馬小剛 楊曉光 趙崢

·論著·

肺癌患者手術(shù)前后血清Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)的臨床意義

馬小剛 楊曉光 趙崢

目的研究肺癌患者手術(shù)前后血清脂質(zhì)運載蛋白-2(Lipocalin-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的表達(dá)及臨床意義。方法采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測60例肺癌患者手術(shù)前后Lipocalin-2、MMP-9蛋白水平，分析其與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果肺癌組Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)水平顯著高于健康對照組(P<0.05)。二者表達(dá)與TNM臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況有關(guān)(P<0.05)，且呈正相關(guān)(r=7.217，P<0.05)。手術(shù)治療總有效率為80.0%，治療后Lipocalin-2、MMP-9水平顯著降低，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論肺癌組Lipocalin-2、MMP-9異常高表達(dá)，這與肺癌侵襲轉(zhuǎn)移過程密切相關(guān)。手術(shù)治療可顯著降低二者表達(dá)水平，對其表達(dá)水平的監(jiān)測可作為判斷手術(shù)療效和評估預(yù)后的可靠指標(biāo)。

肺腫瘤；Lipocalin-2；MMP-9；手術(shù)

肺癌是我國最常見的惡性腫瘤，致死率居惡性腫瘤之首。脂質(zhì)運載蛋白-2(Lipocalin-2)是載脂蛋白家族成員之一，在調(diào)節(jié)脂代謝、滲透壓及抗炎方面發(fā)揮重要作用。研究表明，Lipocalin-2與肺癌等惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[1]?；|(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)因?qū)?xì)胞外基質(zhì)和基膜的降解作用，參與了腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過程[2]。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測60例肺癌患者手術(shù)前后Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)水平,旨在探討二者在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為疾病診斷、手術(shù)療效及預(yù)后判斷提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年至2012年我院收治、且經(jīng)病理確診的原發(fā)性肺癌患者60例，男44例，女16例；年齡39～77歲，中位年齡56.5歲；病理類型：鱗癌28例，腺癌20例，小細(xì)胞癌12例；TNM臨床分期參照2002年UICC制定的標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ+Ⅱ期26例，Ⅲ+Ⅳ期34例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者38例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者22例。同時選取我院健康體檢者50例作為對照組，其中男40例，女20例；年齡35～78歲，中位年齡54.6歲。2組一般資料有均衡性。

1.2 手術(shù)療效的判定標(biāo)準(zhǔn) 療效評價標(biāo)準(zhǔn)分為臨床緩解、部分緩解及無變化，總有效率=臨床緩解率+部分緩解率。

1.3 實驗方法

1.3.1 標(biāo)本采集：抽取肺癌患者手術(shù)前后和健康人清晨空腹靜脈血3 ml,靜置30 min，4℃ 1 000 r/min離心15 min，取上清凍于-80℃待測。

1.3.2 ELISA法：采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測Lipocalin-2、MMP-9蛋白水平，試劑盒由上海生物工程有限公司提供，嚴(yán)格按照說明書操作。

2 結(jié)果

2.1 2組Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)水平比較 肺癌組Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)水平均顯著高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 2組Lipocalin-2、MMP-9水平比較

表1 2組Lipocalin-2、MMP-9水平比較

組別血清Lipocalin-2(ng/ml)血清MMP-9(pg/ml)肺癌組(n=60)118±35512±103對照組(n=50) 37±10*112±32*

注：與肺癌組比較，*P<0.05

2.2 Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)與肺癌臨床病理特征的關(guān)系 Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)與患者年齡、性別、病理類型無關(guān)(P>0.05)，而與TNM臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)(P<0.05)。見表2。

2.3 肺癌組Lipocalin-2、MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析 直線相關(guān)分析顯示，肺癌患者血清Lipocalin-2、MMP-9水平呈顯著正相關(guān)(r=7.217，P<0.05)。

