樊瑞芬，趙蓮英，瞿 峰，王桃霞，王銀龍，李 勇，趙世峰

（河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院：1.腎內(nèi)科；2.檢驗(yàn)科；3.病理科；4.神經(jīng)內(nèi)科，河北邯鄲 056002；5.河北省邯鄲市第二醫(yī)院內(nèi)科 056002；6.冀中能源峰峰集團(tuán)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北邯鄲 056002）

高血壓是嚴(yán)重威脅人類健康的隱形殺手，可以引起心腦腎重要器官功能損害。作者選擇了182例原發(fā)性高血壓（EH）患者，檢測(cè)尿微量清蛋白（mALB）及尿足細(xì)胞標(biāo)志蛋白podocalyxin（PCX）等，探討不同年齡、不同血壓分級(jí)與腎臟損害的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院門(mén)診、住院EH病史5年以上，腎功能正常的患者182例，其中男106例，年齡40～78歲，女76例，年齡42～80歲，均符合2004年WHO及2010年中國(guó)高血壓防治指南高血壓病診斷標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，收縮壓（SBP）≥140 mm Hg和（或）舒張壓（DBP）≥90mm Hg，其中EH 1級(jí)51例，2級(jí)73例，3級(jí)58例。排除糖尿病、腎血管性、慢性腎臟病的患者?；颊呔?種或2種降壓藥（鈣拮抗劑和／或美托洛爾）。另選取本院體檢中心的健康體檢者30例，其中男18例，年齡36～74歲，女12例，年齡35～73歲，作為對(duì)照組。兩組年齡、性別腎功能均具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 尿蛋白定量測(cè)定 收集各組晨7：00至次日晨7：00全部尿液，測(cè)量并記錄24h尿量，混勻，取20mL送檢。

1.2.2 mALB測(cè)定 收集各組清晨首次清潔中段尿10mL，2 500r／min離心10min后取上清液，一部分用免疫比濁法測(cè)定mALB，試劑盒為英國(guó)朗道廠家提供，所用儀器為日立7170全自動(dòng)生化分析儀。另一部分保存于－80℃低溫冰箱中，避免反復(fù)凍融，待檢。

1.2.3 PCX測(cè)定 取上述備檢尿標(biāo)本，由美國(guó)R＆D公司提供PCX ELISA試劑盒，用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入PCX抗原、生物素化的抗人PCX抗體、辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的抗生物素蛋白，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物四甲基聯(lián)苯胺（TMB）顯色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值，計(jì)算樣品濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用s表示，正態(tài)分布的兩組均數(shù)間比較用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組尿蛋白定量、mALB、PCX比較 與對(duì)照組比較，高血壓組mALB、PCX顯著升高（P＜0.01），尿蛋白定量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組尿蛋白定量、mALB、PCX比較s）

表1 兩組尿蛋白定量、mALB、PCX比較s）

組別 n 尿蛋白定量（g／24h） mALB（mg／L） PCX（ng／mL）30 0.096±0.024 11.200±5.900 2.032±0.652高血壓組對(duì)照組182 0.110±0.037 35.700±12.200 9.295±1.586

2.2 不同年齡組患者尿蛋白定量、mALB、PCX比較 與小于60歲組mALB、PCX比較，其余兩組顯著升高（P＜0.05）；小于60歲組尿蛋白定量與其余兩組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同年齡患者尿蛋白定量、mALB、PCX比較s）

表2 不同年齡患者尿蛋白定量、mALB、PCX比較s）

年齡 n 尿蛋白定量（g／24h）mALB（mg／L）PCX（ng／mL）85 0.100±0.056 9.230±9.160 5.250±2.060 60～＜70歲 37 0.090±0.135 20.850±5.060 14.940±3.400 70～80歲＜60歲60 0.110±0.256 21.790±6.590 15.570±4.140

2.3 不同年齡患者尿蛋白定量、mALB、PCX陽(yáng)性率比較 與不同年齡組尿蛋白定量陽(yáng)性率比較，mALB、PCX陽(yáng)性率顯著增加（P＜0.01）；與不同年齡組mALB陽(yáng)性率比較，PCX陽(yáng)性率顯著增加（P＜0.05）。70～80歲各指標(biāo)陽(yáng)性率與小于60歲組比較顯著升高（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同年齡患者尿蛋白定量、mALB、PCX陽(yáng)性率比較［n（%）］

