石秀芳，黃 輝，雷 婷，劉雪榮，潘軍峰

慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染引起，廣泛威脅人類健康，影響人類生活質(zhì)量的常見感染病。乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(HBV-DNA)含量是反映乙型肝炎病毒感染和復(fù)制程度的量化指標(biāo)。甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein，AFP)是目前公認(rèn)的診斷PHC的最好標(biāo)志物，但由于AFP具有異質(zhì)性的原因，靈敏度較低[1]。α-L-巖藻糖苷酶(AFU) 是1980年法國(guó)學(xué)者Deugnier從PHC患者血清發(fā)現(xiàn)異常升高診斷標(biāo)志物，它是一種溶酶體酸性水解酶，廣泛存在于人體各種組織細(xì)胞溶酶體和體液中，AFU參與巖藻糖類物質(zhì)的分解代謝。楊曉虹[2]等研究顯示AFP與AFU組合檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌(PHC)診斷的較好敏感性和特異性,已受到臨床的廣泛重視。AFU的酶活性與慢性乙型肝炎的肝臟損害程度亦有關(guān)[3]，但在肝臟非癌性損傷中的報(bào)道并不多,本文就血清病毒含量與甲胎蛋白( AFP)和 a-L-巖藻糖苷酶( AFU)，在慢性乙型肝炎患者病程監(jiān)測(cè)中的變化的關(guān)系作報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1材料來(lái)源 入選病例均來(lái)自2013年1月-7月亳州市人民醫(yī)院感染內(nèi)科的住院患者，診斷均符合2000年9月病毒性肝炎會(huì)議聯(lián)合修訂的《病毒性肝炎防治方案》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，排除其他類型的病毒性肝炎和其他原因引起的肝損害以及心肺肝腎功能不全的患者，且沒有使用過免疫調(diào)節(jié)劑和抗病毒治療的慢性乙型肝炎患者。共116例患者，男89例，女27例，年齡18～73歲。入選患者根據(jù)血清HBV-DNA檢查結(jié)果的病毒量分為以下3組：HBV-DNA 1×103copies/ml以下的患者為陰性組(46例)；HBV-DNA 1×104～1×105copies/ml患者為低病毒量組(27例)；HBV-DNA 1×106～1×108copies/ml的患者為高病毒量組(43例)。另選34名HBsAg陰性的健康體檢者作為陰性對(duì)照。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1HBV-DNA定量檢測(cè) 采用美國(guó)ABI 7300PCR檢測(cè)儀，乙型肝炎病毒核酸擴(kuò)增熒光定量檢測(cè)試劑盒由廣州達(dá)安基因工程股份有限公司提供，嚴(yán)格按說明書操作。每次試驗(yàn)設(shè)立4種HBV-DNA標(biāo)準(zhǔn)品，濃度分別為每毫升107、106、105、104copies，并設(shè)空白管、陰性、臨界陽(yáng)性、強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照，檢測(cè)靈敏度為100copies/ml，大于1×103copies/ml為陽(yáng)性。

1.2.2AFU檢測(cè) 采用貝克曼AU5821型全自動(dòng)生化分析儀，檢測(cè)試劑為北京利德曼生物科技有限責(zé)任公司提供的MG-CNPF法試劑盒。以AFU>40 U/L為陽(yáng)性。

1.2.3AFP檢測(cè) 采用羅式Cobase 411型全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及原裝配套試劑。試驗(yàn)過程嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作。以AFP>10 ng/L為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并進(jìn)行HBV-DNA不同濃度與AFU、AFP的陽(yáng)性情況分析。

2 結(jié)果

2.1不同病毒量組的AFU、AFP水平 與正常對(duì)照組比較，HBV-DNA陰性組、低病毒量組和高病毒量組與正常對(duì)照組比較其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果見表1。

表1 不同病毒量組的AFU、AFP水平

2.2不同病毒量AFU和AFP陽(yáng)性情況 陰性組、低病毒量組和高病毒量組與正常對(duì)照組比較，AFU與AFP的陽(yáng)性比例也隨著病毒復(fù)制量的增加而升高。結(jié)果見表2。