2.4 手術(shù)治療肺癌的臨床療效 60例肺癌患者手術(shù)后，治療總有效率為80.0%。見表3。2.5 手術(shù)治療肺癌的遠(yuǎn)期療效 60例肺癌患者手術(shù)后死亡2例，術(shù)后跟蹤隨訪5年，患者1、3、5年生存率分別為69.0%(40/58)、41.4%(24/58)、20.7%(12/58)。

2.6 手術(shù)后患者血清Lipocalin-2、MMP-9水平的變化 60例肺癌患者手術(shù)后Lipocalin-2、MMP-9水平與治療前比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

2.7 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組Lipocalin-2、MMP-9水平的變化 60例肺癌患者手術(shù)治療1年后有20例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)組Lipocalin-2、MMP-9水平顯著升高，與未復(fù)發(fā)組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

3 討論

表2 Lipocalin-2、MMP-9水平與肺癌臨床病理特征的關(guān)系

表2 Lipocalin-2、MMP-9水平與肺癌臨床病理特征的關(guān)系

病理特征血清Lipocalin-2(ng/ml)P值血清MMP-9(pg/ml)P值年齡(歲) <60(n=39)114±320.273506±1000.292 ≥60(n=21)127±37516±105性別 男(n=44)116±320.297511±1010.267 女(n=16)110±28524±107病理類型 鱗癌(n=28)128±360.302502±1000.283 腺癌(n=20)119±30519±105 細(xì)胞癌(n=12)113±26516±103TNM分期 Ⅰ+Ⅱ期(n=26)79±210.010438±850.006 Ⅲ+Ⅳ期(n=34)140±40589±124淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無(n=22)72±220.008422±810.004 有(n=38)145±42593±128

表3 手術(shù)治療肺癌的臨床療效 n=60，例

表4 手術(shù)治療前后Lipocalin-2、MMP-9水平比較

表4 手術(shù)治療前后Lipocalin-2、MMP-9水平比較

組別Lipocalin-2(ng/ml)手術(shù)前手術(shù)后1個月MMP-9(pg/ml)手術(shù)前手術(shù)后1個月肺癌組118±3570±18*512±103327±61*

注：與手術(shù)前比較，*P<0.05

表5 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組Lipocalin-2、MMP-9水平比較

表5 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組Lipocalin-2、MMP-9水平比較

組別Lipocalin-2(ng/ml)MMP-9(pg/ml)未復(fù)發(fā)組(n=40)79±19330±63復(fù)發(fā)組(n=20)126±36* 518±103*

注：與未復(fù)發(fā)組比較，*P<0.05

Lipocalin-2是1993年Kjeldsen等[3]在中性粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)和分離的一種脂質(zhì)運載蛋白。研究證實，Lipocalin-2生物學(xué)功能廣泛，在肥胖、胰島素抵抗、代謝綜合征、血管病變、炎性反應(yīng)等方面發(fā)揮關(guān)鍵作用，是這些疾病的潛在治療靶點。近年來，國外研究發(fā)現(xiàn)Lipocalin-2在乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、口腔癌等多種惡性腫瘤中異常高表達(dá)，在腫瘤細(xì)胞凋亡、黏附、浸潤轉(zhuǎn)移過程中扮演重要角色[4]。

惡性腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵是對細(xì)胞外基質(zhì)中膠原等多種蛋白成分的降解，其中MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中分子量最大、最重要的酶。MMP-9在肺癌等多種惡性腫瘤中異常高表達(dá)，與癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究顯示，Lipocalin-2和MMP-9在肺癌患者血清中均表達(dá)上調(diào)，這與他人研究結(jié)果[1,2]一致,且其表達(dá)水平與臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況密切相關(guān)，提示二者與肺癌發(fā)生及侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，是肺癌惡化和轉(zhuǎn)移的重要風(fēng)險因子。Leng等[4]采用抑制性單克隆抗體阻斷乳腺癌細(xì)胞Lipocalin-2的功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的侵襲和肺轉(zhuǎn)移受到明顯抑制，作者推測可能是由于Lipocalin-2功能受抑導(dǎo)致MMP-9降解增加、活性降低。Kubben等[5]也發(fā)現(xiàn)人胃癌組織Lipocalin-2和MMP-9異常高表達(dá)，Lipocalin-2可保護MMP-9免受降解，從而增加腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移能力。因此，Lipocalin-2可能通過促進MMP-9的活化在肺癌的侵襲轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

