黃明泉

【摘要】目的：探討柴胡中有效成分柴胡總皂苷和皂苷d的提取及含量測定方法，并對樣品中成分進行含量測定。方法：以柴胡總皂苷與柴胡皂苷d為指標，分別采用紫外-可見分光光度法、HPLC法測定樣品中柴胡總皂苷及皂苷d的含量。結(jié)果：經(jīng)過測定，結(jié)果顯示樣品柴胡總皂苷含量均在65%以上，測定波長為536nm；皂苷d含量均在11%以上，最大吸收波長為204nm。結(jié)論：本實驗所建立的提取及含量測定方法，操作簡便，精密度良好，回收率合格，測定結(jié)果準確，可較好地用于柴胡皂苷的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】柴胡；皂苷；提??；含量測定

柴胡是臨床常用中藥，屬和解劑，臨床主要用于少陽證，即寒熱往來，胸悶口苦等，具清熱解表，和解少陽之功，有南北柴胡之分，前者為狹葉柴胡的干燥根，后者是傘形科植物柴胡的干燥根[1]。

有實驗研究證明[2]，柴胡根中的有效成分為柴胡皂苷，以及含有揮發(fā)油、植物甾醇等，相關(guān)的實驗證實柴胡皂苷具有解熱、鎮(zhèn)痛、消炎等作用。因此，提高柴胡制劑中柴胡有效成分的含量對提高臨床療效具有重大的指導意義。近年來，隨著科技的進步，多數(shù)實驗采用各種新方法進行柴胡皂苷的提取及測定，有文獻報道柴胡皂苷的主要組成為皂苷a、d、b1、b2等[3]，其中，前兩者具有明顯抗炎作用和降低血清膽固醇及甘油三酯的作用。故本文主要以柴胡總皂苷與柴胡皂苷d為指標，進行柴胡皂苷的提取研究，并采用紫外-可見分光光度法及HPLC法對其含量進行測定，為提高柴胡制劑的有效成分含量及提高臨床療效打下科研基礎(chǔ)?，F(xiàn)將研究情況報告如下。

實驗材料

試藥：柴胡：購于安徽省亳州市藥材公司，經(jīng)相關(guān)專家鑒定為傘形科植物柴胡的干燥根（北柴胡）；柴胡皂苷d對照品：購于中國食品藥品鑒定研究院；屈臣氏純凈水；乙腈（色譜純，F(xiàn)isher公司）；其他試劑為分析純（甲醇、乙醇、氨水）。柴胡總皂苷的含量測定：①檢測波長：精密吸取200μL上述柴胡皂苷d對照品溶液置于小試管中，加入100μL的對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液（0.1%），水?。?0℃）反應(yīng)10min，待自然冷卻后，加入4.0mL磷酸，繼續(xù)反應(yīng)30min。根據(jù)“2005年版藥典1部附錄VA”規(guī)定在200～800nm范圍內(nèi)進行掃描。根據(jù)最大吸收，選擇檢測波長為536nm。②供試品溶液的制備：同上。③對照品溶液制備：精密稱取適量柴胡皂苷d對照品，用甲醇配制成濃度為2.07mg/ml的對照品溶液。④標準曲線制備：取上述柴胡皂苷d對照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10ml置于10mL量瓶中，甲醇稀釋并定容，搖勻備用。同①，各取上述不同濃度溶液1ml進行反應(yīng)并測定（536nm），以吸收值A(chǔ)為縱坐標，柴胡皂苷d的濃度C為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程為：A=6×10-4C–0.072，r=0.9994。結(jié)果表明柴胡總皂苷在206～2060mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。⑤精密度實驗：分別取5份對照品溶液（400μl）、供試品溶液（1ml）置于量瓶中（10ml），甲醇稀釋并定容，測定其吸光度。其結(jié)果對照品及供試品的RSD分別為1.52%、1.80%，表明精密度良好。⑥穩(wěn)定性及重復性測定：測定樣品同⑤，于不同時間點（10、30、40、60、90min）測定其吸收度，計算其RSD，結(jié)果為4.97%，故供試品溶液基本穩(wěn)定。另取供試品溶液，平行測定5次。結(jié)果顯示柴胡皂苷的平均含量為68.30mg/g，RSD為2.83%，表明可重復性良好。⑦回收率實驗：在已知含量的樣品溶液中加入定量的柴胡皂苷d對照品溶液，按上述方法進行測定，結(jié)果顯示平均回收率為99.2%，RSD=2.06%，表明回收率符合要求。⑧樣品測定：取已制得的三批不同柴胡皂苷提取物并配制成供試液，進行測定。最后計算三批樣品中的柴胡總皂苷的含量，結(jié)果所示結(jié)論

