孫新堂，王傳春，王成森，郭洪梅

（山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東濰坊261061）

仔豬水腫病是仔豬斷奶前后發(fā)生的一種急性、散發(fā)性、致死性腸毒素血癥，其病因為致病性大腸桿菌所產(chǎn)生的毒素。本病的臨床特征為頭面部、下頜部及前肢皮下等部位水腫[1]，并有神經(jīng)癥狀，發(fā)病率為30%～50%之間，死亡率可達到80%，對養(yǎng)豬業(yè)危害較大[3]。本試驗以小鼠為實驗動物，采用大腸桿菌107/86菌株復(fù)制病理模型，按照中獸醫(yī)理論選藥組方，觀察療效，最終確定五皮飲可以有效治療本病。

1 材料與方法

1.1 菌株及注射劑量 用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)大腸桿菌107/86菌株（O139︰K12︰H1），大腸桿菌原菌液的濃度為3×108CFU/ml，注射劑量為0.3ml[2]。

1.2 中藥及其制劑的制備 根據(jù)本病的病機，選則下列中藥：桑白皮、生姜皮、陳皮、大腹皮、茯苓皮、藿香、蒼術(shù)、黨參、甘草、焦麥芽、焦神曲、白術(shù)及桂枝，按照君、臣、佐、使的原則從不同的側(cè)重點組成如下方劑。中藥方（A）：藿香、蒼術(shù)、黨參、甘草；中藥方（B）：焦麥芽、焦神曲、白術(shù)、桂枝；中藥方五皮飲（C）：桑白皮、陳皮、生姜皮、茯苓皮、大腹皮。

干燥上述藥物并按組方中的比例準確稱重置于砂鍋中，加3～5倍體積的蒸餾水浸泡20min，武火煮沸后用文火熬制30min，共煎3次，合并藥液并用紗布過濾。為確定用量，將藥液蒸發(fā)濃縮

1.3 試驗分組及給藥方案 選取昆明系清潔級小鼠100只，公母各半，體重為20～30g，隨機分為A～E 5組，每組20只。復(fù)制模型成功后分別開始給藥，劑量均為0.2m l/10g體重，每日2次，治療3d，觀察10d。D組為空白對照組，不攻毒，不給藥，腹腔注射肉湯培養(yǎng)液，灌服同等劑量生理鹽水。E組為陽性對照組，注射細菌但不給藥治療，攻毒后灌服同等劑量的生理鹽水。

1.4 療效判斷標準 本試驗各藥物組的治療效果以死亡率和存活率來表示。

死亡率：凡死亡前出現(xiàn)眼瞼水腫、后肢麻痹等仔豬水腫病的典型癥狀，死亡后剖檢可見到胃壁、腸系膜水腫等示癥病變，確定為感染死亡，據(jù)死亡數(shù)算出各組的死亡率。

存活率：試驗結(jié)束時，各組存活動物占該組試驗動物的百分數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 治療結(jié)果 接種107/86菌液后4～8小時，小鼠陸續(xù)出現(xiàn)發(fā)病，表現(xiàn)為萎靡不振、眼瞼高度水腫、飲食欲降低、被毛逆立、心跳加速、呼吸急迫等。該病的典型癥狀為神經(jīng)癥狀，如后肢麻痹、偏癱、水腫（眼瞼、前額等部位）。給藥后治療的第1、2d，各試驗組發(fā)病小鼠癥狀無明顯改善；第3d，C組小鼠療效優(yōu)于其余中藥組方組，表現(xiàn)為C組小鼠死亡數(shù)少于A、B組，且C組小鼠健康狀態(tài)要好于A、B組；第4d開始C組小鼠開始飲食增加，無死亡現(xiàn)象，而其余中藥組則仍有死亡小鼠；E組小鼠由于不用藥治療，到第3d全部死亡。由表1可知，組方C（五皮飲組）的顯效率明顯高于其余各中藥組方。

