閆傳真　關(guān)靖宇

[摘 要] 目的：總結(jié)重癥動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液的IL-11與預(yù)后的相關(guān)性。方法：收集檢測26例hunt4-5級重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液標(biāo)本 40份，ElISA法檢測腦脊液IL-11濃度。統(tǒng)計(jì)分析死亡組與生存組腦脊液IL-11檢測結(jié)果。結(jié)果：生存組16例，死亡組10例。死亡組腦脊液IL-11（185.2±84.5 pg/mL）明顯高于生存組（101.2±65.6pg/mL）。結(jié)論：重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液IL-11水平可以作為判斷預(yù)后的有效指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 蛛網(wǎng)膜下腔出血； 腦脊液； 細(xì)胞因子

中圖分類號：R743.35 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：2095-5200（2014）05-060-03

盡管近年來神經(jīng)影像學(xué)技術(shù)、顯微外科和血管內(nèi)介入治療技術(shù)已有長足進(jìn)步，但重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血（ SAH ） 的病死率和致殘率仍很高，尤其是臨床分級不良患者，依然是神經(jīng)外科治療的一個(gè)難點(diǎn)[1]。

患者的格拉斯哥（GCS）評分、蛛網(wǎng)膜下腔的fisher評分、年齡、出血量均提示病情的嚴(yán)重程度及預(yù)后不良程度[2]。但實(shí)驗(yàn)室生物指標(biāo)還是缺乏。研究發(fā)現(xiàn)在高血壓自發(fā)腦出血的患者的血清中 IL-6 水平與腦損傷的程度（包括血腫量與占位效應(yīng)）相關(guān)，腦出血后局部與系統(tǒng)的驗(yàn)證反應(yīng)隨疾病的嚴(yán)重程度變化[3]。血清IL-11 的水平與腦出血的預(yù)后也密切相關(guān)，提示IL-11 的水平是腦損傷的有效生物標(biāo)記。 但腦脊液IL-11 的水平是否與重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血預(yù)后相關(guān)，尚無報(bào)道。本項(xiàng)研究收集檢測重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液標(biāo)本檢測腦脊液IL-11濃度。統(tǒng)計(jì)分析死亡組與生存組腦脊液IL-11結(jié)果。研究總結(jié)重癥動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液的IL-11與預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對象

26例患者，男11例，女15例。年齡22-84歲，平均（54.3±12.0）歲。hunt-hess分級4級20例，5級6例?；颊叱霈F(xiàn)腦疝的選擇開顱手術(shù)。未出現(xiàn)腦疝的選擇腦室外引流術(shù)。

12例行腦室外引流：均在局麻下進(jìn)行，選擇額角穿刺點(diǎn)，局部麻醉，切開頭皮約0.5cm，顱錐鉆孔，引流管穿刺約5cm，見血性腦脊液流出后，固定引流管，接通引流系統(tǒng)，最高點(diǎn)置于外耳道連線上15cm。

14例行開顱動脈瘤夾閉：均在全麻下進(jìn)行，均取翼點(diǎn)入路，切開頭皮，皮瓣懸吊，骨窗成型約5×5cm，“Y”切開硬膜，分離蛛網(wǎng)膜，暴露載瘤動脈及動脈瘤頸，夾閉動脈瘤，減張縫合硬膜，棄骨瓣，置硬膜外引流，縫合頭皮。其中四例患者因腦室積血同時(shí)行腦室外引流術(shù)。

1.2 研究方法

腦脊液通過腦室外引流管及術(shù)中抽取腦池中腦脊液獲得，腦脊液標(biāo)本離心20min，取上清-80℃保存。ELISA法檢測（制劑購于R&D 公司）：用0.05M PH9.碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/mL。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1mL，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3min。加一定稀釋的待檢樣品0.1mL于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1h，然后洗滌。同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔。于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1mL。37℃孵育0.5～1h，洗滌。于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1mL，37℃，10～30min。于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05mL。到酶標(biāo)儀上讀數(shù)（OPD為底物是讀數(shù)波長為490nm，TMB為底物時(shí)波長為450nm）。

計(jì)劃收集所有患者前三天腦脊液標(biāo)本[3]，因?yàn)樵诟哐獕耗X出血的研究中，發(fā)病前三天的腦脊液炎癥反應(yīng)程度與預(yù)后密切相關(guān)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)間比較采用χ2檢驗(yàn)與fisher精確概率法，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腦脊液收集

26例患者共收集標(biāo)本40例（計(jì)劃收集所有患者前三天腦脊液標(biāo)本，但開顱手術(shù)患者未行腦室外引流的僅能術(shù)中收集一次。10例死亡患者僅能收集到死亡前一天。）。