雖然柴胡皂苷a和d均是柴胡皂苷的主要組成成分，兩者均有明顯抗炎作用和降低血清膽固醇及甘油三酯的作用。但有文獻報道柴胡中皂苷d的含量遠遠高于其他皂苷的含量[4]，故在實驗研究時選擇皂苷d而不是皂苷a來作為柴胡總皂苷的含量測定指標的參照。經(jīng)實驗結(jié)果證明，其皂苷d含量在柴胡總皂苷中含量較高，故認為選取正確。

根據(jù)實驗結(jié)果，皂苷d含量均值均在11%上，故假設(shè)認定柴胡中柴胡皂苷d的含量應(yīng)達到10%以上才為合格柴胡，總皂苷含量均值達65%以上，故假定柴胡總皂苷含量應(yīng)達到65%以上為達標。

本實驗所建立的柴胡皂苷提取及含量測定方法，操作簡便，精密度良好，回收率合格，測定結(jié)果準確，可較好地用于柴胡皂苷的質(zhì)量控制。

參考文獻

1中國國家藥典委員會.中國藥典Ⅰ部[M].北京：化學工業(yè)出版社，2005：565.

2肖功勝，楊云，劉富崗，等.柴胡皂苷提取和含量測定方法研究[J].中成藥，2009，31（4）：595.

3楊志業(yè)，劉書芬，晁志，等.HPLC測定新疆柴胡屬4種植物中柴胡皂苷a、c、d的含量[J].中國中藥雜志，2008，33（4）：460.

4MAO Ren-gang，LIN Dong-hao，WANG Zhi-hua，et al.Quantitative analysis of Saikosaponin d in different species of Radix Bupleuri by HPLC[J].ChinTradition Herb Drugs，2002，33（5）：412.

【摘要】目的：探討柴胡中有效成分柴胡總皂苷和皂苷d的提取及含量測定方法，并對樣品中成分進行含量測定。方法：以柴胡總皂苷與柴胡皂苷d為指標，分別采用紫外-可見分光光度法、HPLC法測定樣品中柴胡總皂苷及皂苷d的含量。結(jié)果：經(jīng)過測定，結(jié)果顯示樣品柴胡總皂苷含量均在65%以上，測定波長為536nm；皂苷d含量均在11%以上，最大吸收波長為204nm。結(jié)論：本實驗所建立的提取及含量測定方法，操作簡便，精密度良好，回收率合格，測定結(jié)果準確，可較好地用于柴胡皂苷的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】柴胡；皂苷；提取；含量測定

柴胡是臨床常用中藥，屬和解劑，臨床主要用于少陽證，即寒熱往來，胸悶口苦等，具清熱解表，和解少陽之功，有南北柴胡之分，前者為狹葉柴胡的干燥根，后者是傘形科植物柴胡的干燥根[1]。

