鄧勇瑩 陸中奎 侯有磯

真空采血管內(nèi)壁處理劑對血清TT3和TT4及TSH檢測的影響

鄧勇瑩 陸中奎 侯有磯

目的 評價一種真空采血管內(nèi)壁處理劑對甲功三項檢測結(jié)果的影響。方法 采用內(nèi)壁處理劑處理的玻璃管與未經(jīng)過內(nèi)壁處理劑處理的玻璃管生產(chǎn)的無抗凝真空采血管, 對20例健康人進行采血測試, 考察兩種無抗凝管的血清分離效果及在三個不同的檢測平臺上總?cè)饧谞钤彼?TT3)、總甲狀腺素(TT4)、促甲狀腺激素(TSH)檢測值的差異。結(jié)果 經(jīng)過內(nèi)壁處理劑處理的玻璃無抗凝管與未經(jīng)過內(nèi)壁處理的玻璃無抗凝管采血后分離血清, 經(jīng)過內(nèi)壁處理的玻璃無抗凝管沒有纖維蛋白掛壁情況；TT3、TT4、TSH在貝克曼DXI800、西門子Centaur、雅培i2000檢測平臺上檢測, 經(jīng)過內(nèi)壁處理的玻璃無抗凝管的TT3均值分別為3.10、2.38、2.07 nmol/L, 標準差分別為0.42、0.38、0.31；TT4均值分別為102.44、102.34、103.15 nmol/L, 標準差分別為15.49、16.25、17.56；TSH均值分別為2.25、2.21、2.29 mIU/L, 標準差分別為1.29、1.27、1.38；未經(jīng)內(nèi)壁處理的玻璃無抗凝管的TT3均值分別為2.06、1.99、2.08 nmol/L, 標準差分別為0.28、0.48、0.30；TT4均值分別為102.82、103.46、101.80 nmol/L, 標準差分別為16.48、16.66、16.17；TSH均值分別2.26、2.25、2.23 mIU/L, 標準差分別為1.33、1.28、1.28。TT3在貝克曼DXI800檢測平臺差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。結(jié)論 在某些檢測平臺上, 真空采血管內(nèi)壁處理劑L-720會對血清TT3檢測造成干擾。

表面活性劑； L-720；真空采血管

真空采血管是由多個部件共同組成的用于實驗室分析所需的血清或血漿的采血管。例如, 玻璃真空采血管, 玻璃內(nèi)表面本身對凝血系統(tǒng)的激活起著關(guān)鍵作用, 而現(xiàn)在廣泛使用的塑料真空采血管, 由于塑料內(nèi)表面不利于凝血系統(tǒng)的激活, 所以額外添加了以二氧化硅為主要成分的活化劑, 以促進凝血系統(tǒng)的激活。這些二氧化硅粒子需要涂上一層化合物, 如聚乙烯吡咯烷酮, 以幫助二氧化硅粒子黏附在塑料管壁上和讓它能迅速進入血液中［1-3］。真空采血管的內(nèi)表面通常涂上一層表面活性劑, 改善血液流動, 減少血細胞的黏附, 更有助于防止溶血及更好地讓附在管壁的二氧化硅發(fā)揮作用。如果沒有表面活性劑, 隨著時間的推移, 細胞溶血和血清的不完全分離會改變血清的成分。本文所研究的是一種有機硅的表面活性劑L-720, 通過使用該活性劑進行內(nèi)壁處理的真空采血管與沒有經(jīng)過內(nèi)壁處理的真空采血管同時采血測試, 評價經(jīng)過該表面活性劑內(nèi)壁處理的真空采血管對甲狀腺激素檢測的影響。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 貝克曼DXI800化學發(fā)光分析儀, 配套原裝試劑、校準品及質(zhì)控品；西門子Centaur化學發(fā)光分析儀,配套原裝試劑、校準品及質(zhì)控品；雅培i2000化學發(fā)光分析儀,配套原裝試劑、校準品及質(zhì)控品；表面活性劑L-720；玻璃管為重慶萬州神宇藥用玻璃制品有限公司生產(chǎn)；水為超純水。

