樊秀婷

(復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院眼科，上海 201700)

腫瘤發(fā)生與基因或蛋白異常表達(dá)有關(guān)。弗林蛋白酶(Furin)是最早發(fā)現(xiàn)的哺乳動(dòng)物前體蛋白加工酶，其底物非常廣泛，包括多種凝血因子、激素、生長(zhǎng)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等〔1，2〕。研究認(rèn)為Furin異常表達(dá)對(duì)腫瘤發(fā)生和進(jìn)展有一定關(guān)系〔3,4〕。轉(zhuǎn)移抑制基因(nm)23是抑制腫瘤發(fā)展的基因，研究顯示nm23低表達(dá)時(shí)，不僅使微管聚合異常引起減數(shù)分裂時(shí)紡錘體異常，還可以使細(xì)胞骨架改變引起細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，對(duì)腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移均起明顯作用〔5〕。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是促進(jìn)腫瘤血管生成的重要因子，其高表達(dá)可以引起血管內(nèi)皮增殖，加速腫瘤生長(zhǎng)〔6〕。本研究檢測(cè)老年眼瞼基底細(xì)胞癌中Furin、nm23和VEGF蛋白表達(dá)及其相關(guān)性與臨床意義。

1 材料和方法

1.1臨床資料 收集我院近3年行眼瞼基底細(xì)胞根治術(shù)的老年患者共79例，常規(guī)留取組織蠟塊，病例均經(jīng)病理醫(yī)師再次閱片確診，并嚴(yán)格符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。男40例，女39例，年齡60～82歲，平均68.7歲。選擇同期在我院行基底細(xì)胞乳頭狀瘤切除后的蠟塊56例作為對(duì)照組，其中男30例，女26例，年齡60～81歲，平均68.1歲。收集腫物切緣經(jīng)病理證實(shí)為正常皮膚組織的56例作為正常對(duì)照組，其中男28例，女28例，年齡61～80歲，平均68.0歲。3組一般資料無(wú)明顯差別(P均>0.05)。

1.2Furin、nm23和VEGF蛋白的檢測(cè) Furin、nm23和VEGF蛋白的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化二步法。三種抗體均購(gòu)自武漢博士德生物工程公司，應(yīng)用DAB染色。操作均按說(shuō)明書進(jìn)行，嚴(yán)格質(zhì)控，減少誤差。

1.3Furin、nm23和VEGF結(jié)果的判斷方法 Furin、nm23和VEGF均以細(xì)胞質(zhì)中觀察到棕黃色為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，計(jì)數(shù)6個(gè)400倍視野，以陽(yáng)性細(xì)胞≥25%定為陽(yáng)性，以陽(yáng)性細(xì)胞<25%定為陰性。計(jì)算陽(yáng)性率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1Furin、nm23和VEGF蛋白在3組中表達(dá)陽(yáng)性率的比較 正常對(duì)照組、對(duì)照組、觀察組中Furin和VEGF的表達(dá)依次升高，而nm23的表達(dá)依次降低(P均<0.000 1)。見(jiàn)表1。

2.2觀察組不同臨床特征患者Furin、nm23和VEGF蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較 觀察組中Furin、nm23和VEGF的表達(dá)與腫瘤的最大徑、脈管浸潤(rùn)和TNM分期密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

2.3觀察組中Furin、nm23和VEGF表達(dá)的相關(guān)性分析 Furin和VEGF的表達(dá)正相關(guān)(r=0.44，P=0.043 0)。Furin和nm23的表達(dá)負(fù)相關(guān)(r=-0.49，P=0.034 8)。

表1 Furin、nm23和VEGF蛋白在3組中表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征患者Furin、nm23和VEGF蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

3 討 論

基底細(xì)胞癌多見(jiàn)于老年人，好發(fā)于面部較突出的部位，開始時(shí)為一個(gè)棕黃色或暗褐色浸潤(rùn)性小結(jié)節(jié)，較典型者為蠟樣、半透明狀結(jié)節(jié)、有高起卷曲的邊緣。組織學(xué)見(jiàn)表皮內(nèi)基底細(xì)胞呈巢狀，邊緣呈柵欄狀排列，可有角質(zhì)囊腫，浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，病變進(jìn)展快時(shí)，呈大片狀侵襲性壞死，可以深達(dá)軟組織和骨組織。在病變發(fā)生和進(jìn)展時(shí)，多種蛋白異常表達(dá)可以調(diào)節(jié)腫瘤的發(fā)展進(jìn)程。Furin可在多種組織中表達(dá)，主要定位于反式高爾基體，在細(xì)胞膜中也可有少量分布，并在這些部位參與多種底物分子的加工活化〔7～9〕。nm23是抑癌基因和蛋白，通過(guò)其產(chǎn)物核苷二磷酸激酶影響細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)，同時(shí)影響微管、微絲等細(xì)胞骨架系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)，nm23也參與細(xì)胞周期的有效調(diào)控，有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和播散〔10〕。黃秀英等〔11〕通過(guò)對(duì)93例乳腺癌的標(biāo)本檢測(cè)nm23的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)nm23低表達(dá)，認(rèn)為nm23低表達(dá)時(shí)參與了乳腺癌的惡性轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移擴(kuò)散過(guò)程。王良君等〔12〕通過(guò)在眼瞼基底細(xì)胞癌中觀察nm23的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)nm23在腫瘤中均陰性表達(dá)，認(rèn)為nm23是較好的腫瘤的抑制基因。VEGF不僅可以促進(jìn)腫瘤間質(zhì)的血管新生，還可以判斷腫瘤的預(yù)后。研究顯示VEGF對(duì)血管生成的促進(jìn)作用表現(xiàn)為多種方面〔13〕，主要是促進(jìn)基質(zhì)中CD34、CD31、CD105陽(yáng)性血管的生成，此時(shí)腫瘤的營(yíng)養(yǎng)豐富，供氧增加，腫瘤的生成速度加快，代謝增強(qiáng)，侵襲性增加〔14〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示Furin、nm23、VEGF異常表達(dá)對(duì)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展有重要的促進(jìn)作用。Furin的作用可能具有多元性，不僅能夠與腺瘤性息肉病基因(APC)、軸蛋白(AXIN1)和金屬整合素蛋白(ADAM)等互相作用〔15〕，還可能與細(xì)胞質(zhì)中的β-catenin結(jié)合而起作用，進(jìn)而對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)行干預(yù)〔16〕。有觀點(diǎn)認(rèn)為Furin還可能在細(xì)胞分化的核轉(zhuǎn)錄調(diào)控通路中發(fā)揮作用〔17〕。本文提示Furin、nm23和VEGF異常表達(dá)可以加速腫瘤的生長(zhǎng)和對(duì)周圍組織的侵犯，同時(shí)能加速腫瘤的進(jìn)展，由于以上因素均與判斷基底細(xì)胞癌的預(yù)后相關(guān)，因此聯(lián)合檢測(cè)Furin、nm23和VEGF異常表達(dá)可能是判斷腫瘤預(yù)后的相關(guān)指標(biāo)。Furin可能是促進(jìn)腫瘤血管生成的重要指標(biāo)，此時(shí)Furin可能通過(guò)促進(jìn)VEGF表達(dá)發(fā)揮其生物學(xué)功能，二者具有協(xié)同作用，也提示Furin在促進(jìn)腫瘤進(jìn)展過(guò)程中可能與抑制nm23有關(guān)。

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