王宇峰 叢德毓 高 輝 楚云杰
(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,吉林 長(zhǎng)春 130021)
推拿療法具有改善血液循環(huán),提高機(jī)體免疫力和促進(jìn)機(jī)體新陳代謝的作用,在預(yù)防保健、延緩衰老方面具有良好的作用效果〔1,2〕。本研究觀察推拿療法對(duì)衰老家兔血清中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)及乳酸脫氫酶(LDH)表達(dá)水平的影響及抗衰老作用的效果與機(jī)制。
1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 無(wú)特定病原體(SPF)級(jí)家兔24只,體重2.0~2.5 kg,雌雄各半,購(gòu)自吉林大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供〔合格證:SCXK-(吉)2007-0004〕,正常喂養(yǎng)。隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組和推拿治療組各8只。
1.2儀器與試劑 Σ960型全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國(guó)Metertech公司),T-500型電子天平(美國(guó)雙杰兄弟集團(tuán)有限公司),GS-15R低溫高速離心機(jī)(美國(guó)Beckman公司),APH(上海試劑三廠,批號(hào)20091002),GSH-Px試劑盒(批號(hào):20100428)和LDH試劑盒(批號(hào)20100428)均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。
1.3模型建立 將模型對(duì)照組、推拿治療組家兔建立成亞急性衰老動(dòng)物模型,具體方法如下:分別在第1、4、7天皮下注射2%乙酰苯肼(APH)生理鹽水注射液,第1天注射劑量為5 ml/kg,第4、7天注射劑量為2.5 ml/kg??瞻讓?duì)照組注射等量的生理鹽水。
1.4推拿治療 建模24 h后,對(duì)推拿治療組家兔施以推拿治療,具體方法如下:①采用指揉法,以中指指腹為施術(shù)部位,由上至下輕揉家兔背部膀胱經(jīng)2 min;②采用指推法,以食指、中指指腹為施術(shù)部位,推家兔背部膀胱經(jīng)第1、2側(cè)線各2 min;③采用捏脊法,由下至上捏脊9次;④采用小魚(yú)際擦法,直擦家兔背部,以透熱為度;⑤采用三指摩法,順時(shí)針摩腹2 min;⑥以中指指腹為施術(shù)部位,點(diǎn)按家兔中脘、天樞(雙)、關(guān)元穴各1 min。上述治療15 min/次,1次/d,連續(xù)治療21 d。
1.5標(biāo)本采集與測(cè)定 于治療過(guò)程中的第7、14、21天,對(duì)家兔進(jìn)行耳緣靜脈采血,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)其血清中GSH-Px、LDH的表達(dá)水平,具體操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)。
1.6統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)的組間比較進(jìn)行t檢驗(yàn)。
2.1各組血清GSH-Px水平比較 治療第7、14、21天,推拿治療組血清GSH-Px的水平明顯高于模型對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。
2.2各組血清LDH水平比較 治療的第7、14天,推拿治療組血清LDH水平明顯低于模型對(duì)照組(P<0.05),見(jiàn)表1。
表1 各組血清GSH-Px、LDH表達(dá)水平的比較±s,n=8)
推拿療法一直以來(lái)在預(yù)防保健、延緩衰老方面就具有廣泛的應(yīng)用,其作用與推拿手法的增強(qiáng)免疫功能,加快血液循環(huán),降低血液黏度,改善微循環(huán)等有關(guān)〔3〕。近年來(lái),相關(guān)研究顯示推拿手法對(duì)衰老家兔胸腺中的一氧化氮濃度〔4〕,血清中的超氧化物歧化酶、丙二醛〔5〕等均具有良好的調(diào)整作用,初步揭示了推拿抗衰老的作用機(jī)制。本研究顯示,推拿療法對(duì)亞急性衰老家兔血清中GSH-Px、LDH的表達(dá)水平具有良好的調(diào)整作用。GSH-Px是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化過(guò)氧化氫分解的酶,它特異地催化還原型谷胱甘肽對(duì)過(guò)氧化氫的還原反應(yīng),可以起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。LDH是機(jī)體糖酵解途徑中一種重要的酶,廣泛存在于人體各種組織中,LDH的質(zhì)與量的改變直接影響機(jī)體能量代謝,其高低與損傷程度呈正相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn),推拿療法抗衰老的作用機(jī)制與調(diào)整GSH-Px、LDH的表達(dá)水平密切相關(guān)。
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