譚莉莉 魏亞寧 甄江濤 王婭南 賈友超

(河北大學(xué)附屬醫(yī)院貴賓病房,河北 保定 071000)

近年來，分子生物學(xué)的發(fā)展使基因靶向治療成為腫瘤治療的新方向，現(xiàn)有研究結(jié)果顯示，人表皮生長因子羅體2(HER2)在多種腫瘤組織中均高表達，與胃癌的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)〔1〕，且針對HER2的靶向治療已取得了突破性進展，HER2已經(jīng)成為胃癌治療的靶點〔2〕。絲/蘇氨酸激酶2(AKT2)與多種惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展、生物學(xué)行為以及預(yù)后相關(guān)〔3〕。本研究采用免疫組化(IHC)法檢測胃癌組織、癌旁組織和正常胃黏膜中HER2和AKT2的表達，探討二者與胃癌臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選用2010年8月至2012年11月我院病理科胃癌術(shù)后石蠟標本135例，其中胃癌組織102例作為胃癌組，癌旁組織33例作為癌旁組，另外選用50例正常組織作為對照組。胃癌組中，腫瘤直徑≥5 cm的患者55例，<5 cm的47例；根據(jù)Lauren分型〔4〕：腸型43例，彌漫型51例，混合型8例；根據(jù)WHO國際組織學(xué)分型〔5〕：高分化癌22例，中分化17例，低分化腺癌63例；浸潤程度：T1/T2級37例，T3/T4級65例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移65例，無轉(zhuǎn)移37例；根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟(UICC)臨床TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期38例，Ⅲ～Ⅳ期64例。胃癌標本來源患者活檢前均未接受過放化療與其他針對性的治療，且標本經(jīng)HE染色評判無壞死。

1.2檢測試劑與方法

1.2.1檢測試劑 鼠抗人HER2單克隆抗體、鼠抗人AKT2多克隆抗體SP試劑盒及AEC顯色劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.2.2免疫組化染色 采用免疫組織化學(xué)SP法，取樣本0.4 μm厚切片，對其實施的常規(guī)脫蠟、梯度酒精脫水等步驟遵照試劑說明書進行〔6〕。陽性對照選用已知陽性胃癌組織，以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗為陰性對照〔7〕。樣本切片由兩位資深病理醫(yī)師采用雙盲法判讀。

1.3免疫組織化學(xué)染色結(jié)果判定 免疫組織化學(xué)染色陽性結(jié)果為淡黃色或者棕黃色、棕褐色顆粒，HER2陽性出現(xiàn)在細胞膜〔8〕，AKT2出現(xiàn)在細胞質(zhì)和(或)細胞核。兩名病理醫(yī)師按半定量評分方法獨立評分：先根據(jù)細胞染色強度評分，細胞無變色計0分，細胞顯淺黃色計1分，細胞棕黃色計2分，細胞黃褐色計3分。再隨機選取10個視野在顯微鏡下觀察陽性細胞的百分比，取算術(shù)平均數(shù)，陽性細胞的百分比<10%計0分，10%～20%計1分，21%～50% 計2分，>50% 計 3分。兩個乘積作為每例標本的積分，積分<3分為陰性，≥3分為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行χ2檢驗。采用Pearson進行相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1三種組織中HER2和AKT2的表達 胃癌組、癌旁組及對照組HER2表達分別為17.65%、0.00%和0.00%，胃癌組與癌旁組、對照組相比，差異顯著(χ2=9.835、6.871，均P<0.05)；三組的AKT2表達分別為74.51%、12.12%和12.00%，胃癌組與癌旁組、對照組相比，差異亦顯著(χ2=12.647、8.734，均P<0.05)。癌旁組HER2、AKT2表達與對照組比較均無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.237、0.952，均P>0.05)。

2.2老年胃癌組織HER2、AKT2的表達與臨床病理特征的關(guān)系 表1可見，在老年胃癌組織中，HER2、AKT2的表達與Lauren分型、組織分化程度、漿膜浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分型均相關(guān)(P<0.05)，且AKT2的表達與腫瘤直徑相關(guān)(P<0.05)。

表1 老年胃癌組織HER2、AKT2的陽性表達與臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

2.3老年胃癌組織中HER2和AKT2表達的相關(guān)性分析 采用Pearson進行相關(guān)性分析，HER2和AKT2的表達正相關(guān)(r=0.762，P<0.05)。

3 討 論

胃癌是全球死亡率僅次于肺癌的惡性腫瘤之一，嚴重威脅著人類的身體健康。在我國，胃癌的死亡率居于惡性腫瘤之首，但手術(shù)治療的效果不甚理想，患者術(shù)后五年的生存率還不到30%。胃癌的發(fā)生和發(fā)展是一個多階段、多因素的發(fā)展過程，其發(fā)生、發(fā)展與多種癌基因被激活或者抑癌基因的失活等因素相關(guān)。不少研究表明，HER2和AKT2在胃癌中均有表達〔9，10〕，且對HER2高表達的胃癌患者應(yīng)用曲妥珠單抗能夠使生存期延長40個月以上〔11〕，HER2有望成為一個新的基因治療靶點〔12，13〕。HER2是一種磷酸化受體蛋白，高表達能夠活化細胞信號傳輸系統(tǒng)，實現(xiàn)細胞轉(zhuǎn)化與增殖，最終導(dǎo)致腫瘤細胞的增殖、分化、浸潤以及轉(zhuǎn)移〔14〕。AKT2是絲氨酸/蘇氨酸激酶的一個亞型，主要介導(dǎo)人體內(nèi)PI3K/AKT2信號傳導(dǎo)通路，通過上調(diào)MMP-2，MMP-9等蛋白表達來增強腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，在細胞增殖與凋亡中有重要的功能〔15〕。