表2 不同病毒量AFU和AFP陽(yáng)性情況

3 討論

HBV-DNA水平與慢性乙型肝炎臨床分型國(guó)內(nèi)外都存在著爭(zhēng)議，劉威等[4]研究發(fā)現(xiàn)：從慢性乙型肝炎患者的肝穿組織中檢測(cè)HBV-DNA，肝組織炎癥活動(dòng)度與肝組織內(nèi)HBV-DNA載量存在明顯正相關(guān)，炎癥輕、中、重度之間的差異具有顯著性。而張?jiān)鰳s[5]也有研究證實(shí)：HBV-DNA水平與慢性乙型肝炎臨床分型相關(guān)性不顯著，HBsAg攜帶者血清 HBV-DNA水平與慢性乙型肝炎患者無(wú)顯著差別，提示這類患者病毒復(fù)制活躍，也應(yīng)采取積極的抗病毒治療，否則由于隱匿性肝細(xì)胞損傷的不斷積累，不經(jīng)過慢性肝炎階段，可直接向肝硬化或肝癌發(fā)展。AFP的臨床價(jià)值已受到廣泛關(guān)注，但并非所有肝病患者的肝細(xì)胞都分泌，包括肝癌仍有30%～40%的患者，尤其是小細(xì)胞肝癌患者，AFP呈陰性或水平很低[6-7]。張明珠[8]等研究顯示49%的乙型肝炎病人血清 AFU 活性均有不同程度的升高, 認(rèn)為血清 AFU活性測(cè)定，有助于乙肝病情發(fā)展的預(yù)測(cè)。本文研究中的表 1 也顯示，隨著HBV-DNA水平的升高，AFU和 AFP在血液中的水平也升高，并且不同病毒量組的AFU水平與正常對(duì)照組比較，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均小于0.05，分別為0.003、0.001、0.000)；而AFP的P值，除陰性組的P=0.05外，低病毒量組和高病毒量組P值分別為0.033、0.008，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

乙型肝炎病毒感染人體后，活躍的病毒復(fù)制導(dǎo)肝致細(xì)胞出現(xiàn)變性、壞死、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等一系列病理改變，是啟動(dòng)或激發(fā)肝組織炎癥反應(yīng)的重要因素[9]。金宏慧[10]等臨床研究證實(shí)慢性乙型肝炎患者的肝損傷程度與HBV-DNA水平和AFU 活性密切相關(guān)，聯(lián)合檢測(cè)可作為肝組織炎癥程度的指標(biāo)。本研究也顯示：高病毒量組，其AFU的陽(yáng)性率明顯高于低病毒量組和陰性組。血清AFU升高的機(jī)制尚不明確，可能有以下幾種原因：(1)肝細(xì)胞壞死使溶酶體大量釋放入血；(2)發(fā)生炎性改變的肝細(xì)胞合成糖苷酶的功能亢進(jìn)；(3)發(fā)生炎性改變的肝細(xì)胞可能分泌某種抑制因子，抑制了對(duì)其的清除能力或釋放某些刺激因子，促進(jìn)本身的合成增加；(4)變性壞死的肝細(xì)胞可使攝取和清除糖苷酶的能力減低。本研究結(jié)果表2也顯示：隨著HBV-DNA病毒復(fù)制量的升高，AFP與AFU的陽(yáng)性比例也隨之上升，并且陰性組和高病毒組AFU水平上升的比例均高于AFP，但是低病毒組上升的比例卻低于AFP。這與相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道不太符合，筆者推斷可能為樣本量局限所致，也提示我們需要繼續(xù)這方面的深層研究。

眾所周知，乙型肝炎病毒感染可引起各種急、慢性病毒性肝炎及肝硬化等疾病，并與肝癌的發(fā)生有密切的關(guān)系。綜合本文的分析認(rèn)為：乙型肝炎病毒感染者尤其對(duì)于慢性乙型肝炎患者，在定期進(jìn)行病毒含量檢測(cè)評(píng)估病毒的復(fù)制狀況的同時(shí)，進(jìn)行AFU和AFP水平組合檢測(cè)發(fā)現(xiàn)肝組織的損害程度及演變過程，是必要的。

【 參 考 文 獻(xiàn) 】

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