李曉楠+楊紹斌+
摘要:為研究大型真菌和植物提取物的殺蟲效果,篩選了12種真菌和17種植物,選定橙黃鵝膏菌[Amanita citrina (Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray]、艾蒿(Artemisia argyi)和橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物測定其對榆紫葉甲(Ambrostoma quadriimpressum Motschlsky)的殺蟲效果。急性毒性試驗結果表明,橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和復合提取物對榆紫葉甲均有毒殺作用,橙黃鵝膏菌提取物的12、24、48、72 h半致死濃度(LC50)分別是17.889、16.521、14.688、13.588 mg/mL;艾蒿提取物的12、24、48、72 h LC50分別是3.555、2.764、1.784、1.436 mg/mL;橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物的12、24、48、72 h LC50分別是16.317、15.193、14.028、13.503 mg/mL;橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物無拮抗作用,且12、24 h呈增效作用;短時間大劑量使用殺蟲效果更好。
關鍵詞:橙黃鵝膏菌[Amanita citrina (Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray];艾蒿(Artemisia argyi);榆紫葉甲(Ambrostoma quadriimpressum Motschlsky);急性毒性;半致死濃度;復合提取物
中圖分類號:S763.38;S433.5文獻標識碼:A文章編號:0439-8114(2014)08-1815-04
Toxic Insecticidal Effects ofComposite Biological Extract on
Ambrostoma quadriimpressum Motschlsky
LI Xiao-nan,YANG Shao-bin
(College of Life Science and Engineering/Key Lab of Urban Pests Control and Ecological Security in Shenyang province,Shenyang University,Shenyang 110044,China)
Abstract: In order to study toxic insecticidal effects of the extracts of several large fungi and plant, 12 fungi and 17 plants were selected. The extract of Amanita citrina(Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray and the extract of Artemisia argyi and the mixed extract of Amanita citrina (Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray and Artemisia argyi was used to do the acute toxicity test on Ambrostoma quadriimpressum Motschlsky. The results showed that the extract of Amanita citrina (Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray and Artemisia argyi and the mixed extract of Amanita citrina(Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray and Artemisia argyi had insecticidal effects. For the acute toxicity test on Amanita citrine(Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray, the LC50 on 12, 24, 48 and 72 h was 17.889, 16.521, 14.688 and 13.588 mg/mL. For the acute toxicity test on Artemisia argyi, the LC50 on 12, 24, 48 and 72 h was 3.555, 2.764, 1.784 and 1.436 mg/mL. For the acute toxicity test on the mixed extract of Amanita citrina (Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray and Artemisia argyi,the LC50 on 12,24,48 and 72 h was 16.317 15.193, 14.028l and 13.503mg/mL. It had strong synergism of insecticidal effect after mixed the extract of Amanita citrina (Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray and extract of Artemisia argyi in 12 and 24 h with no antagonism. Meanwhile it had better insecticidal effect when using the mixture of it in a short period of time.