表1 各試驗組小鼠存活情況

2.2 剖檢病變 剖檢病變主要表現(xiàn)為胃壁增厚、水腫、并有散在出血點（圖1），腸系膜腫脹，腸內(nèi)充滿淡黃色黏稠液體，直腸有大量出血點，肝、脾、肺、腎等實質(zhì)臟器有散在性出血點，大腦腦膜充血。

2.3 顯微病變 取小鼠病變組織制作病理切片，光學(xué)顯微鏡下可觀察到小動脈和微動脈炎病變，小動脈中膜核濃縮和核破裂，平滑肌崩解，壞死。病變的血管壁上由于有纖維素樣物質(zhì)沉積而變厚，管腔變窄，血管壁周圍充滿炎性細胞（圖2），甚至形成血管套。腦干部可見神經(jīng)細胞變性及神經(jīng)纖維排列疏松，膠質(zhì)細胞和巨噬細胞浸潤，有時伴有微動脈炎。掃描電鏡觀察，小腸絨毛壞死脫落（圖3），上皮細胞壞死；利用透射電鏡觀察亞顯微結(jié)構(gòu)病變，微血管內(nèi)皮細胞及其線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張、脫顆粒，細胞核膜廣泛性增殖，有偽足伸出，細胞核固縮，嚴重者，核崩解（圖4）。

3 討論

圖1 胃壁增厚、水腫、出血

圖2 胃壁固有層纖維變性H.E × 400 S

圖3 小腸絨毛壞死EM × 300

圖4 線粒體腫脹TEM × 12 000

近年來，仔豬水腫病以其高致死率和高飼料消耗率而引起眾多研究者的重視。研究表明，F(xiàn)18ab菌毛和志賀樣毒素Ⅱ型變異體（SLT-Ⅱe）為引起仔豬水腫病的致病因子[8,9]。本病的發(fā)病機理為菌毛黏附于小腸絨毛上皮細胞后菌體定居、增殖并產(chǎn)生SLT-Ⅱe，豬只吸收毒素后引起廣泛性血管內(nèi)皮細胞損傷，導(dǎo)致血管的通透性增加，血液中的液體成分滲入到組織中，從而引起頭部、眼瞼、前肢等部位的皮下水腫和神經(jīng)癥狀[10]。剖檢可見患病動物的胃壁和腸系膜膠凍樣水腫，胸腹腔大量積液；顯微鏡下觀察，胃水腫，黏膜下層充滿大量漿液和散在的炎性細胞，肌層與黏膜層分離；各組織器官的小動脈和微動脈充血，周圍有炎性細胞浸潤[3]。

從治療效果看，方劑A、B、C治療后小鼠的存活率分別為40%、35%和70%，C組（五皮飲）的存活率顯著高于A、B兩組（P<0.05），證明五皮飲對人工感染引起的小鼠仔豬水腫病有顯著的療效。中獸醫(yī)認為，仔豬水腫病主要由脾陽虛衰引起的水濕內(nèi)停，泛濫皮膚所致，治宜健脾、行氣、滲濕利水?？v觀試驗中所用的方劑，A方由藿香、蒼術(shù)、黨參、甘草組成，以益氣健脾為主，滲濕利水作用不足，故其治療效果較差；B方由焦麥芽、焦神曲、蒼術(shù)、澤瀉、白術(shù)、桂枝組成，以消積導(dǎo)滯、滲濕利水為主，但行氣作用不足，故其效果也遜于C組；C方為經(jīng)典名方五皮飲，藥物組成為茯苓皮、桑白皮、陳皮、大腹皮和生姜皮，其中茯苓皮可滲濕利水、健脾、寧心安神，陳皮理氣和中、止咳化痰，二藥合用行氣化濕醒脾共為主藥；桑白皮宣降肺氣，疏通水道為輔藥，主治面目浮腫；生姜皮可以辛散水濕，大腹皮乃檳榔的干燥果皮，下氣利水，具有很強的消腫和導(dǎo)水下行作用。諸藥相合，健脾、理氣、行水，共奏健脾化濕、利水消腫之功[9～11]。其功效正于本病的治療原則相符，故在本試驗中取得了良好地治療效果。

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