厲榮玉 歐成舉 陳裕秀

(皖南醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室，安徽 蕪湖 241002)

白色念珠菌大多發(fā)生在機(jī)體免疫力低下或菌群失調(diào)時，如腫瘤、慢性消耗性疾病及長期大量使用廣譜抗生素、免疫抑制劑和激素等過程中易發(fā)生白色念珠菌感染，且病死率較高〔1〕。老年患者的機(jī)體各組織器官功能減退，且多伴有一種或多種基礎(chǔ)疾病，抗感染能力下降，造成院內(nèi)白色念珠菌感染的機(jī)會增多。同時，隨著臨床上抗真菌藥物的廣泛和長期應(yīng)用，白色念珠菌耐藥現(xiàn)象也愈來愈嚴(yán)重〔2〕。本研究分析近期臨床所分離的220株白色念珠菌的耐藥性。

1 材料與方法

1.1菌株來源 2011年1月至2012年5月皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院及宣城地區(qū)醫(yī)院老年病區(qū)住院感染患者的痰液、咽拭子、尿液、糞便等標(biāo)本中分離白色念珠菌220株，其中同一患者同樣標(biāo)本多次分離出相同白色念珠菌者，按1株計算。年齡61～92歲，平均70.6歲。接受2～4種抗生素治療。

1.2試劑與儀器 氯霉素沙保弱培養(yǎng)基、法國科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基購于鄭州博賽生物工程公司；自動微生物鑒定系統(tǒng)VITEK-32、酵母樣真菌鑒定卡YBC、微量稀釋法藥敏試劑盒ATB FUNGUS 3均為法國生物梅里埃公司產(chǎn)品；質(zhì)控菌株近平滑念珠ATCC22019、克柔念珠菌ATCC6258購于中國藥品生物制品檢定所。

1.3菌株分離鑒定 將各種臨床標(biāo)本先接種于氯霉素沙保弱培養(yǎng)基，35℃孵育，培養(yǎng)陽性者，菌落經(jīng)革蘭染色確認(rèn)為酵母樣真菌后，轉(zhuǎn)種至科瑪嘉顯色培養(yǎng)基進(jìn)行初步鑒定，再用VITEK-32的酵母樣真菌鑒定卡(YBC)鑒定。

1.4藥敏試驗 采用ATB FUNGUS 3試劑盒檢測白色念珠菌對5種常用的抗真菌藥物兩性霉素B(AMB)、氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VRC)、5-氟胞嘧啶(FC)的藥敏結(jié)果。結(jié)果按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)抗真菌藥敏試驗標(biāo)準(zhǔn)判定：AMB(MIC)≤1 μg/ml為敏感，≥2 μg/ml為耐藥；FCA MIC≤8 μg/ml為敏感，16～32 μg/ml為中介，≥64 μg/ml為耐藥；ITR MIC≤1 μg/ml為敏感，0.25～0.5 μg/ml為中介，≥4 μg/ml為耐藥；VRC MIC≤0.125 μg/ml為敏感，MIC=2 μg/ml為中介，≥1 μg/ml 為耐藥；5-FC MIC≤ 4 μg/ml為敏感，8～16 μg/ml中介，≥32 μg/ml為耐藥。

2 結(jié) 果

2.1各類臨床標(biāo)本白色念珠菌分離情況 從呼吸道分離的白色念珠菌最多，有180株(81.82％)，其中從痰液中分離出141株(64.09％)，咽拭子中分離出39株(17.73％)。中段尿中21株(9.55％)；胸腹水6株(2.73％)；分泌物5株(2.27％)；血液4株(1.82％)；糞便4株(1.82％)。

2.2基礎(chǔ)疾病 均患有一至多種基礎(chǔ)疾病，其中慢性肺部疾病最多(包括慢性支氣管炎、肺心病、結(jié)核、哮喘等)，共95例；其次為各種腫瘤病人56例；心腦血管疾病41例；肝硬化患者23例；糖尿病5例。

2.3藥敏結(jié)果 大多數(shù)菌株對所測試的5種抗真菌藥物具有較高的敏感性(與臨床療效相符)。其中，對AMB和5-FC敏感率最高，其次為VRC和ITR；FCA的敏感率最低。見表1。

表1 5種抗真菌藥物的藥敏結(jié)果〔n(％)〕

3 討 論

老年病區(qū)各類標(biāo)本白色念珠菌分離情況表明，白色念珠菌感染多見于呼吸道。患者多有較嚴(yán)重的基礎(chǔ)性疾病，住院時間較長，長時間使用廣譜抗生素，導(dǎo)致菌群失調(diào)，白色念珠菌等條件致病性真菌大量繁殖。老年患者年齡較大，肺臟生理功能減退，機(jī)體免疫功能下降，抗感染能力減弱，而呼吸機(jī)、氣管插管等侵入診療則為真菌定殖、生長提供了有利的環(huán)境，呼吸道容易出現(xiàn)反復(fù)感染，從而引起呼吸道白色念珠菌檢出率的升高。

AMB的腎毒性大，臨床應(yīng)用受到一定的限制，而5-FC由于其抗菌范圍較窄，且單用時易產(chǎn)生耐藥性，臨床少用可能是其敏感性高的主要原因。唑類抗真菌藥物對白色念珠菌的耐藥率相對較高，本研究的三種唑類藥物中，以FCA和ITR為代表的三唑類藥物具有抗真菌譜廣，對人體毒副作用小、口服吸收好等優(yōu)點，是目前臨床上治療深部真菌感染的首選藥物，主要用于念珠菌、隱球菌所致的感染。但是，隨著臨床的廣泛使用，其對白色念珠菌的敏感性呈下降趨勢〔3〕，本資料中氟康唑?qū)Π咨钪榫拿舾新蕿?1.82 ％，低于以往文獻(xiàn)報道〔4，5〕。VRC是新型三唑類抗真菌藥物，在臨床應(yīng)用的時間相對較短，并以口服為主，仍保持較高的敏感率，對VRC耐藥的非常少見。另外，需引起重視的是唑類藥物之間存在交叉耐藥趨勢，對ITR耐藥的20株也同時對氟康唑耐藥，可能是由于其有相似的作用機(jī)制，所以容易產(chǎn)生交叉耐藥現(xiàn)象〔6〕。

綜上，白色念珠菌對常用抗真菌藥物存在不同程度的耐藥現(xiàn)象，且呈上升的趨勢，要根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，正確選擇抗真菌藥物，有效控制真菌感染及防止耐藥菌株的增加。

4 參考文獻(xiàn)

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2Pfaller MA，Diekema DJ，Gibbs DL，etal.Results from the ARTEMIS DISK global antifungal surveillance study，1997 to 2007:a 10.5-year analysis of susceptibilities of Candida Species to fluconazole and voriconaz-ole as determined by CLSI standardized disk diffusion〔J〕.J Clin Microbiol，2010；48(4):1366-77.

3陳芝芳，王 冬.白色念珠菌對五種抗真菌藥物敏感性分析〔J〕.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011；31(5)：83-5.

4李 莉，蘇天璐，苗 翠，等.白色念珠菌對臨床常用抗真菌藥物的耐藥性分析〔J〕.中國實驗診斷學(xué)，2011；15(1):126-8.

5孫長貴，王奇軍，張麗君，等.臨床常見念珠菌對四種抗真菌藥物體外敏感性研究〔J〕.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2005；28(6)：654-5.

6吳 穎，劉 偉，萬 哲，等.氟康唑耐藥的白念珠菌對唑類藥物交叉耐藥實驗〔J〕.中國皮膚性病學(xué)雜志，2009； 23(3)：148-9.