顏 萍 龔旭華

宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤，具有極高的發(fā)病率和死亡率，僅次于乳腺癌[1]。近年來，發(fā)病年齡日趨年輕，若及早發(fā)現(xiàn)并治療，其治愈率可高達90%[2]。人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)感染是誘發(fā)宮頸癌發(fā)病和癌前病變的重要致病因子[3-4]。本文采用液基細胞學檢查(liquid-based cytology test，TCT)結(jié)合高危型HPV檢測宮頸癌前病變，診斷效果顯著，現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 納入標準

①無宮頸手術史；②無子宮切除手術史；③無盆腔放射治療史；④無宮頸上皮內(nèi)病變史；④細胞學檢查無異常。

1.2 一般資料

納入2011年6月-2012年6月我院婦科門診及住院部收治的女性宮頸癌患者204例，年齡18～64歲，平均(36±7)歲。受孕0～6次，平均2次。生產(chǎn)0～4次，平均1次。臨床癥狀包括異常陰道出血，白帶增多，性交后出血等，婦科檢查顯示不同程度宮頸糜爛。

1.3 方法

1.3.1 主要儀器與試劑 TCT儀(新柏氏公司，美國)，SLC-2000B型電子陰道鏡(金科威實業(yè)有限公司，深圳)，HPV分型基因芯片試劑盒(凱普生物技術有限公司，深圳)，實時定量PCR儀(Bio-Rad，美國)。

1.3.2 液基細胞標本采集及處理 收集宮頸頸管和外口處脫落的細胞，盛入裝有細胞保存液的小瓶中。標本中的血液、黏液和炎癥細胞經(jīng)程序化處理后與上皮細胞分離，再經(jīng)由高精密度濾器過濾后轉(zhuǎn)移至經(jīng)靜電處理的載玻片上。制作薄層細胞涂片，固定染色后封片。

1.3.3 HPV檢測 標本移入1.5 ml微量離心管，14 000 r/min離心5 min，吸棄上清液。細胞塊中加入裂解液，100 ℃水浴加熱15 min，14 000 r/min離心5 min。吸取上清液進行PCR擴增。分別檢測包括高危亞型和低危亞型在內(nèi)的共21種基因型。

1.4 診斷標準

細胞學診斷標準：①正常范圍內(nèi)；②鱗狀上皮細胞異常，包括意義不明的不典型鱗狀細胞(ASCUS)、不典型鱗狀細胞(ASCH)、低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)、高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)、鱗狀細胞癌(SCC)；③腺細胞異常，包括宮頸管原位癌(AIS)、不典型腺細胞(AGC)、傾向于腫瘤的不典型腺細胞。陽性指標：HPV DNA≥1.0 mg/L。細胞學>ASCUS者，行宮頸搔刮術，陽性結(jié)果：CINⅠ及以上病變。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，P<0.05表示顯著性差異，具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 TCT檢測結(jié)果

138例患者顯示TCT陽性合并HPV感染。LSIL顯示HPV陽性40例(29.0%)，HSIL顯示HPV陽性10例(7.2%)，ASCUS顯示HPV陽性80例(58.0%)，SCC顯示HPV陽性8例(5.8%)。

2.2 TCT陽性時HPV高危型感染情況

138例TCT陽性標本中具有42例HPV高危型，陽性率為30.4%。LSIL顯示HPV高危12例(30.0%)，HSIL顯示HPV高危4例(40.0%)，ASCUS顯示HPV高危18例(22.5%)，SCC顯示HPV高危8例(100.0%)。不同類型標本HPV高危型感染率具有顯著性差異(P<0.05)。

2.3 TCT結(jié)合HPV檢測

由表1可見，TCT和HPV均為(-)時，則未發(fā)生高度病變。HPV陽性和TCT異常同時存在時，≥CINⅠ的檢出率為53.3%(48/90)。僅TCT異常而HPV(-)時，檢出率為47.8%(11/23)，P<0.05，具有統(tǒng)計學差異。

表1 TCT結(jié)合HPV檢測與組織病理檢查結(jié)果情況比較(例，%)

3 討論

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤，嚴重威脅女性的健康。通過醫(yī)學干預可及早發(fā)現(xiàn)并治療癌前病變，并可有效預防宮頸癌發(fā)生[5]。研究證實，HPV感染是導致宮頸癌變的重要因子[6]。高危型HPV包括多種類型，如16、33、45、56、68等。描述性診斷系統(tǒng)(the bethesda system，TBS)分為正常范圍、ASCUS、SIL和SCC，SIL又分為LSIL和HSIL。為了細胞學和組織學相統(tǒng)一，LSIL即CINⅠ，較少發(fā)展為浸潤癌。HSIL即CINⅡ和CINⅢ，極有可能發(fā)展為浸潤癌[7]。高危型HPV病毒從感染到癌變?nèi)^程均可檢測，同時還可確定細胞形態(tài)變化的原因。高危型HPV檢測直接檢查病因，可將已患宮頸癌變或存在潛在風險的婦女篩選出來，是篩查宮頸癌變的重要手段[8]。

傳統(tǒng)的檢測方法，如巴氏涂片，有較高的假陰性率，原因可能包括：①病變細胞未被轉(zhuǎn)移至載玻片，多數(shù)細胞被丟棄；②涂片質(zhì)量差，不正常細胞被過多的血液、黏液或炎細胞遮蓋[9-10]。近年來，巴氏涂片法已逐步被TCT技術所代替。采用TCT技術，標本取出后可立即放入細胞保存液中，充分保留了標本，從而避免常規(guī)涂片所致的細胞過度干燥[11]。此外，TCT技術還可避免涂片背景中大量白細胞、紅細胞等干擾因素，大大提高診斷率[12]。研究顯示，TCT檢測假陰性率僅為0.26%。TCT采用特制頸管刷收集脫落的細胞，幾乎保存了所有標本[13]。經(jīng)程序化處理后制成細胞涂片，固定染色后顯微鏡下閱片診斷。該法易于觀察不正常細胞，且細胞核結(jié)構清晰，易于鑒定，大大降低了假陰性率，提高了靈敏度和特異性[14]。TCT檢測可有效判斷疾病是否進入臨床期。將二者聯(lián)合應用既可預防又可指導治療，對宮頸癌的防治具有及其重要的作用[15]。

本研究結(jié)果顯示，共138例患者顯示TCT陽性合并HPV感染，其中42例HPV高危型，陽性率為30%。不同類型標本HPV高危型感染率具有顯著性差異，LSIL顯示HPV高危12例(30%)，HSIL顯示HPV高危4例(40%)，ASCUS顯示HPV高危18例(23%)，SCC顯示HPV高危8例(100%)。TCT和HPV均為(-)時，則未發(fā)生高度病變。HPV陽性和TCT異常同時存在時，≥CINⅠ的檢出率為53.3%，僅TCT異常而HPV(-)時，檢出率為47.8%。由此可見，高危型HPV基因分型檢測結(jié)合液基細胞學檢查是極具價值的宮頸癌早期篩查方法，聯(lián)合檢測比單項檢查更可靠。

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