1.2 實驗方法 ①試管內(nèi)壁處理液配制：用1 ml移液管精確吸取1 ml表面活性劑L-720于1 L容量瓶中, 用超純水定容, 即得到1%體積比的內(nèi)壁處理液。②玻璃管內(nèi)壁處理：取一干凈的不銹鋼容器, 倒入之前配制好的內(nèi)壁處理液, 然后放入經(jīng)過超聲清洗的玻璃管, 內(nèi)壁處理液要完全浸泡玻璃管, 浸泡10 min后取出瀝干, 置于80°烘箱烘2 h。③真空采血管制備：各取50支經(jīng)過內(nèi)壁處理的玻璃管和50支只經(jīng)過超聲波清洗的玻璃管, 分別進行真空壓塞, 制成無抗凝真空采血管。④采血測試：20例30～60歲志愿獻血者, 男女各10例,每人各采2管血, 一管為經(jīng)過內(nèi)壁處理玻璃無抗凝管, 另一管是沒有經(jīng)過內(nèi)壁處理玻璃無抗凝管。采血后豎直放置于試管架中, 靜置2 h后1300 g, 離心10 min。離心后觀察血清分離情況。⑤上機測試：吸取每支管的分離血清分成3份, 分別在貝克曼DXI800化學發(fā)光儀、西門子Centaur化學發(fā)光儀、雅培i2000化學發(fā)光分析儀上檢測TT3、TT4、TSH檢測值。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清分離情況 離心后仔細觀察各支采血管是否存在溶血及纖維蛋白、血細胞附壁情況, 結(jié)果見表1。

2.2 不同檢測平臺檢測項目結(jié)果比較 兩種無抗凝分離血清后, 直接吸出血清到樣本杯里, 同時在各個平臺上檢測TT3、TT4、TSH三個項目。檢測結(jié)果顯示TT3這個項目, 在貝克曼DXI800檢測平臺上差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01),在西門子Centaur檢測平臺上有較明顯增高的趨勢, 在雅培i2000檢測平臺上差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 見表2。其余兩個項目TT4、TSH在三個檢測平臺差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表3, 表4。

表1 兩種采血管血清分離情況

表3 不同檢測平臺TT4結(jié)果比較( x-±s, nmol/L)

表4 不同檢測平臺TSH結(jié)果比較( x-±s, MIU/L)

3 討論

雖然真空采血管已經(jīng)在國內(nèi)應用多年, 但一直很少有人意識到真空采血管附加劑或處理劑會影響某些生化或免疫項目的檢測值。本文所使用的這個有機硅表面活性劑就是其中一種, 它應用在血清類采血管目的是減少血細胞掛壁及溶血發(fā)生的概率。表面活性劑L-720是一種包含有親水性聚乙二醇鏈的非離子硅酮類表面活性劑, 它們以均聚物或聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物連接在一個疏水性的聚二甲基硅氧烷形式存在［1,4-6］。從小批量樣本的實驗結(jié)果看來, 應用了這種表面活性劑處理過的內(nèi)壁的無抗凝玻璃管對減少纖維蛋白掛壁有較好的效果, 但后來取兩種管的血清在不同檢測平臺上檢測時發(fā)現(xiàn), 應用L-720處理過內(nèi)壁的玻璃管生產(chǎn)的真空采血管對甲狀腺功能檢測的三個比較常用的項目中的TT3有明顯的影響［7,8］。從檢測原理分析, 可能是血清中的表面活性劑有促進抗-T3抗體從固相載體的表面解離下來, 降低化學發(fā)光信號而導致增加了T3濃度。用于血液采集的真空采血管中的附加劑是分析前誤差的重要來源之一, 也是目前比較容易忽視的地方。臨床實驗室的檢驗人員應十分警惕真空采血管的改變帶來的檢測性能的變化。同時試劑生產(chǎn)廠家也要考慮建立表面活性劑導致抗體解吸附和(或)變性的可能性評估體系。

［1］ Cohen RR, Dastane AN.Additive preparation and method of use thereof: U.S.Patent 6, 225, 123.2001-5-1.

