金 碩，戴 珉，張 軍，楊 滟，沈 薇，應春妹，范竹萍

(1.上海交通大學醫(yī)學院附屬仁濟醫(yī)院檢驗科，上海 200127;2.上海交通大學醫(yī)學院附屬仁濟醫(yī)院體檢中心，上海 200127;3.上海安圖醫(yī)院檢驗科，上海 200093)

隨著全自動血液細胞分析技術的發(fā)展，網(wǎng)織紅細胞(reticulocyte，RET)檢測技術已經(jīng)不僅能夠提供百分比和絕對值，也能同步快速給出RET其他相關參數(shù)，比如RET血紅蛋白 (reticulocyte hemoglobin equivalent，RET-He)、低熒光網(wǎng)織紅細胞(lowfluorescent reticulocyte，LFR)、中熒光網(wǎng)織紅細胞(middle fluorescent reticulocyte，MFR)、高熒光網(wǎng)織紅細胞(high fluorescent reticulocyte，HFR)等。目前儀器法檢測RET各類參數(shù)參考區(qū)間的報道不多，臨床上難以有效利用這些新的有價值的檢測參數(shù)。我們利用XE-2100血液分析儀對上海地區(qū)2000名正常體檢者外周血的RET進行檢測，建立本地區(qū)RET相關參數(shù)的正常參考區(qū)間，以期讓這些參數(shù)在臨床診斷、治療中發(fā)揮其應有的價值。

材料和方法

一、對象

選取2012年7月至2012年12月上海市仁濟醫(yī)院體檢者2000名，其中男1116名，女884名，年齡(47±11)歲。納入標準為(1)體格檢查:內科、外科、心電圖、X線胸部透視、B超檢查無明顯異常;(2)檢驗指標:無明顯感染癥狀和貧血表現(xiàn)，白細胞(WBC)＜10×109/L，C反應蛋白(CRP)＜10 mg/L，男性血紅蛋白(Hb)＞120 g/L，女性Hb＞110 g/L;(3)排除項:空腹血糖 ＞6.1 mmol/L或糖化血紅蛋白異常者，甘油三酯＞3.0 mmol/L，膽固醇 ＞8.0 mmol/L，天門冬氨酸氨基轉移酶 ＞75 U/L，肌酐 ＞120 U/L，尿素 ＞12 U/L，女性尿液紅細胞上限＞10個/Hp。

二、方法

1.標本采集與測定 采集乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝全血2 mL，于采集后2 h內完成檢測。

2.儀器及試劑 日本希森美康公司XE-2100全自動血液分析儀和配套試劑，儀器在檢測標本前進行了校準和性能驗證。

三、統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)采用SPSS11.0軟件進行統(tǒng)計分析，男、女組間和各年齡組間比較采用非參數(shù)秩和檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結 果

一、RET各參數(shù)正態(tài)分布性檢驗

數(shù)據(jù)統(tǒng)計結果顯示，RET絕對值(RET#)和百分比(RET%)呈偏態(tài)分布，即使男女分開，亦呈偏態(tài)分布，RET分群參數(shù)LFR、MFR和HFR也呈偏態(tài)分布。見表1。

二、人群年齡組分布情況

由于數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，因此各參數(shù)均值采用中位數(shù)表示，年齡組間比較采用非參數(shù)秩和檢驗、Kruskal-Wallis H檢驗。見表2。

表2 各年齡組RET參數(shù)結果

三、性別情況分析

由于數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，男、女組間比較亦采用非參數(shù)秩和檢驗、Mann-Whitney U檢驗。具體結果見表3。

表3 RET參數(shù)性別比較及參考區(qū)間

討 論

RET#或RET%是獨立監(jiān)測骨髓造血恢復的參數(shù)，骨髓移植后RET比WBC提前增高3～4 d。IRF、HFR、MFR、LFR、RET-He是反映造血功能的新參數(shù)，HFR、MFR、LFR的變化比RET#或RET%的變化更靈敏，可作為慢性溶血性貧血、化療所致骨髓抑制性貧血、血透貧血的鑒別依據(jù)[2]。近年來RET檢測越來越被臨床科室所重視，但其各相關參數(shù)的參考區(qū)間臨床卻不甚了解。本研究采用儀器法調查了上海地區(qū)正常人群RET參數(shù)，雖然所用儀器型號與李小龍等[3]的報道一致，但所得結果仍有不小的差異。