有實驗研究證明[2]，柴胡根中的有效成分為柴胡皂苷，以及含有揮發(fā)油、植物甾醇等，相關(guān)的實驗證實柴胡皂苷具有解熱、鎮(zhèn)痛、消炎等作用。因此，提高柴胡制劑中柴胡有效成分的含量對提高臨床療效具有重大的指導意義。近年來，隨著科技的進步，多數(shù)實驗采用各種新方法進行柴胡皂苷的提取及測定，有文獻報道柴胡皂苷的主要組成為皂苷a、d、b1、b2等[3]，其中，前兩者具有明顯抗炎作用和降低血清膽固醇及甘油三酯的作用。故本文主要以柴胡總皂苷與柴胡皂苷d為指標，進行柴胡皂苷的提取研究，并采用紫外-可見分光光度法及HPLC法對其含量進行測定，為提高柴胡制劑的有效成分含量及提高臨床療效打下科研基礎(chǔ)?，F(xiàn)將研究情況報告如下。

實驗材料

試藥：柴胡：購于安徽省亳州市藥材公司，經(jīng)相關(guān)專家鑒定為傘形科植物柴胡的干燥根（北柴胡）；柴胡皂苷d對照品：購于中國食品藥品鑒定研究院；屈臣氏純凈水；乙腈（色譜純，F(xiàn)isher公司）；其他試劑為分析純（甲醇、乙醇、氨水）。柴胡總皂苷的含量測定：①檢測波長：精密吸取200μL上述柴胡皂苷d對照品溶液置于小試管中，加入100μL的對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液（0.1%），水浴（70℃）反應(yīng)10min，待自然冷卻后，加入4.0mL磷酸，繼續(xù)反應(yīng)30min。根據(jù)“2005年版藥典1部附錄VA”規(guī)定在200～800nm范圍內(nèi)進行掃描。根據(jù)最大吸收，選擇檢測波長為536nm。②供試品溶液的制備：同上。③對照品溶液制備：精密稱取適量柴胡皂苷d對照品，用甲醇配制成濃度為2.07mg/ml的對照品溶液。④標準曲線制備：取上述柴胡皂苷d對照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10ml置于10mL量瓶中，甲醇稀釋并定容，搖勻備用。同①，各取上述不同濃度溶液1ml進行反應(yīng)并測定（536nm），以吸收值A(chǔ)為縱坐標，柴胡皂苷d的濃度C為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程為：A=6×10-4C–0.072，r=0.9994。結(jié)果表明柴胡總皂苷在206～2060mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。⑤精密度實驗：分別取5份對照品溶液（400μl）、供試品溶液（1ml）置于量瓶中（10ml），甲醇稀釋并定容，測定其吸光度。其結(jié)果對照品及供試品的RSD分別為1.52%、1.80%，表明精密度良好。⑥穩(wěn)定性及重復性測定：測定樣品同⑤，于不同時間點（10、30、40、60、90min）測定其吸收度，計算其RSD，結(jié)果為4.97%，故供試品溶液基本穩(wěn)定。另取供試品溶液，平行測定5次。結(jié)果顯示柴胡皂苷的平均含量為68.30mg/g，RSD為2.83%，表明可重復性良好。⑦回收率實驗：在已知含量的樣品溶液中加入定量的柴胡皂苷d對照品溶液，按上述方法進行測定，結(jié)果顯示平均回收率為99.2%，RSD=2.06%，表明回收率符合要求。⑧樣品測定：取已制得的三批不同柴胡皂苷提取物并配制成供試液，進行測定。最后計算三批樣品中的柴胡總皂苷的含量，結(jié)果所示結(jié)論

雖然柴胡皂苷a和d均是柴胡皂苷的主要組成成分，兩者均有明顯抗炎作用和降低血清膽固醇及甘油三酯的作用。但有文獻報道柴胡中皂苷d的含量遠遠高于其他皂苷的含量[4]，故在實驗研究時選擇皂苷d而不是皂苷a來作為柴胡總皂苷的含量測定指標的參照。經(jīng)實驗結(jié)果證明，其皂苷d含量在柴胡總皂苷中含量較高，故認為選取正確。

