段艷紅 杜春玲 肖建 周鋒 徐棟輝 吳超民 周磊

(復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院呼吸內(nèi)科，上海 201700)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)在我國的發(fā)病率不斷升高，成為老年人群致死、致殘的重要原因[1]。肺表面活性物質(zhì)由肺泡II型上皮細(xì)胞分泌，具有保證肺部的通氣和換氣功能、提高肺部的防御機制等功能[2]。肺表面活性蛋白-D(surfactant protein-D，SP-D)是肺表面活性蛋白(surfactant protein，SP)之一，具有抗感染、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等功能[3]。近年來，有研究[4]表明，血清SP-D水平的檢測有助于診斷慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of COPD, AECOPD) 。然而，關(guān)于痰液中SP-D濃度與血清中SP-D濃度的關(guān)系以及COPD患者病情變化時二者的變化，目前尚無相關(guān)報告。本研究采用AECOPD及穩(wěn)定期COPD患者血清和痰液中的SP-D水平，探討COPD病情變化時的二者關(guān)系，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年12月—2013年12月我院收治的AECOPD患者34例(A組)以及COPD穩(wěn)定期患者37例(B組)；選擇30名有嗜煙史的健康人(C組)以及30名無嗜煙史的健康人(D組)。4組受試者的性別、年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。A、B、C組的吸煙指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，A、B組的病程差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 4組患者的一般資料比較

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) 參照中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病學(xué)組發(fā)布的《慢性阻塞性肺疾病診治指南》[5]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)進行診斷。A、B組患者均有不同程度的長期咳嗽、咯痰病史，結(jié)合胸部X線片表現(xiàn)、肺功能檢查指標(biāo)等，確診為COPD。A組患者在COPD病史的基礎(chǔ)上，有咳嗽、咳痰、呼吸困難等癥狀的急性加重，可伴有呼吸衰竭、意識障礙等，由此診斷為AECOPD。排除急性肺栓塞、支氣管哮喘等其他呼吸系統(tǒng)疾病患者；排除合并惡性腫瘤、嚴(yán)重心肝腎功能不全、凝血功能障礙、急性心腦血管事件的患者；排除近期接受過糖皮質(zhì)激素治療或者長期吸入糖皮質(zhì)激素和長效支氣管擴張劑的患者。

1.3 研究方法 A、B組患者入院后均按照COPD診療常規(guī)進行治療，包括吸氧、抗感染、化痰等；A組患者根據(jù)病情給予解痙平喘治療并監(jiān)測生命體征，必要時行氣管內(nèi)插管、呼吸機輔助通氣等。A、B組患者入院后第2天清晨空腹抽取外周靜脈血4 mL，C、D組受試者在預(yù)定時間清晨空腹抽取外周靜脈血4 mL。將靜脈血在室溫下靜置30 min，然后以3000 r/min的速率離心10 min，采集上層血清液，貯存于-70℃的環(huán)境中待測。4組受試者用滅菌注射用水漱口后，霧化吸入5 mL 3%氯化鈉液以誘導(dǎo)咯痰，用無菌培養(yǎng)皿收集痰液，加入0.1%的二硫蘇糖醇(加入量約為痰液體積的4倍)，渦旋震蕩10 min后，再加相同體積的磷酸鹽緩沖液并震蕩5 min，然后以2000 r/min的速率離心10 min，吸取上層清液并貯存于-70℃待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法(SP-D試劑盒由北京方程生物科技有限公司提供)檢測血清和痰液SP-D水平。

2 結(jié) 果

2.1 4組受試者的血清、痰液SP-D水平的比較 A組血清SP-D水平為(165.09±16.72)ng/mL，顯著高于B、C、D組(P<0.05)；A組痰液SP-D水平為(109.03±18.95)ng/mL，顯著低于B、C、D組(P<0.05)。B組血清SP-D水平為(126.48±15.64)ng/mL，顯著高于C、D組(P<0.05)；B組痰液SP-D水平為(133.28±16.36)ng/mL，顯著低于C、D組(P<0.05)。C組血清SP-D水平為(72.85±8.62)ng/mL，顯著高于D組(P<0.05)；C組痰液SP-D水平為(260.04±47.91)ng/mL，顯著低于D組(P<0.05)。見表2。

表2 4組受試者血清、痰液SP-D水平的比較

2.2 AECOPD患者痰液SP-D和血清SP-D水平的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析顯示，AECOPD患者的血清SP-D水平和痰液SP-D水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.698，P<0.05)。

3 討 論

COPD呈慢性病程，病情容易反復(fù)，隨著病情的進展，患者的肺功能進行性下降，可并發(fā)呼吸衰竭、肺心病而威脅患者的生命[6]。在COPD的發(fā)病和病情變化的過程中，炎性細(xì)胞浸潤、各種細(xì)胞因子介導(dǎo)的非特異性炎性反應(yīng)發(fā)揮了重要作用[7]。SP-D由Clara細(xì)胞和肺泡II型上皮細(xì)胞分泌，近年研究[8]證實，SP-D在機體免疫調(diào)節(jié)以及抵抗病原微生物方面起重要作用。

