羅培元, 趙艷紅

(云南省紅河州瀘西縣人民醫(yī)院 消化內(nèi)科, 云南 瀘西, 652400)

潰瘍性結(jié)腸炎為非特異性結(jié)腸炎癥，病變主要累及結(jié)腸黏膜和黏膜下層，病變中心以結(jié)直腸黏膜及黏膜下層的非特異性和慢性炎癥性為主，使黏膜上皮和腺體受到破壞而發(fā)生萎陷或增生，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，形成隱窩膿腫，引起黏膜糜爛、充血、增殖性改變及潰瘍[1]。腸易激綜合征與胃腸功能改變相關(guān)的綜合征，主要癥狀為慢性或復(fù)發(fā)性腹瀉、腹痛、排便習(xí)慣以及大便性狀異常，并伴隨生化異?；蛉狈ξ改c道結(jié)構(gòu)[2]。防御素是天然免疫的重要介質(zhì)，也是具有廣譜抗細(xì)胞和微生物毒活性的多肽。1997年，從銀屑病皮損組織中首先發(fā)現(xiàn)β防御素-2(HBD-2), 且腸黏膜中亦有表達(dá)[3]。有研究[4]結(jié)果表明, HBD-2可在促炎性因子刺激下合成表達(dá)，它的表達(dá)可以被多種促炎性因子誘導(dǎo)。HBD-2在機(jī)體受到炎性刺激時(shí)會(huì)大量表達(dá)，起到防御作用。本研究旨在探討潰瘍性結(jié)腸炎和腸易激綜合征患者結(jié)腸黏膜HBD-2的表達(dá)及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年5月—2012年12月30例在本院內(nèi)鏡室行電子結(jié)腸鏡檢查，并在腸鏡、病理及臨床表現(xiàn)綜合因素下證實(shí)為潰瘍性結(jié)腸炎患者，分為潰瘍性結(jié)腸炎組，于潰瘍性結(jié)腸炎病變部位取材。其中男18例，女12例；年齡20～66歲，平均(41.6±3.5)歲。入選潰瘍性結(jié)腸炎組患者均符合2000年制定的潰瘍性結(jié)腸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)(成都全國(guó)慢性炎癥性腸病學(xué)術(shù)研討會(huì))，根據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)，30例患者可分為8例輕度、12例中度和10例重度。選擇同期來(lái)本院就診的腸易激綜合征患者30例為腸易激綜合征組，其中男13例，女17例，年齡21～68歲，平均(42.5±3.9)歲。選擇同期來(lái)本院體檢單健康查體者30例為對(duì)照組，其中男15例，女15例，年齡19～66歲，平均(40.3±2.8)歲。2組患者的年齡、性別等一般資料無(wú)顯著差異(P>0.05), 具有可比性。

1.2 方法

3組患者入院均行電子結(jié)腸鏡檢查，收集到的活檢組織一部分立即提取RNA用于PT-PCR檢測(cè)，另一部分進(jìn)行HBD-2免疫組織化學(xué)染色(SP法)。比較各組結(jié)腸黏膜HBD-2 mRNA表達(dá)水平、結(jié)腸黏膜中HBD-2表達(dá)陽(yáng)性率、結(jié)腸黏膜中HBD-2表達(dá)強(qiáng)度。

2 結(jié) 果

2.1 各組結(jié)腸黏膜HBD-2 mRNA表達(dá)水平比較

由表1可見，潰瘍性結(jié)腸炎組、腸易激綜合征組患者結(jié)腸黏膜HBD-2 mRNA水平均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。潰瘍性結(jié)腸炎組患者結(jié)腸黏膜HBD-2 mRNA水平明顯高于腸易激綜合征組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。潰瘍性結(jié)腸炎組中，輕、中、重度三組HBD-2 mRNA表達(dá)水平比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

表1 各組HBD-2 mRNA表達(dá)水平比較

與腸易激綜合征組比較，##P<0.05。

2.2 HBD-2免疫組化染色結(jié)果

HBD-2陽(yáng)性染色主要在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)，少量在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)。陽(yáng)性細(xì)胞主要定位于腸腺和腸上皮細(xì)胞間的間質(zhì)細(xì)胞。在潰瘍性結(jié)腸炎組患者的腸黏膜中觀察到大量HBD-2表達(dá)，而在腸易激綜合征組和對(duì)照組患者腸黏膜中，僅發(fā)現(xiàn)少量或未見HBD-2表達(dá)。HBD-2陽(yáng)性表達(dá)率在潰瘍性結(jié)腸炎組的結(jié)腸黏膜中明顯高于對(duì)照組和腸易激綜合征組，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01), 腸易激綜合征組、對(duì)照組間HBD-2陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)顯著差異(P>0.05), 見表2。

