蕭晉川，陳苗苗，郭 尚

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西太原030031）

靈芝（Ganoderma lucidum）又稱(chēng)靈芝草，有“仙草”之美譽(yù)，具有抗病毒、抗氧化、抗腫瘤、止痛、鎮(zhèn)靜、解毒、保肝等多種生理活性和藥理作用[1-5]。近年來(lái)，靈芝開(kāi)發(fā)利用越來(lái)越受到人們重視，消費(fèi)量迅速增長(zhǎng)，人工栽培規(guī)模越來(lái)越大。

為了提高靈芝產(chǎn)量、改善質(zhì)量，現(xiàn)已開(kāi)展了大量研究，主要集中在栽培基質(zhì)的篩選[6-8]、栽培方式的選擇[9-10]、栽培設(shè)施的篩選及栽培條件的優(yōu)化上。但是由于靈芝屬于高溫好氧真菌，無(wú)論條件如何優(yōu)化，都無(wú)法解決低溫季節(jié)栽培靈芝需要升溫、通風(fēng)必然會(huì)降溫之間的矛盾，目前，北方地區(qū)靈芝出菇只能選擇在4—5月或8—9月，之前雖有靈芝反季節(jié)栽培的研究，但是技術(shù)成本高、產(chǎn)量卻很低。隨著靈芝及其加工產(chǎn)品需求量的增加以及靈芝的短缺問(wèn)題日益嚴(yán)重，用低溫季節(jié)栽培靈芝來(lái)填補(bǔ)市場(chǎng)的空缺已成為目前靈芝栽培中亟待解決的問(wèn)題。

本試驗(yàn)著眼于在不增加成本的前提下，重點(diǎn)依靠自然升溫、保溫裝置，實(shí)現(xiàn)靈芝低溫季節(jié)的栽培。通過(guò)低溫抗逆菌株的篩選、栽培基質(zhì)的選擇、日光溫室的應(yīng)用，并首次采用靈芝畦內(nèi)鋪設(shè)地?zé)峋€(xiàn)搭建小拱棚設(shè)計(jì)，以實(shí)現(xiàn)靈芝在低溫季節(jié)的正常出菇，為靈芝的周年生產(chǎn)奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

出菇地點(diǎn)為山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院東陽(yáng)試驗(yàn)基地日光溫室。菌棒入棚及出菇的時(shí)間為每年的10—12月。

1.2 試驗(yàn)材料

1.2.1 供試菌株 赤芝（中國(guó)科學(xué)院微生物研究所）；紫芝（中國(guó)科學(xué)院微生物研究所）；鹿角靈芝（山東聊城伯陽(yáng)食用菌研究所）。

1.2.2 培養(yǎng)基配制 （1）母種培養(yǎng)基（1 L）：馬鈴薯200 g，葡萄糖 20 g，KH2PO42 g，MgSO40.5 g，瓊脂15～20 g。（2）原種培養(yǎng)基：棉籽殼88%，麩皮10%，石膏1%，蔗糖1%。（3）栽培種培養(yǎng)基：配方1.棉籽殼88%，麩皮10%，石膏1%，蔗糖1%。配方2.棉籽殼78%，麩皮20%，石膏1%，蔗糖1%。配方3.棉籽殼35%，木屑33%，麩皮30%，石膏1%，蔗糖1%。

1.2.3 主要試驗(yàn)設(shè)施 1 000 W地?zé)峋€(xiàn)、溫度控制器、遮陽(yáng)網(wǎng)、地溫計(jì)、溫濕度計(jì)、溫室大棚塑料膜。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 低溫抗逆菌株的篩選 3種供試菌株在PDA培養(yǎng)基活化后，取直徑0.5 cm的接種塊接種于PDA培養(yǎng)基中央，每個(gè)菌株設(shè)5次重復(fù)，于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，設(shè)定溫度15℃，CO2濃度0.1%。從菌絲萌發(fā)日起到某一個(gè)菌落長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)皿為止，每隔3 d統(tǒng)計(jì)各菌落直徑，計(jì)算各菌株日平均生長(zhǎng)速度，確定抗低溫、抗CO2濃度的最佳靈芝菌株。