近年來，有關(guān)血清SP-D水平和COPD病情關(guān)系的研究逐漸深入，關(guān)鍵等[9]的研究證實，相對于健康人群，COPD患者的血清SP-D水平顯著升高，本研究的結(jié)果與之基本一致。此外，本研究中AECOPD患者的血清SP-D水平顯著高于COPD穩(wěn)定期患者，這說明檢測血清SP-D水平有助于評估COPD患者的病情，對臨床COPD的診治有一定指導(dǎo)意義。周忠海等[10]發(fā)現(xiàn)，COPD患者SP-D水平越高，一秒用力呼氣容積(FEV1)越低， COPD病情越嚴(yán)重，這也證實，對血清SP-D的檢測有助于評估COPD病情。本研究進一步比較了健康人群中有嗜煙史和無嗜煙史患者的SP-D水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，前者的血清SP-D水平顯著高于后者。研究[11-12]表明，吸煙過程中產(chǎn)生的各種有害物質(zhì)進入呼吸道后，可損傷呼吸道黏膜，并誘導(dǎo)非特異性炎性反應(yīng)，使SP-D的濃度升高，肺毛細(xì)血管損傷后通透性增加，SP-D進入血中，由此導(dǎo)致血清SP-D水平顯著升高。

本研究對4組的痰液SP-D水平的檢測發(fā)現(xiàn)，A組患者的痰液SP-D水平顯著低于其余3組，C組的痰液SP-D水平則顯著低于D組；同時，AECOPD患者血清SP-D水平和痰液SP-D水平呈負(fù)相關(guān)。這說明COPD患者病情越重，其痰液SP-D水平越低，而有嗜煙史的健康人群其痰液中SP-D水平也顯著下降。這主要是由于SP-D為親水性蛋白，COPD患者和有長期嗜煙史的健康人群的肺組織均有不同程度的炎性反應(yīng)，肺血管通透性增加，SP-D向血清擴散的速度增加，肺組織中的SP-D濃度則隨之降低[13]。這提示除了監(jiān)測患者的血清SP-D水平外，痰液SP-D水平的監(jiān)測也對COPD病情的評估也有重要的參考價值。

綜上所述，血清和痰液SP-D水平的監(jiān)測均有助于臨床AECOPD病情的評估，且兩者呈負(fù)相關(guān)。

[1]蔡柏薔. 2010年慢性阻塞性肺疾病的研究進展[J]. 中華結(jié)核和呼吸雜志, 2011, 34(4): 294-298.

[2]Parra E1, Moleiro LH, López-Montero I et al. A combined action of pulmonary surfactant proteins SP-B and SP-C modulates permeability and dynamics of phospholipid membranes[J]. Biochem J, 2011, 438(3): 555-564.

[3]Atochina-Vasserman EN. S-nitrosylation of surfactant protein D as a modulator of pulmonary inflammation[J]. Biochim Biophys Acta, 2012, 1820(6): 763-769.

[4]吳友茹, 陳明勇, 李惠, 等. 慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血漿SP-D水平測定及臨床意義[J]. 重慶醫(yī)學(xué), 2011, 40(36): 3701-3702.

[5]中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會. 慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007年修訂版)[J]. 中華結(jié)核和呼吸雜志, 2007, 30(1): 8-17.

[6]Galera R, Casitas R, Martínez E, et al. Exercise oxygen flow titration methods in COPD patients with respiratory failure[J]. Respir med, 2012, 106(11): 1544-1550.

[7]Eustace A, Smyth LJ, Mitchell L, et al. Identification of cells expressing IL-17A and IL-17F in the lungs of patients with COPD[J]. Chest, 2011, 139(5): 1089-1100.

[8]Duvoix A, Miranda E, Perez J, et al. Evaluation of full-length, cleaved and nitrosylated serum surfactant protein D as biomarkers for COPD[J]. COPD, 2011, 8(2): 79-95.

[9]關(guān)鍵, 羅倩, 李敬萍, 等. COPD患者血漿SP-A、SP-D水平變化及意義[J]. 石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2013, 31(2): 206-209.

[10]周忠海, 雷霆, 顏春松, 等. 慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期血清肺表面活性蛋白D和C-反應(yīng)蛋白與各因素之間的關(guān)系探討[J]. 中國全科醫(yī)學(xué), 2011, 14(22): 2528-2530.

[11]老啟芳, 鐘小寧, 何志義, 等. 肺功能正常吸煙者和慢性阻塞性肺疾病患者肺腺泡動脈炎癥特征[J]. 中華內(nèi)科雜志, 2011, 50(10): 839-844.

[12]Warnier MJ, van Riet EE, Rutten FH, et al. Smoking cessation strategies in patients with COPD[J]. Eur Respir J, 2013, 41(3): 727-734.

[13]劉雙林, 沈奕播, 李琦, 等. 慢性阻塞性肺疾病急性加重時血清和痰液中SP-D的變化和臨床意義[J]. 中華肺部疾病雜志(電子版), 2013, 6(2): 26-29.