表2 各組結(jié)腸黏膜中HBD-2表達(dá)陽(yáng)性率

2.3 各組結(jié)腸黏膜中HBD-2表達(dá)強(qiáng)度比較

如表3所示, HBD-2表達(dá)強(qiáng)度(2+、3+)在潰瘍性結(jié)腸炎組患者的結(jié)腸黏膜中明顯強(qiáng)于腸易激綜合征組、對(duì)照組，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3 各組患者結(jié)腸黏膜中HBD-2表達(dá)強(qiáng)度比較[n(%)]

3 討 論

潰瘍性結(jié)腸炎的主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、黏液膿血便，主要與環(huán)境、免疫和遺傳等因素有關(guān)。目前大多數(shù)研究認(rèn)為，潰瘍性結(jié)腸炎與異常的免疫反應(yīng)相關(guān)，尤其是腸黏膜局部異常免疫反應(yīng)。研究[5-6]表明，在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生發(fā)展中，各種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子的相互作用形成復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)，具有放大自身的作用，可以促進(jìn)炎癥反應(yīng)，引起黏膜損傷。腸易激綜合征指腹脹、腹痛、大便性狀和排便習(xí)慣異常等癥狀，間歇發(fā)作或持續(xù)存在，無(wú)生化和形態(tài)學(xué)異常改變，是胃腸道功能紊亂性疾病，在臨床上比較常見。目前有不少專家認(rèn)為，腸易激綜合征與神經(jīng)、精神因素及腸道刺激因素有關(guān)。

防御素是陽(yáng)離子短肽，屬于可以在動(dòng)植物體內(nèi)參與機(jī)體防御活動(dòng)的抗菌肽的一種，分子量為4kD-5kD, 含保守的胱氨酸殘基6個(gè)半，形成了3個(gè)比較典型的分子內(nèi)二硫鍵。具有廣譜抗菌活性的HBD-2可以強(qiáng)力殺滅革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性菌及酵母菌等，尤其對(duì)革蘭陰性菌，殺菌效果更顯著。一般認(rèn)為, HBD-2主要通過(guò)對(duì)細(xì)菌膜的滲透性改變而起到抗菌作用，且由HBD-2分子的正電性和兩親性決定這種作用的強(qiáng)弱。有學(xué)者[7]研究了潰瘍性結(jié)腸炎患者及正常對(duì)照組患者的結(jié)腸黏膜HBD-2表達(dá)，結(jié)果表明HBD-2在非炎癥結(jié)腸中不存在，而在潰瘍性結(jié)腸炎患者結(jié)腸黏膜中的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組。在本研究中，無(wú)論在蛋白水平，還是mRNA水平, HBD-2的表達(dá)水在潰瘍性結(jié)腸炎患者的結(jié)腸黏膜中較腸易激綜合征及正常對(duì)照組患者的結(jié)腸黏膜明顯增高。提示HBD-2在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。但潰瘍性結(jié)腸炎患者輕、中、重度之間HBD-2的表達(dá)水平無(wú)顯著差異，推測(cè)HBD-2表達(dá)于潰瘍性結(jié)腸炎的病情嚴(yán)重程度無(wú)關(guān)。

目前，潰瘍性結(jié)腸炎最常用的治療藥物有免疫抑制劑、氨基水楊酸類及皮質(zhì)類固醇，總有效率為70%～80%, 但這些藥物只能暫時(shí)控制或緩解癥狀，無(wú)法從根本上治愈[8-9]。而且，長(zhǎng)期應(yīng)用這些藥物容易增加不良反應(yīng)，停藥后復(fù)發(fā)率較高，對(duì)部分難治性患者的效果不理想。因此，比較理想的治療途徑是根據(jù)發(fā)病機(jī)制的重要環(huán)節(jié)進(jìn)行阻斷。HBD-2中的防御素具有強(qiáng)大抗菌功能，有廣闊的臨床應(yīng)用前景。有學(xué)者[10]提出，在深入了解防御素表達(dá)的調(diào)節(jié)機(jī)制的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)藥物對(duì)靶器官的防御素表達(dá)進(jìn)行特異地調(diào)節(jié)，以此達(dá)到治療目的。HBD-2基因曾被作為基因治療的研究模型而轉(zhuǎn)入鼠的細(xì)胞系，并取得了有意義的初步成果。目前，雖然一些防御素轉(zhuǎn)基因體系已經(jīng)建立，但僅存在于動(dòng)物模型中[11-12], 因此，深入研究防御素轉(zhuǎn)基因體系，有助于對(duì)UC發(fā)病機(jī)制的闡明，并為新型抗生素的開發(fā)提供理想的模板和分子骨架，給潰瘍性結(jié)腸炎的治療帶來(lái)新的希望。

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