目前的研究成果中HER2與胃癌關(guān)系的居多，但是HER2在胃癌組織中的表達難以統(tǒng)一，陽性率從6%～35%，跨度非常大，而且與胃癌的臨床病理特征的關(guān)系尚無定論。梁秀菊等〔16〕認為HER2的高表達與胃癌的部位、分化、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期均有關(guān)。AKT2與胃癌的研究較少，但也結(jié)論相左。談曉紅等〔3〕的研究顯示：AKT2在胃癌中的表達與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期TNM相關(guān)；而鄒紹靜等〔6〕的研究表明AKT2表達與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度、分化程度、Lauren分型均有關(guān)。目前研究成果的差異性可能由于樣本量的抽取、檢測方法及評分標準差異造成。有研究認為，HER2參與的PI3K/AKT信號通路與腫瘤細胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及細胞凋亡的抑制等密切相關(guān)〔13〕，二者聯(lián)合檢測有臨床意義。

本研究這與多數(shù)文獻資料研究一致，說明胃癌與HER2、AKT2表達相關(guān)。另外，本研究與眾多研究成果一致，說明HER2、AKT2的表達可能與胃癌Lauren分型、組織分化程度、漿膜浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分型均相關(guān)。

4 參考文獻

1Kong YC，Jacob JB，F(xiàn)lynn JC，etal.Autoimmune thyroiditis as an indicator of autoimmune sequelae during cancer immuno-therapy〔J〕.Autoimmun Rev，2009;9(1)：28-33.

2Okines AF，Cunningham D.Trastuzumab in gastric cancer〔J〕.Eur J Cancer，2010;46(11)：1949-59.

3談曉紅，馬 鵬，馮義朝.AKT2和PTEN在胃癌中的表達及意義〔J〕.當代醫(yī)學(xué)，2012;11(2)：23-4.

4奚文崎，張本炎，金曉龍，等.198例胃癌手術(shù)標木Her-2蛋白表達與臨床病理的相關(guān)性和靶向治療〔J〕.中國癌癥雜志，2012;20(12)：897-902.

5卞學(xué)藝，葉青青，王 瑤，等.HER2基因擴增和蛋白表達與胃癌臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系〔J〕.胃腸病學(xué)，2011;16(5)：267-71.

6鄒紹靜，陳兆峰，李 敏，等.PI3K /AKT2在胃癌組織表達及其與臨床病理特征和生存期的關(guān)系〔J〕.實用腫瘤雜志，2011;26(4)：346-50.

7季 鑫，武愛文，張連海，等.不同結(jié)果判定標準下胃癌人表皮生長因子受體2的表達及其與臨床病理特征的關(guān)系〔J〕.中華普外科手術(shù)學(xué)雜志，2012;6(3)：238-44.

8劉冀龍.老年人胃癌組織中HER2的表達及其臨床意義〔J〕.中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2012;14(8)：1349-50.

9Li N，Bu X，Tian X，etal.Fatty acid synthase regulates proliferation and migration of colorectal cancer cells via HER2-PI3K/Akt signalink pathway〔J〕.Nutr Cancer，2012;64(6)：864-70.

10Bang YJ，Van Gutsem E，F(xiàn)eyereislnva A，etal.Trastuzumah in combination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER2 positive advanced gastric or gastrn-oesophageal junction cancer (TOGA)：a phase 3，open-label，randomised controlled trial〔J〕.Lancet，2010;376(9742)：687-97.

11Hehler T，Ruschoff J，Ridwelski K，etal.HER2 testing and targeted therapy in advanced gastric cancer〔J〕.Onkologie，2010;33(Suppl4)：26-30.

12Jorgensen JT.Targeted HER2 treatment in advanced gastric cancer〔J〕.Oncology，2010;78 (1)：26-33.

13Hartman Z，Wei JP，Osada T，etal.An adenoviral vaccine encoding full-length inactivated human HER2 exhibits potent immunogenicty and enhanced therapeutic efficacy without oncogenicity〔J〕.Clin Cancer Res，2010；16(5)：1466-77.

14肖隆斌，楊世斌，吳文輝，等.HER2基因擴增與胃癌患者臨床病理及預(yù)后相關(guān)性分析〔J〕.中華普通外科學(xué)文獻，2011;5(6)：480-3.

15周忠笑，魏晰麟，姚建茄，等.AKT抑制劑SH-5對胃癌細胞系BGC-823增殖的影響〔J〕.中國老年醫(yī)學(xué)雜志，2012;32(10)：2115-7.

16梁秀菊，高 明，周 云.胃癌組織EGFR，HER-2與TopoIIα的表達及臨床意義〔J〕.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2010;32(22)：2443-5.