張 磊，韓培培，張 斌

(徐州市家畜良種站，江蘇 徐州 221151)

青年公牛精液品質(zhì)受很多因素的影響，諸如氣溫、營(yíng)養(yǎng)、維生素、微量元素和青年公牛自身生殖機(jī)能等。氣溫、營(yíng)養(yǎng)對(duì)青年公牛精液品質(zhì)影響比較明顯且具有普遍性。在微量元素方面，主要受飼料、牧草、飲水中微量元素含量影響。在對(duì)新引進(jìn)的青年公牛日糧中微量元素營(yíng)養(yǎng)狀況分析的基礎(chǔ)上，把青年公牛隨機(jī)分為兩組進(jìn)行補(bǔ)充鋅、銅的飼養(yǎng)試驗(yàn)。對(duì)兩組牛的精液品質(zhì)及血液、精液、牛毛中微量元素含量進(jìn)行測(cè)定，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

新引進(jìn)的8頭后備公牛(12月齡)作為試驗(yàn)牛，隨機(jī)分為兩組，每組4頭牛。參試牛分槽飼養(yǎng)，每日兩次定量飼喂，自由飲水。

1.2 飼喂日糧

對(duì)照組正常飼喂。試驗(yàn)組日糧中添加ZnSO4·7H2O、CuSO4·5H2O(均化學(xué)純)，加入微量元素后，經(jīng)計(jì)算每千克飼料中含Zn 40 mg、Cu 10 mg，鈣、磷比為1∶1.45。每日飼喂量按后備公牛膘情而定，約占體重的0.5%；青草每日飼喂量約占體重的1%。

1.3 試驗(yàn)方案

試驗(yàn)始于2011年8月1日，止于2012年2月6日，預(yù)飼期10 d，正飼期180 d，180 d后，收集8頭參試牛的精液、牛毛、血液進(jìn)行微量元素含量測(cè)定，并對(duì)兩組牛的射精量、精子密度、原精活力及冷凍精液的活力、畸形率進(jìn)行分析。

1.4 儀器設(shè)備

精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)(北京偉力新世紀(jì)科技發(fā)展有限公司)；精子密度測(cè)定儀、細(xì)管分裝機(jī)、精液冷凍儀(法國(guó)卡蘇公司)。MK-III型光纖自控密閉微波消解器(上海新科微波溶樣測(cè)試技術(shù)研究所)；WFX-120原子分光光度計(jì)及WF-4C型石墨爐(北京瑞利分析儀器公司)。

1.5 樣品

1.5.1 基礎(chǔ)日糧 在充分?jǐn)嚢杌靹蚝蟮娘暳隙焉?，在不同深度和方位，用幾何法選5點(diǎn)，用采樣錐取樣，總量1 000 g。

1.5.2 血液 早晨喂食5 h后，按常規(guī)局部剪毛、消毒，用一次性采血器在牛頸靜脈采血，每牛8 mL，用肝素鈉抗凝，置于指形離心管中。

1.5.3 精液 青年公牛禁欲7 d后進(jìn)行采精，每牛取原精液1 mL。

1.5.4 牛毛 在額頭上采取1.0 g距皮膚1～5 cm以?xún)?nèi)的毛發(fā)。剪毛前先梳理除去脫落部分及雜質(zhì)。

1.6 試劑

硼氫化鉀(KBOH4)、氫氧化鈉(NaOH)、鹽酸(HCL)、硝酸(HNO3)、過(guò)氧化氫(H2O2)均為優(yōu)級(jí)純，水為超純水。試驗(yàn)所用玻璃器皿均用鹽酸溶液浸泡過(guò)夜并經(jīng)去離子水處理。Zn、Cu、Fe、Mn和Cr元素標(biāo)準(zhǔn)貯存液以基準(zhǔn)物質(zhì)配制，臨用前稀釋成應(yīng)用液。

1.7 檢測(cè)方法

1.7.1 樣品處理 飼料、血液、精液及牛毛樣品微量元素含量測(cè)定，以高壓微波消解系統(tǒng)作前處理，石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定Zn、Cu、Fe、Mn、Cr元素的含量。

1.7.2 精子密度測(cè)定 以精子密度儀測(cè)定。

1.7.3 原精活力、冷凍精液活力、畸形率測(cè)定 用精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定。

1.8 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2000統(tǒng)計(jì)分析，t檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果和分析

