劉曉艷 陳志云 高彩鳳

取卵日不同大小卵泡的獲卵情況及卵母細胞質量差異分析

劉曉艷 陳志云 高彩鳳

目的 探討體外受精胚胎移植(IVF-ET)中, 取卵日卵泡直徑與卵子回收率、相應卵泡獲得的卵子質量、受精和卵裂的關系。方法 回顧性分析接受卵泡漿內(nèi)單精子注射(ICSI)治療的30個周期100個卵泡, 根據(jù)卵泡大小分為五組, 對五組的卵子回收率、卵母細胞的卵冠丘復合物(OCCC)評分、受精評分、卵裂評分進行比較和分析。結果 將穿刺卵泡分為五組, A組<16 mm、B組16~18 mm、C組18.5~20 mm、D組20.5~22 mm、E組>22 mm；五組的獲卵率、OCCC評分、受精評分、卵裂評分差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論 取卵日目標卵泡在16~22 mm之間成熟卵子回收率高并能獲得高質量胚胎。

卵泡徑線；卵母細胞；受精；卵裂

掌握合適的人絨毛膜促性腺激素(HCG)注射時機是獲得高質量卵子, 提高臨床妊娠結局的關鍵。HCG日決定主要看目標卵泡徑線, 另外結合HCG日雌激素和孕激素水平。目標卵泡為何值時才是注射HCG的最佳時間,目前國內(nèi)外尚無統(tǒng)一標準, 各文獻報道也不一致。本研究主要探討取卵日目標卵泡為何值時才能獲得高質量的卵子。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年6~12月在本院接受長方案ICSI治療的30個周期100個卵泡患者進行穿刺抽吸, 年齡25~35歲。

1.2 超促排卵方案 治療周期前的黃體中期應用長效GnRH-a(達菲林) 1.0~1.3 mg, 垂體達到降調后開始每天肌內(nèi)注射Gn(果納芬)150~300單位；期間根據(jù)卵泡生長速度及數(shù)量調整Gn用量, 當兩個或兩個以上卵泡直徑≥18 mm停用Gn, 當天抽血查E2、LH、P, 10 pm注射HCG5000~10000IU；34~36 h后取卵, 之后進行ICSI, 授精后16~20 h觀察受精情況, 72 h觀察卵裂情況。

1.3 分組 ①取卵日行單個卵泡穿刺, 將穿刺卵泡分為五組, A組<16 mm、B組16~18 mm、C組18.5~20 mm、D組 20.5~22 mm、E組>22 mm；②從卵泡液中找到卵冠丘復合物(OCCC)并評分［1］, MII期、MI期、GV期分別評3、2、1分。③行單卵受精及單胚胎培養(yǎng), 受精評分：Z1、Z2、Z3、Z4分別評為4、3、2、1分, 未受精為0分；卵裂評分分為5級, 1、2、3、4、5級分別評為5、4、3、2、1分, 未卵裂評0分。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行處理分析,計量資料以均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗, 計數(shù)資料采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 五組卵泡直徑與卵母細胞成熟度之間的關系 五組的獲卵率分別為：90%、85%、90%、80%、50%；五組之間獲卵率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=13.50, P＜0.05)。五組卵泡液中成熟卵母細胞分別為11、14、17、15、10個, 各占其獲卵總數(shù)的61%、82%、94%、94%、100%, 差異有統(tǒng)計學意義(χ2=12.01, P＜0.05)。

2.2 五組OCCC評分、受精評分及卵裂評分比較 五組OCCC評分、受精評分、卵裂評分差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),見表1。

表1 不同徑線卵泡獲得卵子及OCCC評分、受精評分、卵裂評分比較( x-±s)

3 討論

在IVF早期獲取成熟卵子是一個挑戰(zhàn), 目前, 國外有報道至少有3個優(yōu)勢卵泡平均直徑≥17 mm時用HCG［2］, 國內(nèi)標準也不盡相同, 有的中心認為主導卵泡的平均直徑有2個達到18 mm［3］給予HCG, 而有的認為至少有3個卵泡平均直徑>15 mm［4］給HCG。本研究結果提示隨著卵泡的增大獲卵率降低, 但是卵子成熟度增加, A組雖然獲卵率高, 但是小卵泡來源的卵母細胞不成熟、成熟卵受精率低、發(fā)育成高質量胚胎的能力下降, 可能由于卵泡大小和胞質成熟有關, 小卵泡來源的卵子其mRNA轉錄功能異常所致。E組獲得卵母細胞100%成熟, 但獲卵率低, 可能和卵泡徑線過大有關, 超排周期卵泡發(fā)育過程中隨著卵泡徑線的增大卵母細胞發(fā)育過熟并導致卵母細胞的超微結構發(fā)生異常, 最終導致取不到卵。本研究還對各組卵母細胞的受精及卵裂胚胎進行評分, 發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計學意義, 說明隨著卵泡徑線的增加, 所獲得的卵子受精評分越高, 胚胎質量越好。

總之, 本研究顯示為了獲得盡可能多的成熟卵子可適當推遲注射HCG時間, 但是不能無休止的推遲, 目標卵泡平均直徑16~22 mm之間, 成熟卵子回收率高并能獲得高質量胚胎。

［1］ 黃國寧.體外受精-胚胎移植實驗室技術.北京:人民衛(wèi)生出版社, 2012:238-241.

［2］ Fanchin R.Per-follice measurements indicate that anti-mullerian hormone secretion is modulated by the extent of follicular development and luteinization and may reflect qualitatively the ovarian follicular status.Fertility and Sterility, 2005,84(1):167-173.［3］ Xu YP, Cao YX, Zhang ZG, et al.Effects of follicular growth velocity on embryonic development and in vitro fertilization and embryo transfer cycles.Acta Universitatis Medicinalis Anhui, 2006, 41(4): 462-465.

［4］ 崔艷國,全松,邢福祺.COH周期中的卵泡徑線大小與體外受精-胚胎移植妊娠率的相關性.廣東醫(yī)學, 2007,28(5):753-755.

Analysis of ovum acquisition rate on different sized follicles and oocyte quality difference

LIU Xiao-yan, CHEN Zhi-yun, GAO Cai-feng.
Reproductive Center, Huizhou People's Hospital, Huizhou 516000, China

Objective To investigate the the relationship between follicular diameter on the day of oocyte retrieval and egg recovery rate, the corresponding follicles obtained oocyte quality, fertilization and cleavage in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET).Methods A retrospective analysis of accepting intra cytoplasmic sperm injection (ICSI) treatment for 30 cycles of 100 follicles, according to the size of follicles were divided into 5 groups, OCCC egg recovery rate in 5 groups, oocyte (OCCC) score, fertilization, cleavage score were compared and analyzed.Results The puncture follicles were divided into 5 groups, group A<16 mm, group B , 16~18mm, group C, 18.5~20 mm, group D 20.5~22mm, group E >22 mm; soocytes, fertilization rate, cleavage of OCCC score, cleavage score differences of 5 group were statistically significant (P＜0.05).Conclusion On the day of oocyte retrieval target follicle rate is high and can obtain high quality embryo mature egg recovery between 16~22 mm.

Follicular diameter; Oocyte; Fertilization; Cleavage

2014-03-13］

廣東省惠州市科技計劃課題(項目編號：003447915-0316025)

516000 廣東省惠州市中心人民醫(yī)院生殖中心