根據(jù)實驗結(jié)果，皂苷d含量均值均在11%上，故假設(shè)認定柴胡中柴胡皂苷d的含量應(yīng)達到10%以上才為合格柴胡，總皂苷含量均值達65%以上，故假定柴胡總皂苷含量應(yīng)達到65%以上為達標。

本實驗所建立的柴胡皂苷提取及含量測定方法，操作簡便，精密度良好，回收率合格，測定結(jié)果準確，可較好地用于柴胡皂苷的質(zhì)量控制。

參考文獻

1中國國家藥典委員會.中國藥典Ⅰ部[M].北京：化學工業(yè)出版社，2005：565.

2肖功勝，楊云，劉富崗，等.柴胡皂苷提取和含量測定方法研究[J].中成藥，2009，31（4）：595.

3楊志業(yè)，劉書芬，晁志，等.HPLC測定新疆柴胡屬4種植物中柴胡皂苷a、c、d的含量[J].中國中藥雜志，2008，33（4）：460.

4MAO Ren-gang，LIN Dong-hao，WANG Zhi-hua，et al.Quantitative analysis of Saikosaponin d in different species of Radix Bupleuri by HPLC[J].ChinTradition Herb Drugs，2002，33（5）：412.

【摘要】目的：探討柴胡中有效成分柴胡總皂苷和皂苷d的提取及含量測定方法，并對樣品中成分進行含量測定。方法：以柴胡總皂苷與柴胡皂苷d為指標，分別采用紫外-可見分光光度法、HPLC法測定樣品中柴胡總皂苷及皂苷d的含量。結(jié)果：經(jīng)過測定，結(jié)果顯示樣品柴胡總皂苷含量均在65%以上，測定波長為536nm；皂苷d含量均在11%以上，最大吸收波長為204nm。結(jié)論：本實驗所建立的提取及含量測定方法，操作簡便，精密度良好，回收率合格，測定結(jié)果準確，可較好地用于柴胡皂苷的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】柴胡；皂苷；提?。缓繙y定

柴胡是臨床常用中藥，屬和解劑，臨床主要用于少陽證，即寒熱往來，胸悶口苦等，具清熱解表，和解少陽之功，有南北柴胡之分，前者為狹葉柴胡的干燥根，后者是傘形科植物柴胡的干燥根[1]。

有實驗研究證明[2]，柴胡根中的有效成分為柴胡皂苷，以及含有揮發(fā)油、植物甾醇等，相關(guān)的實驗證實柴胡皂苷具有解熱、鎮(zhèn)痛、消炎等作用。因此，提高柴胡制劑中柴胡有效成分的含量對提高臨床療效具有重大的指導意義。近年來，隨著科技的進步，多數(shù)實驗采用各種新方法進行柴胡皂苷的提取及測定，有文獻報道柴胡皂苷的主要組成為皂苷a、d、b1、b2等[3]，其中，前兩者具有明顯抗炎作用和降低血清膽固醇及甘油三酯的作用。故本文主要以柴胡總皂苷與柴胡皂苷d為指標，進行柴胡皂苷的提取研究，并采用紫外-可見分光光度法及HPLC法對其含量進行測定，為提高柴胡制劑的有效成分含量及提高臨床療效打下科研基礎(chǔ)?，F(xiàn)將研究情況報告如下。