2.4 不同高血壓分級(jí)尿蛋白定量、mALB、PCX的比較 與對(duì)照組尿蛋白定量、mALB、PCX比較，EH各組顯著升高（P＜0.05）；EH 1級(jí)組尿蛋白定量與EH 3級(jí)組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與EH 1級(jí)組 mALB、PCX比較，EH 3級(jí)組顯著升高（P＜0.01）。見(jiàn)表4。

表4 對(duì)照組與不同分級(jí)EH尿蛋白定量、mALB、PCX的比較s）

表4 對(duì)照組與不同分級(jí)EH尿蛋白定量、mALB、PCX的比較s）

分組 n 尿蛋白定量（g／24h）mALB（mg／L）PCX（ng／mL）30 0.096±0.024 11.200±5.900 2.032±0.652 EH 1級(jí)組 51 0.103±0.028 10.580±4.830 3.390±1.214 EH 2級(jí)組 74 0.261±0.167 16.850±6.620 7.480±1.750 EH 3級(jí)組對(duì)照組57 0.282±0.365 39.950±7.210 10.230±2.850

3 討 論

足細(xì)胞是高度特化的腎小球臟層上皮細(xì)胞，是組成腎小球?yàn)V過(guò)膜的主要成分，也是阻止大分子濾過(guò)的最后屏障。由于它帶有負(fù)電荷，是防止突起之間粘連，維持裂孔膜結(jié)構(gòu)和腎小球?yàn)V過(guò)膜電荷屏障的物質(zhì)基礎(chǔ)［1－2］。當(dāng)糖尿病、高血壓等疾病引起腎臟損傷時(shí)，足細(xì)胞首當(dāng)其沖。開(kāi)始表現(xiàn)為形態(tài)方面的改變，如足突融合、收縮，胞體縮小，假囊腫形成等變化。接著與血管基底膜剝離，脫落至腎小囊中，隨尿液排出。足細(xì)胞脫落后，血管基底膜裸露，打破了毛細(xì)血管袢血壓與腎小囊內(nèi)靜水壓之間的平衡，毛細(xì)血管擴(kuò)張，直至與腎小囊壁層細(xì)胞粘連［3］。此外，足細(xì)胞脫落后大量蛋白滲漏，使毛細(xì)血管袢透明樣變性。這些因素都是最后導(dǎo)致腎小球硬化的關(guān)鍵［4］。最近幾年大量的研究證實(shí)［5－6］，尿液中足細(xì)胞的出現(xiàn)是診斷早期微小病變和局灶性節(jié)段性腎小球硬化最有效的方法，采用鏡檢方法來(lái)檢測(cè)尿液中的足細(xì)胞，靈敏度太低，現(xiàn)在多通過(guò)免疫熒光法、免疫酶聯(lián)法等免疫學(xué)方法檢測(cè)足細(xì)胞上的標(biāo)志蛋白來(lái)檢測(cè)尿液中的足細(xì)胞。足細(xì)胞的標(biāo)志蛋白主要有nephrin、podocin、CD2相關(guān)蛋白（CD2AP）和PCX等。其中，PCX是足細(xì)胞中最特異的標(biāo)志蛋白，只存在于足細(xì)胞上［7－8］。因此，已有研究采用免疫比濁法定量檢測(cè)尿液中PCX，用于糖尿病腎病的早期診斷，尿液中PCX是否可以用于EH腎損害的早期診斷，未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。

本研究發(fā)現(xiàn)EH患者24h尿蛋白定量與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí)，其mALB和PCX明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明mALB、PCX可以較早反映高血壓腎臟損害；從不同年齡、不同高血壓級(jí)別觀察發(fā)現(xiàn)，24h尿蛋白定量無(wú)明顯差異，mALB和PCX差異顯著；70～80歲mALB、PCX比小于60歲組顯著升高，PCX陽(yáng)性率高于mALB陽(yáng)性率，提示隨著年齡的增加高血壓患者腎損害發(fā)病率提高［9］，尿足細(xì)胞反映腎小球損傷較尿蛋白更為敏感，與Yu等［10］研究結(jié)果一致；研究還顯示不同血壓分級(jí)mALB、PCX隨著血壓級(jí)別的升高而升高，說(shuō)明年齡、血壓級(jí)別可以作為EH腎損害的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。mALB、PCX可以作為高血壓病患者腎損害的早期指標(biāo)，尿中檢測(cè)到PCX提示已有腎小球足細(xì)胞損傷，腎小球?yàn)V過(guò)屏障已受損。

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