王 多 劉 全

(一汽總醫(yī)院，吉林 長春 130011)

近年來隨著溶栓療法、動(dòng)脈搭橋術(shù)、經(jīng)皮腔內(nèi)冠脈血管成形術(shù)、心臟移植術(shù)等方法的建立和推廣，心肌的缺血再灌注損傷十分常見，并且是一個(gè)十分棘手的問題。因此，采取一系列方法是減輕缺血再灌注損傷的一個(gè)關(guān)鍵〔1〕。穩(wěn)心顆粒是一種中成藥，主要成分有黨參、黃精、三七、甘松，臨床主要用于治療心律失常。有文獻(xiàn)報(bào)道穩(wěn)心顆粒對(duì)于預(yù)防治療缺血再灌注性心律失常也十分有效〔2〕，本研究旨在探討在心肌缺血再灌注損傷時(shí)穩(wěn)心顆粒對(duì)心肌細(xì)胞的影響及其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和造模 健康的體重約為220～280 g雌雄各半的SD大鼠160只(符合國家動(dòng)物協(xié)會(huì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn))，隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、穩(wěn)心顆粒大劑量組和穩(wěn)心顆粒小劑量組。在缺血再灌注模型建立前4天，假手術(shù)組和缺血再灌注組每只每日給予生理鹽水(1.0 ml/100 g)灌胃，穩(wěn)心顆粒大劑量組和穩(wěn)心顆粒小劑量組分別每日給予生理鹽水稀釋的穩(wěn)心顆粒18 g/kg，9 g/kg灌胃。以上四組大鼠在實(shí)驗(yàn)前1 h再進(jìn)行1次灌胃。缺血再灌注組和兩組給藥組將大鼠用乙醚吸入麻醉后固定在手術(shù)臺(tái)上，沿正中線剪開其胸前的皮膚，在大鼠左前胸第4、5肋間用止血鉗撥開，暴露心臟，在左冠狀動(dòng)脈近端下穿3-0號(hào)縫線結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈(縫線打活結(jié))，隨后關(guān)胸，1 h后松開縫線再灌注6 h，之后用5%戊巴比妥鈉(1 ml/100 mg)腹腔麻醉后打開胸廓，將心臟全部取出，在結(jié)扎線下取心肌組織，置于4%戊二醛溶液中固定，按常規(guī)方法制作電鏡標(biāo)本。假手術(shù)組手術(shù)方法同上，但不結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈。

1.2心肌梗死范圍測(cè)定 假手術(shù)組、缺血再灌注組、穩(wěn)心顆粒大小劑量組分別于再灌注6 h后麻醉摘取心臟，剪除心房和右心室，沿房室環(huán)從心尖至心底切成約4 mm厚的組織塊，置1%氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)磷酸鹽緩沖液中染色20 s(37℃)，稱取左室重量，再沿梗死邊緣切除梗死部分心肌并稱重，以梗死心肌(MIW)與全左心室心肌重量(LVW)的百分比表示心肌梗死范圍。

1.3電鏡制作 缺血再灌注組、穩(wěn)心顆粒大小劑量組每組各取1只，迅速去心臟，在結(jié)扎線下?lián)p傷的心肌組織處取5 mm×5 mm×2 mm組織各一塊，置于4%戊二醛溶液中固定，送電鏡室經(jīng)脫水、包埋、切片、載網(wǎng)、染色后進(jìn)行電鏡(JEM-1200EX/S型透射電鏡，日本光學(xué)電子公司生產(chǎn))觀察，攝片。

2 結(jié) 果

2.1各組心肌梗死范圍的改變 心肌梗死范圍：與缺血再灌注組(0.214 8±0.034 0)比較，兩給藥組(小劑量組：0.154 3±0.033 5，大劑量組：0.148 1±0.258 7)顯著減小(P<0.05)；兩給藥組之間差異無顯著性(P>0.05)。

2.2電鏡結(jié)果 缺血再灌注組可見肌絲排列疏松，部分肌絲溶解、斷裂，線粒體排列不規(guī)則、紊亂，一部分線粒體輕度腫脹，線粒體內(nèi)部分脊斷裂，一部分線粒體固縮變小、顏色加深。局部心肌細(xì)胞基膜破損，閏盤解離，心肌細(xì)胞輕度空化。兩給藥組可見肌絲排列規(guī)整但仍有斷裂，線粒體排列規(guī)則，個(gè)別線粒體局部空化，心肌細(xì)胞基膜較完整，局部閏盤輕度解離，心肌細(xì)胞未見空化。見圖1。

模型組 小劑量組 大劑量組

3 討 論

穩(wěn)心顆粒是一種中成藥制劑，不良反應(yīng)少，廣泛應(yīng)用于臨床?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，黨參具有增強(qiáng)心肌收縮力，增加心排血量的作用，黃精能增加冠狀動(dòng)脈血流量，降低血脂、血糖，并有防止動(dòng)脈粥樣硬化的作用，三七能活血，還有抗心律失常的作用，降低心肌耗氧量，改善心肌缺血狀態(tài)，對(duì)中樞神經(jīng)有鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛作用，甘松中纈草酮有抗心律失常作用。穩(wěn)心顆粒能減輕心肌細(xì)胞損傷。其作用機(jī)制可能是減少氧自由基的產(chǎn)生，增強(qiáng)機(jī)體清除自由基和抵抗自由基損傷的能力，防止鈣超載，保持內(nèi)皮細(xì)胞的完整性，促進(jìn)一氧化氮(NO)的分泌，抑制中性粒細(xì)胞的浸潤，減輕無復(fù)流現(xiàn)象。并且當(dāng)穩(wěn)心顆粒達(dá)到一定的劑量后，其保護(hù)效應(yīng)將不再增強(qiáng)。具體機(jī)制有待于進(jìn)一步探討。

4 參考文獻(xiàn)

1麻興利, 徐啟明, 劉鐘淑. 中藥提取成分對(duì)腦缺血再灌注損傷的防治作用〔J〕. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志, 1993;13(11):699.

2梁 巖, 陳 聰, 徐國帆, 等. 穩(wěn)心顆粒對(duì)急性心肌梗死直接經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)中再灌注心律失常的影響〔J〕. 臨床心血管病雜志,2005;21(10):601-2.