實驗材料

試藥：柴胡：購于安徽省亳州市藥材公司，經(jīng)相關(guān)專家鑒定為傘形科植物柴胡的干燥根（北柴胡）；柴胡皂苷d對照品：購于中國食品藥品鑒定研究院；屈臣氏純凈水；乙腈（色譜純，F(xiàn)isher公司）；其他試劑為分析純（甲醇、乙醇、氨水）。柴胡總皂苷的含量測定：①檢測波長：精密吸取200μL上述柴胡皂苷d對照品溶液置于小試管中，加入100μL的對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液（0.1%），水?。?0℃）反應(yīng)10min，待自然冷卻后，加入4.0mL磷酸，繼續(xù)反應(yīng)30min。根據(jù)“2005年版藥典1部附錄VA”規(guī)定在200～800nm范圍內(nèi)進行掃描。根據(jù)最大吸收，選擇檢測波長為536nm。②供試品溶液的制備：同上。③對照品溶液制備：精密稱取適量柴胡皂苷d對照品，用甲醇配制成濃度為2.07mg/ml的對照品溶液。④標準曲線制備：取上述柴胡皂苷d對照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10ml置于10mL量瓶中，甲醇稀釋并定容，搖勻備用。同①，各取上述不同濃度溶液1ml進行反應(yīng)并測定（536nm），以吸收值A(chǔ)為縱坐標，柴胡皂苷d的濃度C為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程為：A=6×10-4C–0.072，r=0.9994。結(jié)果表明柴胡總皂苷在206～2060mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。⑤精密度實驗：分別取5份對照品溶液（400μl）、供試品溶液（1ml）置于量瓶中（10ml），甲醇稀釋并定容，測定其吸光度。其結(jié)果對照品及供試品的RSD分別為1.52%、1.80%，表明精密度良好。⑥穩(wěn)定性及重復性測定：測定樣品同⑤，于不同時間點（10、30、40、60、90min）測定其吸收度，計算其RSD，結(jié)果為4.97%，故供試品溶液基本穩(wěn)定。另取供試品溶液，平行測定5次。結(jié)果顯示柴胡皂苷的平均含量為68.30mg/g，RSD為2.83%，表明可重復性良好。⑦回收率實驗：在已知含量的樣品溶液中加入定量的柴胡皂苷d對照品溶液，按上述方法進行測定，結(jié)果顯示平均回收率為99.2%，RSD=2.06%，表明回收率符合要求。⑧樣品測定：取已制得的三批不同柴胡皂苷提取物并配制成供試液，進行測定。最后計算三批樣品中的柴胡總皂苷的含量，結(jié)果所示結(jié)論

雖然柴胡皂苷a和d均是柴胡皂苷的主要組成成分，兩者均有明顯抗炎作用和降低血清膽固醇及甘油三酯的作用。但有文獻報道柴胡中皂苷d的含量遠遠高于其他皂苷的含量[4]，故在實驗研究時選擇皂苷d而不是皂苷a來作為柴胡總皂苷的含量測定指標的參照。經(jīng)實驗結(jié)果證明，其皂苷d含量在柴胡總皂苷中含量較高，故認為選取正確。

根據(jù)實驗結(jié)果，皂苷d含量均值均在11%上，故假設(shè)認定柴胡中柴胡皂苷d的含量應(yīng)達到10%以上才為合格柴胡，總皂苷含量均值達65%以上，故假定柴胡總皂苷含量應(yīng)達到65%以上為達標。

本實驗所建立的柴胡皂苷提取及含量測定方法，操作簡便，精密度良好，回收率合格，測定結(jié)果準確，可較好地用于柴胡皂苷的質(zhì)量控制。

參考文獻

1中國國家藥典委員會.中國藥典Ⅰ部[M].北京：化學工業(yè)出版社，2005：565.

2肖功勝，楊云，劉富崗，等.柴胡皂苷提取和含量測定方法研究[J].中成藥，2009，31（4）：595.

3楊志業(yè)，劉書芬，晁志，等.HPLC測定新疆柴胡屬4種植物中柴胡皂苷a、c、d的含量[J].中國中藥雜志，2008，33（4）：460.

4MAO Ren-gang，LIN Dong-hao，WANG Zhi-hua，et al.Quantitative analysis of Saikosaponin d in different species of Radix Bupleuri by HPLC[J].ChinTradition Herb Drugs，2002，33（5）：412.