1.3.2 栽培料的選擇 將3種栽培種配方菌袋滅菌后，對(duì)低溫抗逆菌株的原種進(jìn)行接種，25℃恒溫發(fā)菌培養(yǎng)，2～3周后分別測(cè)量菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度，計(jì)算各配方菌絲日平均生長(zhǎng)速度，并記錄滿(mǎn)袋天數(shù)及菌絲生長(zhǎng)勢(shì)。待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后，日光溫室內(nèi)南北方向作畦，畦大小為7.0 m×0.3 m×0.8 m，每畦為一個(gè)試驗(yàn)小區(qū)，設(shè)置3個(gè)畦，每畦種同一栽培料配方的靈芝菌棒100個(gè)，菌棒脫袋后均勻排列在畦內(nèi)，覆土至菌包肩部。每畦內(nèi)埋有地?zé)峋€(xiàn)，地?zé)峋€(xiàn)溫度、深度按篩選出的最佳地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)組合，并搭建小拱棚。各配方同一環(huán)境條件下出菇，統(tǒng)計(jì)第1茬菇原基分化時(shí)間、總產(chǎn)量及袋平均產(chǎn)量，記錄出菇質(zhì)量。

1.3.3 地?zé)峋€(xiàn)設(shè)置溫度、深度組合的篩選 日光溫室內(nèi)南北方向作畦，大小為7.0 m×0.3 m×0.8 m，畦間留0.5 m人行道便于操作。每畦為一個(gè)試驗(yàn)小區(qū)，栽種靈芝菌棒（配方1）100個(gè)，菌棒脫袋后均勻排列在畦內(nèi)，每畦搭建小拱棚保溫。地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)設(shè)置3個(gè)深度：菌棒頂部（距覆土上表面2～3 cm）、菌棒中部（距覆土上表面13～15 cm）、菌棒底部（距覆土上表面 28～30 cm）；設(shè)置 3 個(gè)溫度：24，27，30 ℃。溫度與深度搭配組成9個(gè)組合：A（24℃/頂部）、B（24℃/中部）、C（24℃/底部）、D（27℃/頂部）、E（27℃/中部）、F（27℃/底部）、G（30℃/頂部）、H（30℃/中部）、I（30℃/底部），每個(gè)組合設(shè) 3次重復(fù)。畦面安排及地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)如圖1所示。

出菇管理：日光溫室加蓋草簾，溫室內(nèi)加一層遮陽(yáng)網(wǎng)，光照強(qiáng)度約為5 000 lx，保持棚內(nèi)空氣濕度85%～90%，每天通風(fēng) 2次，11：30—12：30一次，15：00—16：00 一次，每次通風(fēng) 40～60 min。對(duì)溫室內(nèi)溫度、小拱棚內(nèi)溫度及地溫每天3次（9：30，11：30，16：30）進(jìn)行測(cè)量并記錄。待第1茬菇出菇后記錄9種地?zé)峋€(xiàn)組合方式的出菇產(chǎn)量及其質(zhì)量。

1.3.4 出菇溫度控制方法的篩選 以?xún)?yōu)選出的配方栽培靈芝，日光溫室溫度控制方式設(shè)4個(gè)處理：CK.無(wú)地?zé)峋€(xiàn)、小拱棚靈芝畦；P1.無(wú)地?zé)峋€(xiàn)有小拱棚靈芝畦；P2.有地?zé)峋€(xiàn)有小拱棚靈芝畦；P3.有地?zé)峋€(xiàn)且小拱棚上加蓋棉被靈芝畦。每畦（試驗(yàn)小區(qū)）覆土栽培（配方1）靈芝菌棒100個(gè)，每個(gè)處理設(shè)置2個(gè)重復(fù)（地?zé)峋€(xiàn)溫度、深度按最佳地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)組合）。每天日光溫度超過(guò)24℃時(shí)揭棉被降溫、通氧，溫度降至22℃時(shí)，覆棉被保溫。出菇管理同1.3.3。記錄4種溫度控制方式下第1茬菇出菇情況。