李小龍等[3]的調查顯示女性RET%均值為0.869%，標準差為 0.603%，參考區(qū)間為(0 ～2.051)%。但眾所周知，“0”意味著再障可能，因此其調查數(shù)據(jù)和統(tǒng)計學方法值得商榷。本研究收集的882例女性數(shù)據(jù)中，無1例為0，數(shù)據(jù)為正偏態(tài)分布，正常參考區(qū)間為0.60% ～1.81%，男性為0.61% ～1.87%，與《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第 3 版)[4]數(shù)據(jù)較為接近。

本研究顯示RET所有參數(shù)均為偏態(tài)分布，離散度較大，說明RET的產(chǎn)生易受各類因素的影響，如飲食、運動、應激狀態(tài)等。在分群參數(shù)中，尤其是HFR圖形離正態(tài)分布較遠，甚至看不出趨勢，究其原因可能與標本量不夠多相關。此外，HFR本質為較幼稚的RET，其數(shù)量較少。當人體處于出血等應激狀態(tài)時才會大量出現(xiàn)，是反應造血功能最為敏感的指標[5]。而對于正常人群，很難從相關體檢指標中區(qū)分出最近是否有體育鍛煉、是否服用補品、女性是否剛過生理期等影響因素，數(shù)據(jù)統(tǒng)計中可能包含了“有影響”與“沒有影響”的2種人群，因此造成RET分群參數(shù)數(shù)據(jù)離散度較大，趨勢不明顯。

RET各參數(shù)顯示性別間差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。無論是RET#還是RET%，男性均略高于女性。表示紅細胞新陳代謝速度的LRF、HFR、MFR、LFR參數(shù)顯示，男性HFR高于女性，LFR低于女性，說明男性紅細胞更新速度快于女性，與男性紅細胞高于女性情況一致。

本研究還統(tǒng)計比較了各個年齡組間RET參數(shù)。RET%和RET#各年齡組之間無明顯差異(P值分別為0.061和0.138)。分群參數(shù) HFR、MFR、LFR在各組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。表2結果顯示，隨著年齡的增長，RET%增高而RET#維持在一個相對平均的水平。LFR逐漸下降，MFR、HFR逐漸上升，說明年齡增長并未對RET#產(chǎn)生明顯影響，其原因可能為隨著年齡的增長，紅細胞數(shù)量逐漸下降，從而引起RET%上升。不同生理、病理情況下，RET從骨髓釋放入外周血所需時間不同，故RET計數(shù)不能確切反映骨髓紅細胞造血功能，還應考慮RET生存期限[6]。

目前，《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)[4]尚未提供RET儀器法參數(shù)的參考區(qū)間。本研究建立的參考區(qū)間與其他文獻報道也有不一致的地方，提示各實驗室、各地區(qū)都有必要建立本地區(qū)的參考區(qū)間。

[1]熊立凡，羅春麗.臨床檢驗基礎[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:71-72.

[2]Miwa N，Akiba T，Kimata N，et al.Usefulness of measuring reticulocyte hemoglobin equivalent in the management of haemodialysis patients with iron deficiency[J].Int J Lab Hematol，2010，32(2):248-255.

[3]李小龍，陶洪群，王薇薇，等.溫州地區(qū)健康成人外周血網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白及網(wǎng)織紅分群值正常值范圍調查[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2011，34(2):147-151.

[4]葉應嫵，王毓三，申子瑜，等.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社，2006:130-133.

[5]Urrechaga E，Borque L，Escanero JF.Analysis of reticulocyte parameters on the Sysmex XE 5000 and LH 750 analyzers in the diagnosis of inefficient erythropoiesis[J].Int J Lab Hematol，2011，33(1):37-44.

[6]全國衛(wèi)生專業(yè)技術資格考試專家委員會.2013全國衛(wèi)生專業(yè)技術資格考試指導臨床醫(yī)學檢驗技術(師)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2012:19-21.