收集方式：通過腦室外引流管12例，開顱術(shù)中獲得14例，其中4例開顱合并腦室外引流。

收集時(shí)間分布：40份腦脊液標(biāo)本，發(fā)病第一天收集20份（10例發(fā)病當(dāng)天開顱手術(shù)者+4例開顱手術(shù)合并腦室外引流者+6例當(dāng)天行腦室外引流者），第二天14份（6例發(fā)病第二天行腦室外引流者+4例第一天行腦室外引流生存者+4例開顱手術(shù)合并腦海外引流生存者），第三天8份（6例腦室外引流管生存者+2例開顱手術(shù)合并腦海外引流生存者），第四天8份（6例腦室外引流管生存者+2例開顱手術(shù)合并腦海外引流生存者）。

2.2 生存組16例，死亡組10例

死亡組腦脊液IL-11（185.2±84.5 pg/mL）明顯高于生存組（101.2±65.6pg/mL），P<0.05，（本組患者病例數(shù)較少，僅能應(yīng)用fisher精確概率法）。

3 討論

中樞神經(jīng)系統(tǒng)是一個(gè)相對封閉且由其自身內(nèi)部動態(tài)調(diào)節(jié)平衡的系統(tǒng)，正常生理情況下，血腦屏障可以限制各種致病因子侵犯 。一旦病原體侵入，誘發(fā)局部的炎癥反應(yīng)，同時(shí)由于血腦屏障受損、通透性的增加，各種炎性細(xì)胞及因子侵入，產(chǎn)生免疫病理過程。

腦損傷早期，腦組織破壞，產(chǎn)生了大量刺激免疫系統(tǒng)的抗原，血腦屏障破壞、血管通透性增高，大量炎性細(xì)胞浸潤和激活。小膠質(zhì)細(xì)胞活躍，星形膠質(zhì)細(xì)胞增生，氧自由基和興奮性氨基酸增多。同時(shí)傷后腦水腫，組織缺血、缺氧，產(chǎn)生二次繼發(fā)腦損害引起強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答過程[3]。

另外，動物實(shí)驗(yàn)研究表明，不管是在顱腦損傷的臨床還是動物實(shí)驗(yàn)中。急性顱腦損傷的病理過程與炎性細(xì)胞因子關(guān)系密切[4]。

在眾多的細(xì)胞因子中，IL-11是一種負(fù)有多種生物活性的多潛能細(xì)胞因子，同時(shí)具有抗炎作用。可以抑制破骨細(xì)胞活性，改變神經(jīng)分型，刺激組織纖維化，調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞及B細(xì)胞功能[5-8]。健康人血清中的IL-11參考值不超過30 pg/mL，IL-11的半衰期很短，經(jīng)肝腎迅速代謝。僅有尿中可檢測到少量IL-11，因?yàn)槟I小管的重吸收作用[9]。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元體外增殖中發(fā)現(xiàn)有 IL-11。體外實(shí)驗(yàn)中IL-11刺激神經(jīng)干細(xì)胞的增殖并是神經(jīng)發(fā)育的重要調(diào)節(jié)因子[10]。臨床上發(fā)現(xiàn)IL-11參與哮喘患者氣道粘膜下纖維化與慢性重建并與疾病嚴(yán)重程度正相關(guān)[11]。

本項(xiàng)研究提示腦脊液中IL-11水平明顯與蛛網(wǎng)膜下腔出血患者的嚴(yán)重程度相關(guān)。結(jié)果說明隨著腦組織損傷的嚴(yán)重程度加大，釋放到腦脊液中的炎癥因子明顯增多。同時(shí)因?yàn)镮L-11的半衰期短，使其可成為腦損傷的實(shí)時(shí)標(biāo)記，反映腦損傷的嚴(yán)重程度并預(yù)測預(yù)后。為重度蛛網(wǎng)膜下腔出血的預(yù)后提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

另外，本項(xiàng)研究雖然沒有腦積水患者，仍需要討論腦積水，因?yàn)槟X積水的發(fā)生是影響腦出血預(yù)后的重要因素[12]。而蛛網(wǎng)膜下腔出血是誘發(fā)腦積水的重要原因，因而IL-11的升高無疑間接證明了其發(fā)生的原因。血清IL-11水平與腦積水也明顯相關(guān)。分析原因可能是IL-11刺激中腦導(dǎo)水管內(nèi)膜下纖維增生。

本項(xiàng)研究中腦室外引流應(yīng)用12例，其中部分引流目的不是因?yàn)槟X積水，而是引流蛛網(wǎng)膜下腔積血，特別是腦室內(nèi)積血，因而未就是否有腦積水及其與IL-11關(guān)系做以分析。

總之，本項(xiàng)研究顯示，對于重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血的患者，腦脊液的IL-11水平可以反映疾病的嚴(yán)重程度，預(yù)測預(yù)后。但導(dǎo)致IL-11增高釋放入中樞神經(jīng)系統(tǒng)的機(jī)制以及影響受損腦組織IL-11的因素需要進(jìn)一步研究，另外，由于標(biāo)本數(shù)目有限，關(guān)于IL-11在發(fā)病后時(shí)間推移后的變化需要進(jìn)一步研究。

參 考 文 獻(xiàn)

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