1.3.5 出菇光照強(qiáng)度的篩選 溫室內(nèi)設(shè)3個(gè)區(qū)間，區(qū)間之間用雙層塑料薄膜隔開(kāi)，每個(gè)區(qū)間栽培2畦配方1的靈芝菌棒，畦內(nèi)設(shè)地?zé)峋€(xiàn)和小拱棚（地?zé)峋€(xiàn)溫度、深度按最佳地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)組合）。試驗(yàn)處理：P4.單層遮陽(yáng)網(wǎng)，儀器測(cè)得白天平均光照強(qiáng)度為5 000 lx；P5.雙層遮陽(yáng)網(wǎng)，儀器測(cè)得白天平均光照強(qiáng)度為1 000 lx；P6.3層遮陽(yáng)網(wǎng)，儀器測(cè)得白天平均光照強(qiáng)度為200 lx。出菇管理方式同1.3.3。記錄3種光照強(qiáng)度下第1茬菇出菇情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 低溫抗逆菌株的確定

3個(gè)菌株中鹿角靈芝菌絲萌發(fā)最早，紫芝萌發(fā)最晚；培養(yǎng)第15天，鹿角靈芝的菌絲體最先長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)皿，菌落直徑達(dá)8.1 cm。3個(gè)菌株的菌落直徑增長(zhǎng)變化情況如圖2所示。在溫度15℃，CO2濃度0.1%條件下靈芝菌絲體的生長(zhǎng)速度大小為：鹿角靈芝＞赤芝＞紫芝。因此，選擇鹿角靈芝為低溫抗逆菌株進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

2.2 最佳栽培料配方的確定

2.2.1 不同栽培料配方菌絲生長(zhǎng)情況 由表1可知，鹿角靈芝在配方2栽培料上生長(zhǎng)最快，滿(mǎn)袋早、長(zhǎng)勢(shì)好；配方3栽培料上菌絲生長(zhǎng)較快，但菌絲較稀疏，長(zhǎng)勢(shì)差，可能是由于配料中添加了木屑，透氣性增強(qiáng)，養(yǎng)分供應(yīng)較慢所致。

表1 不同栽培料配方菌絲生長(zhǎng)情況

2.2.2 不同栽培料配方子實(shí)體生長(zhǎng)情況 由表2可知，配方2原基分化時(shí)間最早，單產(chǎn)最高；配方1次之，但這2種配方靈芝質(zhì)地較配方3疏松，這與傳統(tǒng)栽培獲得的結(jié)論（木屑栽培，產(chǎn)量低、出菇慢、菌蓋小，但組織致密、易造型；棉籽殼栽培，產(chǎn)量高、出菇快、菌蓋大，但質(zhì)地疏松）一致；配方2獲得靈芝雖質(zhì)地疏松，但不影響商品性能，從原基分化時(shí)間和產(chǎn)量上可以判斷，配方2最適合鹿角靈芝栽培。綜合菌絲生長(zhǎng)情況及子實(shí)體生長(zhǎng)情況得出，配方2為鹿角靈芝最佳栽培料配方。

表2 不同栽培料配方子實(shí)體生長(zhǎng)情況

2.3 地?zé)峋€(xiàn)設(shè)置溫度、鋪設(shè)深度組合的確定

從表3可以看出，日光溫室內(nèi)搭建小拱棚并鋪設(shè)地?zé)峋€(xiàn)，可明顯提升小拱棚內(nèi)的溫度及地溫，并且溫度相對(duì)穩(wěn)定，達(dá)到了靈芝生長(zhǎng)的條件。

表3 9個(gè)地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)組合3個(gè)時(shí)間地溫及拱棚溫度統(tǒng)計(jì)表 ℃

由表4可知，同一大棚溫度條件下，當(dāng)?shù)責(zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)在菌棒中部（距覆土上表面13～15 cm）時(shí)，出菇整齊度較好，產(chǎn)量較高；地?zé)峋€(xiàn)設(shè)在菌棒上部和底部時(shí)可能由于菌棒各部分受熱不均勻，造成生長(zhǎng)緩慢，出菇不整齊。3個(gè)溫度設(shè)置中，雖然溫度為30℃時(shí)，拱棚溫度及地溫較接近靈芝的最適生長(zhǎng)溫度，但是可能由于局部溫度過(guò)高造成菌絲燒傷，導(dǎo)致出菇?jīng)]有27℃時(shí)整齊度好，并且由于溫度過(guò)高，造成靈芝質(zhì)地疏松，產(chǎn)量不高。由出菇數(shù)據(jù)可知，在溫度為27℃，深度在菌棒中部時(shí)靈芝產(chǎn)量最高，出菇整齊，菇質(zhì)致密，因此，E組合（27℃/中部）為地?zé)峋€(xiàn)最佳鋪設(shè)組合。