本研究結(jié)果顯示，肺癌手術(shù)總有效率達(dá)80.0%，且術(shù)后患者Lipocalin-2和MMP-9水平明顯下降，提示二者在肺癌患者高表達(dá)主要是惡性腫瘤源性。我們隨訪發(fā)現(xiàn)，術(shù)后1年復(fù)發(fā)患者Lipocalin-2和MMP-9水平較未復(fù)發(fā)者明顯升高。因此，因此，Lipocalin-2和MMP-9水平可作為判斷療效及預(yù)后的可靠指標(biāo)，若術(shù)后Lipocalin-2和MMP-9水平回升或持續(xù)處于高水平狀態(tài)，提示腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和預(yù)后差，二者可為評價肺癌發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移及判斷預(yù)后提供重要參考價值，并可成為肺癌治療的新靶標(biāo)。

1 王宇,陳偉,曾婷婷.肺癌患者血清中脂質(zhì)運載蛋白-2的表達(dá)及臨床意義.華西醫(yī)學(xué),2013,28:44-46.

2 錢海紅.非小細(xì)胞肺癌化療前后血清 VEGF 和 MMP-9水平的對照觀察.河北醫(yī)藥,2013,35:496-497.

3 Kjeldsen L,Johnsen AH,Sengelov H,et al.Isolation and primary structure of NGAL,a novel protein associated with human neutrophil gelatinase.J Biol Chem,1993,268:10425-10432.

4 Leng X,Ding T,Lin H,et al.Inhibition of lipocalin 2 impairs breast tumorigenesis and metastasis.Cancer Res,2009,69:8579-8584.

5 Kubben FJ,Sier CF,Hawinkels LJ,et al.Clinical evidence for a protective role of lipocalin-2 against MMP-9 autodegradation and the impact for gastric cancer.Eur J Cancer，2007,43:1869-1876.

ExpressionandclinicalsignificanceofserumLipocalin-2andMMP-9beforeandafteroperationinpatientswithlungcancer

MAXiaogang,YANGXiaoguang,ZHAOZheng.DepartmentofThoracicSurgery,CentralHospitalofHandanCity,Hebei,Handan056001,China

ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of Lipocalin-2 and MMP-9 before and after operation in patients with lung cancer.MethodsThe serum levels of Lipocalin-2 and MMP-9 before and after operation were detected by ELISA in 60 patients with lung cancer and 50 healthy subjects.The correlation between the expressions and clinical pathological characteristics was analyzed.ResultsThe serum levels of Lipocalin-2 and MMP-9 in patients with lung cancer were significantly higher than those of healthy subjects (P<0.05).The expression levels of Lipocalin-2 and MMP-9 were closely correlated to clinical staging and lymph node metastasis (P<0.05),and the expression levels of Lipocalin-2 were positively related to those of MMP-9 (r=7.217,P<0.05).The total effective rate of operation was 80.0%.The serum levels of Lipocalin-2 and MMP-9 were significantly decreased after operation,as compared with those before operation (P<0.05).There were significant differences in the serum levels of Lipocalin-2,MMP-9 betweem the patients with relapse and the patients without relapse (P<0.05).ConclusionThe overexpression of Lipocalin-2 and MMP-9 is closely related with invasion and metastasis process of lung cancer,which may play an important role in carcinogenesis,invasion and metastasis of lung cancer.After operation,the Lipocalin-2 and MMP-9 levels are significantly decreased,and the detection of serum levels of Lipocalin-2 and MMP-9 may be regarded as reliable indexes for evaluating operation efficiency and patient's prognosis.

lung cancer;lipocalin-2;MMP-9;operation

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.09.002

056001 河北省邯鄲市中心醫(yī)院胸外科

R 734.2

A

1002-7386(2014)09-1288-03

2013-11-21)