 g ∶10 mL、乙醇濃度70%、提取次數(shù)為1次的條件下，分別提取1.0、1.5、2.0、3.0 h，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。（4）不同料液比。準(zhǔn)確稱取4份茜草樣品，在乙醇濃度70%、提取次數(shù)為1次、時(shí)間1.0 h的條件下，分別以料液比為1 g ∶6 mL、1 g ∶8 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL加入乙醇溶液進(jìn)行提取，對(duì)提取液進(jìn)行測(cè)定。

1.2.5 正交試驗(yàn)優(yōu)化工藝設(shè)計(jì) 以總蒽醌化合物含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法L9（34）對(duì)茜草樣品進(jìn)行總蒽醌的提取，考察茜草總蒽醌最優(yōu)提取工藝（表1）。

為B、C、D，即提取時(shí)間﹥提取次數(shù)﹥料液比﹥乙醇濃度；總蒽醌最佳提取條件為A2B3C3D2，即浸提時(shí)間為1.5 h、提取次數(shù)為3次、乙醇濃度為70%、料液比為1 g ∶12 mL。在最優(yōu)提取條件下，茜草總蒽醌的提取率為12.45%。

3 小結(jié)

茜草中含有豐富的蒽醌類化合物，本試驗(yàn)詳細(xì)探討茜草中蒽醌類物質(zhì)的提取工藝，為茜草的進(jìn)一步開發(fā)利用提供了有益的參考。雖然提取的次數(shù)和時(shí)間越多越好，但結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐，最佳提取工藝為浸提時(shí)間為1.5 h、提取次數(shù)為3次、乙醇濃度為70%、料液比為1 g ∶12 mL，此時(shí)，總蒽醌的提取率最高，為12.45%。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典：一部[M]. 2010版. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010，218.

[2]楊連榮，周慶華，張哲鋒，等. 茜草的化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中醫(yī)藥信息，2007，24（1）：21-23.

[3]張 琳，彭 亮，胡本祥. 茜草的化學(xué)成分研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代中醫(yī)藥，2008，28（2）：52-54.

[4]余旭東，楊季菱. 茜草與茜草炭藥理作用比較研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2007，13（9）：53-56.

[5]許蘭芝，趙世琴，胡慶偉，等. 茜草總蒽醌抗炎抗風(fēng)濕作用及機(jī)制[J]. 濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，24（1）：11-13.

[6]陳 星，王 侃，單鳴秋，等. UPLC測(cè)定茜草炭中4種醌類成分的含量[J]. 中國(guó)中藥雜志，2012，37（19）：2922-2925.

[7]陳小全，楊曉東，邵輝瑩，等. 超聲波作用下提取茜草色素及穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)[J]. 泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，34（3）：173-176.

[8]浦益瓊，王 冰，張 彤，等. 大孔樹脂柱層析法制備茜草總醌提取物的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中成藥，2013，35（9）：1900-1905.

[9]衛(wèi)亞麗，梁 芳，湯洪敏. 中藥茜草中總蒽醌含量的測(cè)定[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（8）：51-53.

[10]蘇靜慧，呂強(qiáng)三，李紅霞. 超聲波法提取茜草中蒽醌成分[J]. 河北理工大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，33（4）：101-104.

[11]浦益瓊，王 冰，張 彤，等. 茜草提取物中大葉茜草素測(cè)定的方法研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（6）：94-96.endprint