表4 9個(gè)地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)組合出菇情況統(tǒng)計(jì)

2.4 出菇溫度控制方法的確定

各試驗(yàn)小區(qū)一天 3 個(gè)時(shí)段（9：30，11：30，16：30）氣溫與地溫進(jìn)行統(tǒng)計(jì)如表5所示。地?zé)峋€(xiàn)＋小拱棚＋覆棉被的方法，可提供最佳靈芝生長(zhǎng)溫度。

表5 4小畦3時(shí)段溫度統(tǒng)計(jì)記錄 ℃

由表6可知，有地?zé)峋€(xiàn)且小拱棚上加蓋棉被靈芝畦（P3）出菇情況最好；有地?zé)峋€(xiàn)有小拱棚的靈芝畦（P1）次之，并且2種情況一天內(nèi)拱棚溫及地溫溫度變化不大（表5），適合靈芝栽培；無(wú)地?zé)峋€(xiàn)、小拱棚的靈芝畦（CK）原基分化時(shí)間長(zhǎng)，靈芝幾乎不生長(zhǎng)。因此，冬季日光溫室出菇最好選擇地?zé)峋€(xiàn)加小拱棚加蓋棉被組合，如要節(jié)約支出，可省去棉被。

表6 4小畦3時(shí)段出菇情況統(tǒng)計(jì)

2.5 出菇光照強(qiáng)度的確定

從表7可以看出，光照強(qiáng)度為5 000 lx時(shí)（P4），靈芝出菇早，產(chǎn)量高，表型好，優(yōu)于其他2個(gè)光照強(qiáng)度P5，P6。因此，光照強(qiáng)度5 000 lx為最佳光照強(qiáng)度。

表7 3種光照強(qiáng)度下的出菇情況

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明，日光溫室栽培靈芝可有效地吸收陽(yáng)光熱量并能有效保溫；鹿角靈芝抗低溫、抗高CO2濃度，適合冬季日光溫室栽培；篩選獲得的栽培料配方（棉籽殼78%、麩皮20%、石膏1%、蔗糖1%）菌絲萌發(fā)時(shí)間和發(fā)菌時(shí)間較短，產(chǎn)量和生物學(xué)效率較高；地栽靈芝，并搭配地?zé)峋€(xiàn)及小拱棚（小拱棚上加蓋棉被），地?zé)峋€(xiàn)鋪設(shè)深度距覆土上表面13～15 cm，設(shè)置溫度為27℃，可有效提高及保持地溫和靈芝生長(zhǎng)小壞境的氣溫，保證靈芝正常生長(zhǎng)，菇體致密、產(chǎn)量高、整齊度好；光照強(qiáng)度為5 000 lx條件下，靈芝產(chǎn)量最高。

本試驗(yàn)結(jié)果可為低溫季節(jié)栽培靈芝提供借鑒，為靈芝周年生產(chǎn)提供參考。該技術(shù)一旦推廣，不但可解決靈芝大棚冬季閑置問(wèn)題，而且低溫季節(jié)靈芝市場(chǎng)短缺問(wèn)題也可迎刃而解。但是本試驗(yàn)獲得的靈芝產(chǎn)量比正常栽培條件下低，可能是由溫度較低造成的。在后續(xù)試驗(yàn)中可以通過(guò)設(shè)置雙層地?zé)峋€(xiàn)（深度分別在菌棒的中上部和中下部），使整個(gè)菌棒均勻受熱，并輕微調(diào)整地?zé)峋€(xiàn)溫度來(lái)提高地溫及小拱棚內(nèi)氣溫，使靈芝產(chǎn)量提高。

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