★ 劉國巖 徐琬梨 張世華

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科 濟南 250014；2.山東中醫(yī)藥大學(xué) 濟南 250355)

激素性股骨頭缺血性壞死是指因大劑量應(yīng)用激素而造成股骨頭骨的活成分死亡所引起的病理過程，其發(fā)病率呈逐年增加趨勢，已占非創(chuàng)傷性股骨頭壞死的首位[1]。目前對其治療尚無滿意的方法。中藥活血補髓湯是在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，結(jié)合多年的臨床實踐篩選出來的治療股骨頭缺血性壞死的有效方藥。為進一步揭示其作用機理,從動物實驗加以驗證研究。

1 材料與方法

1.1 實驗用藥

1.1.1 中藥活血補髓湯

主要成分為丹參、黃芪、當歸、水蛭、全蝎、鹿茸、仙靈脾、仙茅、骨碎補、牛膝、肉桂、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草。

1.1.2 仙靈骨葆膠囊 由貴州同濟堂制藥有限公司生產(chǎn)(國藥準字Z20025337)。

1.1.3 地塞米松注射液 由山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司提供(國藥準字H37021969)。

1.2 實驗方法

1.2.1 36只新西蘭大白兔(許可證號：SCXK魯20090001)，雌雄各半，體重2.5-3.0kg，隨機分為3組，模型組、對照組、治療組，每組各12只。

1.2.2 參照賀式造模法[2]給模型組、對照組、治療組家兔臀部肌肉注射地塞米松注射液的方法,每次10mg/kg/只,每周2次,共4周,正常組皮下注射生理鹽水2mL/kg/只,所有動物肌注青霉素8萬U/只,每周1次,以預(yù)防感染。

1.2.3 造模成功后，一周后起對照組給予10mL/日仙靈骨葆膠囊水溶液灌胃，治療組給予10mL/日活血補髓湯灌胃，正常組、模型組給以生理鹽水5mL/kg/日體重灌胃飼養(yǎng)，連續(xù)給藥8周后取材。

1.3 觀察指標

1.3.1 組織形態(tài)學(xué)檢查 實驗動物處死后，立即解剖髖關(guān)節(jié)，取其股骨頭，從冠狀面剖開，固定、脫鈣、切片、HE染色,光學(xué)顯微鏡觀察骨組織和骨髓組織的骨小梁，骨細胞、脂肪細胞的病理改變。空骨陷窩計數(shù):對每一標本在高倍視野下隨機計數(shù)50個骨陷窩,計算其中空骨陷窩所占的百分比

1.3.2 血清學(xué)檢查 分別測定血清骨鈣素(BGP)含量、血清白介素-6(IL-6)含量、血管內(nèi)皮四項含量。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

實驗數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差表示，各組間比較采用χ2檢驗,α=0.05,所有統(tǒng)計過程用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件處理。

2 實驗結(jié)果

2.1 組織形態(tài)學(xué)變化

模型組：股骨頭軟骨下均有區(qū)骨小梁變細、稀疏。骨髓細胞大面積減少，部分骨陷窩內(nèi)骨細胞消失，空骨陷窩數(shù)明顯增多。對照組：部分空骨陷窩，骨髓造血細胞較多，骨小梁表面有少許新骨形成。治療組：骨小梁結(jié)構(gòu)基本完整，排列規(guī)則。少許空骨陷窩，骨小梁表面有新骨形成?？展窍莞C計數(shù)治療組與模型組、對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),模型組與對照組組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表1)。

表1 各組空骨陷窩率比較(n=12)

2.2 血清骨鈣素(BGP)及白介素-6(IL-6)含量測定結(jié)果(表2)

表2 血清骨鈣素(BGP)及白介素-6(IL-6)含量測定結(jié)果

2.3 血管內(nèi)皮四項含量測定結(jié)果(表3)

表3 血管內(nèi)皮四項含量測定結(jié)果

3 討論

在實驗研究中，兔血清中BGP、IL-6和血管內(nèi)皮四項測定結(jié)果表明活血補髓湯可以明顯的升高血清BGP、降低IL-6，降低血漿內(nèi)皮素、升高血清NO水平、降低血漿血栓素及升高前列環(huán)素水平，與對照組比較有顯著性差異(P<0.05)；通過測定以上血液中的各項指標含量變化，及光鏡觀察到的骨小梁變細，萎縮，骨髓細胞減少被脂肪細胞填充，并且脂肪細胞肥大，骨小梁內(nèi)正常骨細胞數(shù)量減少。提示激素性股骨頭壞死的發(fā)生、發(fā)展與激素導(dǎo)致的上述變化有密切關(guān)系。

活血補髓湯是在中醫(yī)學(xué)的理論指導(dǎo)下，采用活血祛瘀、補腎健骨藥物而組方。標本同治，活血化瘀、補肝益腎健壯筋骨治其本，柔肝緩急止痛治其標。且方中活血化瘀兼補血養(yǎng)血、行氣而不傷正。正本清源，使筋骨得充，肝腎得養(yǎng)，血液周流順暢。根據(jù)現(xiàn)代藥理研究，丹參抑制血小板凝聚，促進纖維蛋白原溶解，改善微循環(huán)，促進側(cè)支循環(huán)的建立[3]，可促進蛋白多糖合成促進骨細胞分裂增殖，促進骨的重建，實驗證明丹參還具有抗損傷作用的鈣拮抗作用[4]；鹿茸具有促進創(chuàng)傷愈合及抗炎作用；黃芪能促進抗體形成,對抗強的松龍等免疫抑制劑的影響,對體液免疫有促進作用；牛膝通過提高機體免疫機能、激活巨噬細胞系統(tǒng)對細胞的吞噬作用，以及擴張血管、改善循環(huán)促進炎性病變吸收；骨碎補有部分抑制激素引起的骨丟失的作用，還能明顯促進蛋白多糖的合成一蛋白多糖可以結(jié)合大量的鈣，即為鈣化儲存更多的鈣[5]。

本實驗研究表明，活血補髓湯能夠提高成骨能力促進骨修復(fù)和骨重建，提高骨質(zhì)量，阻斷激素性股骨頭壞死的病理改變。其作用機理可能是通過以下方面實現(xiàn)的:(1)調(diào)節(jié)骨細胞代謝，促進血清BGP分泌，減少骨質(zhì)丟失，提高骨密度。(2)降低血清IL-6的分泌，抑制破骨細胞的功能，減少骨吸收。(3)降低血漿內(nèi)皮素、升高血清NO水平、降低血漿血栓素及升高前列環(huán)素水平，減少血管內(nèi)皮細胞損害，抑制血管痙攣及血小板聚集，減少微血栓形成及血管淤滯引起的缺血性骨壞死。

[1]李子榮，張念非，岳德波，等.激素性股骨頭壞死動物模型誘導(dǎo)和觀察[J].中華外科雜志，1995,33(8):485.

[2]賀西京,毛履真,王坤正,等.腎上腺糖皮質(zhì)激素引起股骨頭缺血性壞死的機制實驗研究[J].中華骨科雜志,1992,12(6):440.

[3]劉青云．中藥藥理學(xué)[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997,12:165.

[4]袁慶之,盛茂鑫,熊吉信．鈣離子在肝缺血再灌注損傷中的作用及丹參的抗損傷作用[J].江西醫(yī)藥,1997,32(3):73.

[5]馬克昌,朱太詠,劉鮮茄，等．骨碎補注射液對培養(yǎng)基中雞胚骨原基鈣化的促進作用[J].中國中藥雜志,1995,20(3):178-180.