［2］ Anraku H, Shoji Y.Vacuum blood-collection tube: U.S.Patent 4, 856, 533.1989-8-15.

［3］ Kessler SB.Apparatus for the separation of blood components: US Patent 2, 578, 864, 1981-8-25.

［4］ Zhang XD, Macosko CW, Davis HT, et al.Role of silicone surfactant in flexible polyurethane foam.J Colloid Interface Sci, 1999, 215(2):270-279.

［5］ Byun JW, Kim JU, Chung WJ, et al.Surface-grafted polystyrene beads with comb-like poly(ethylene glycol) chains: preparation and biological application.Macromol Biosci, 2004, 4(5):512-519.

［6］ Wang A, Jiang L, Mao G, et al.Direct force measurement of silicone- and hydrocarbon-based ABA triblock surfactants in alcoholic media by atomic force microscopy.J Colloid Interface Sci, 2002, 256(2):331-340.

［7］ 李巖, 王玉梅, 魏敏.淺談臨床應用貝克曼全自動化學發(fā)光免疫分析儀檢測甲狀腺素的效果.中國地方病防治雜志, 2012, 27(5):393-394.

［8］ 丁金國, 姚冬明, 房玉珠, 等.促甲狀腺激素在不同化學發(fā)光分析系統(tǒng)間的對比分析和偏倚評估.海南醫(yī)學, 2010, 21(4): 102-104.

Effect of vacuum tube inner surface treating agent on TT3, TT4and TSH detection

DENG Yong-ying, LU Zhong-kui, HOU You-ji.Department of Laboratory, Longjiang Hospital of Shunde District, Foshan 528318, China

Objective To evaluate effect of vacuum tube inner surface teating agent on thyroid function tests.Methods Used anticoagulation vacuum blood vessels made of glass tube with or without inner surface treating agent processing for blood tests on 20 healthy people, two anticoagulant tube serum separation effect and on three different detection platform TT3, TT4, TSH values differences were observed.Results There was no fibrin hang wall for vacuum tube with inner surface treating agent.TT3, TT4, TSH in Beckman DXI800, Siemens Centaur, Abbott i2000 detection platform, through the lining of processing glass without anticoagulant tube For vacuum tube with inner surface treating agent, average of TT3were 3.10 nmol/L, 2.38 nmol/L, 2.07 nmol/L, the standard deviation were 0.42, 0.38, 0.31, respectively;the average TT4were 102.44 nmol/L, 102.34 nmol/L, 103.15 nmol/L, standard deviation were 15.49, 16.25, 17.56, respectively; average of TSH were 2.25 mIU/mIU mIU/L, 2.29 L, 2.21/L, standard deviation were 1.29, 1.27, 1.38, respectively; for vacuum tube without inner surface treating agent, average of total T3 were 2.06 nmol/L, 1.99 nmol/L, 2.08 nmol/L, the standard deviation were 0.28, 0.48, 0.30, respectively; the average of TT4were 102.82 nmol/L, 103.46 nmol/L, 101.80 nmol/L, standard deviation were 16.48, 16.66, 16.17, respectively; average of TSH were 2.26 mIU/L, 2.25 mIU/L, 2.23 mIU, respectively, the standard deviation were 1.33, 1.28, 1.28, respectively.There were significant differences on Beckman DXI800 test platform.Conclusion In some platform, vacuum tube treatment L-720 can cause interference to the total serum T3 detection.

Surfactant; L-720; Vacuum blood tube

2014-04-08］

528318 佛山市順德區(qū)龍江醫(yī)院檢驗科