2.1 基礎(chǔ)日糧中微量元素含量

表1表明，基礎(chǔ)日糧中Zn元素含量大大低于美國(guó)NRC推薦的種公牛營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)需要量(40 mg/kg)，Cu元素含量?jī)H為6.398 mg/kg，低于標(biāo)準(zhǔn)3.602 mg/kg，這一缺乏量占青年公牛營(yíng)養(yǎng)需要量的36.02%。飼料中Fe、Mn、Cr三元素的含量與種公牛營(yíng)養(yǎng)需要量很接近，能滿足種公牛生長(zhǎng)、生產(chǎn)的需要。結(jié)果表明，基礎(chǔ)日糧中Zn、Cu兩元素缺乏，而Fe、Mn、Cr三元素能滿足青年公牛的營(yíng)養(yǎng)需要。根據(jù)這一測(cè)定結(jié)果，試驗(yàn)組日糧中添加ZnSO4·7H2O、CuSO4·5H2O，使之Zn、Cu含量符合美國(guó)NRC推薦的種公牛營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)[1，2]。

表1 飼料中微量元素含量 mg/kg

2.2 微量元素含量

2.2.1 牛毛中微量元素含量 表2表明，牛毛中微量元素含量與日糧微量元素含量有關(guān)。由于對(duì)照組日糧中微量元素缺乏，因而青年公牛牛毛中Zn、Cu兩元素含量偏低，與試驗(yàn)組相比差異極顯著(P<0.01)。日糧中Fe、Mn、Cr的含量能滿足青年公牛營(yíng)養(yǎng)需要，兩組差異不顯著(P>0.05)。

2.2.2 血液中微量元素含量 血液中微量元素含量能反映日糧中微量元素的攝入量。試驗(yàn)后，試驗(yàn)組和對(duì)照組相比，Zn、Cu含量差異極顯著(P<0.01)，而Fe、Mn、Cr相比，差異不顯著(P>0.05)。

2.2.3 精液中微量元素含量 通過(guò)180 d的補(bǔ)飼，試驗(yàn)組和對(duì)照組相比，精液中Zn、Cu含量差異極顯著(P<0.01)，而Fe、Mn、Cr相比，差異不顯著(P>0.05)。

2.3 精液品質(zhì)

大量研究資料證明，微量元素對(duì)精液品質(zhì)的影響很大。微量元素的缺乏或過(guò)量直接影響到精液品質(zhì)的優(yōu)劣。由表3可見(jiàn)，試驗(yàn)組精子密度、原精活力、凍精活力顯著提高，經(jīng)檢驗(yàn)差異顯著(P<0.05)，而射精量、凍精畸形率差異不顯著(P>0.05)。

表2 微量元素含量比較 mg/kg

注：同組織中對(duì)照組和試驗(yàn)組同一含量相比，**表示差異極顯著(P<0.01)

表3 精液品質(zhì)比較

注：*P<0.05

3 討論

3.1 青年公牛一般18月齡開(kāi)采，雖達(dá)到性成熟但未達(dá)到體成熟。青年公牛生長(zhǎng)發(fā)育中對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求很大，要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值要高，成分要全。很多研究表明，硒、鋅、銅、鐵等微量元素對(duì)動(dòng)物生殖機(jī)能有重要影響[3～6]，在畜牧生產(chǎn)中應(yīng)合理添加微量元素。缺鋅對(duì)公畜精子生成、性器官的原發(fā)性和繼發(fā)性發(fā)育產(chǎn)生不利影響。動(dòng)物缺鋅早期出現(xiàn)輸精管萎縮，進(jìn)而睪丸萎縮，第二性征發(fā)育阻滯。因?yàn)槿变\最終可造成促睪丸素排放減慢，睪丸酮形成減少。在精子生成的最后階段，特別是精子成熟階段必須有大量的鋅摻入到精子及精細(xì)胞膜周?chē)慕橘|(zhì)中。

3.2 銅是動(dòng)物機(jī)體必需的一種微量元素[7]。有關(guān)銅對(duì)精子影響的報(bào)道不多，有人認(rèn)為低濃度銅離子對(duì)精子有相對(duì)的毒害。據(jù)HipirogLon等報(bào)道，對(duì)公牛補(bǔ)銅可明顯提高精子活力和降低死精子數(shù)量。

3.3 通過(guò)180 d的補(bǔ)飼，試驗(yàn)組精液品質(zhì)有了顯著變化，雖然射精量、凍精畸形率變化不明顯，但精子密度、原精活力、凍精活力有了顯著提高，經(jīng)檢驗(yàn)差異顯著(P<0.05)。

4 結(jié)論

缺鋅日糧中添加適量的Zn能明顯提高青年公牛性欲，改善精液品質(zhì)?；A(chǔ)日糧中適量銅離子含量有利于精子形成及成熟，而銅離子含量過(guò)低則導(dǎo)致生精功能不足，精液品質(zhì)差。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，營(yíng)造一個(gè)適合青年公牛生長(zhǎng)、生產(chǎn)的外部環(huán)境，能明顯提高精液品質(zhì)。

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