Key words: Amanita citrina(Schaeff.) Pers. ex S. F. Gray;Artemisia argyi;Ambrostoma quadriimpressum Motschlsky;acute toxicity test; LC50
榆紫葉甲(Ambrostoma quadriimpressum Motschlsky)又名榆紫金花蟲,是鞘翅目(Coleoptera) 葉甲總科(Chrysomeloidea)昆蟲,主要分布于中國的遼寧、吉林、黑龍江、內蒙古、河北、貴州和俄羅斯的西伯利亞等地,是一種食葉害蟲,主要危害的黃榆(Ulmus macrocarpa)、家榆(U. pumila)、春榆(U. davidiana)等榆科植物[1]。早春時節(jié),榆紫葉甲開始啃食榆科植物,其密度大時,常使榆科植物在展葉期不見其葉,呈現(xiàn)出干枯狀[2]。榆紫葉甲連年危害,采食榆科植物的芽苞和葉片,食性較為單一。榆科植物作為城市中重要的綠化景觀樹種,在整個生長季固氮量、釋氧量很高,對市區(qū)內生態(tài)環(huán)境的改善起到了巨大的作用。近年來榆紫葉甲危害日趨嚴重,引起了社會的廣泛關注。
目前榆紫葉甲的防治方法主要有物理防治、化學防治和生物防治3種。物理防治法常用人工捕捉和纏結塑料布防治,耗費的人力物力大,效果差,在榆紫葉甲大規(guī)模暴發(fā)時難以見效,且纏結塑料布會阻礙樹木的有氧呼吸[3],對樹木的正常生長造成一定影響?;瘜W防治法主要包括樹干涂抹毒環(huán)、樹冠防治、毒繩防治和根部施藥,采用化學防治方法見效快,耗費人力物力小,但是容易造成農(nóng)藥殘留,引起環(huán)境污染[4]。生物防治目前較為有效的方法是利用榆紫葉甲的天敵昆蟲——異色瓢蟲(Harmonia axyridis)成蟲對其進行防治,但存在防治周期長,不適合蟲災大規(guī)模暴發(fā)時應急使用,同時也有可能因引進天敵昆蟲而對當?shù)厣鷳B(tài)系統(tǒng)的平衡造成一定影響[5]。
可見,目前防治榆紫葉甲雖以化學防治法最為有效,但安全性問題是其在城市綠化中廣泛應用的較大障礙,開發(fā)高效低毒環(huán)保的新農(nóng)藥可為防治榆紫葉甲提供新的無公害途徑。多種植物和微生物被證實其中的某些成分存在著殺蟲活性。
大型真菌中的酮類化合物、脂肪酸類化合物等被證實有殺蟲活性。植物中的除蟲菊酯、魚藤酮、煙堿也被證實有殺蟲活性并已實現(xiàn)了商業(yè)化生產(chǎn)和應用[6]。本研究通過殺蟲活性篩選,選用具有殺蟲活性的橙黃鵝膏菌[Amanita citrina (Schaeff.) Pers.ex S.F.Gray]和艾蒿(Artemisia argyi)提取物以及二者復合提取物作為殺蟲藥劑,對榆紫葉甲進行急性毒性試驗,測定橙黃鵝膏菌和艾蒿提取物及復合物提取物的毒效,通過對共毒系數(shù)的計算,分析復合物殺蟲效果,旨在為生物農(nóng)藥的研制提供配比參考。
1材料與方法
1.1材料
1.1.1大型真菌和植物樣本大型真菌和植物于2012年6~9月采集自遼寧省沈陽市棋盤山風景區(qū)和沈陽大學校園內,參照《中國大型真菌》和《東北植物檢索表》,由遼寧省農(nóng)業(yè)科學院劉俊杰協(xié)助進行鑒定。
采集到的大型真菌經(jīng)鑒定有12種,分別為綠菇[Russula virescens (schaeff.ex Zanted)Fr]、褐鱗環(huán)柄菇(Lepiota helveola Bres.)、冠狀環(huán)柄菇[Lepiota cristata(Bolt.:Fr.)Quél.]、黃孢紅菇[Russula xerampelina(Schaeff.ex Secr.)Fr.]、晶粒鬼傘[Coprinus micaceus(Bull.)Fr.]、墨汁鬼傘[Coprinus atramentarius(Bull.:Fr)Fr.]、小牛肝菌[Boletinus paluster(Peck.)Peck.]、松林小牛肝菌[Boletinus pinetorum(Chiu)Teng]、小白杯傘[Clitocybe candicans(Pers.:Fr.) Kummer]、白禿馬勃[Calvatia candida(Rostk) Hollos]、橙黃鵝膏菌、蛹蟲草[Cordyceps militaris(L.:Fr.)Link.]。前期對12種大型真菌提取物進行預備篩選試驗,在相同濃度下,進行提取物對榆紫葉甲的24 h急性毒性試驗,測定結果表明榆紫葉甲死亡率最高的是橙黃鵝膏菌提取物,選定橙黃鵝膏菌為后續(xù)試驗材料。
采集17種植物經(jīng)鑒定分別為牛蒡(Arctium lappal)、艾蒿、青蒿(Artemisia annua L.)、蒲公英(Taraxacum officinale)、大薊(Cirsium japonicum DC)、蒼術(Atractylodes lancea)、銀杏(Ginkgo biloba)、桃(Amygdalus persica Linn.)、東北鐵線蓮(Clematis mandshurica Rupt)、澤漆(Euphorbia helioscopia)、東北天南星(Arisaema amurense Maxim)、紫蘇[Perilla frutescens(L.) Britt.]、白屈菜(Chelidonium majus L.)、蒙古蒿(Artemisiamongolica Fisch.et Bess.)、蛇床花[Cnidium monnieri(L.)Cuss.]、毒芹(Cicuta virosa Linn.)、大籽蒿(Artemisia sieversiana)。對17種植物提取物進行預備篩選試驗,進行相同濃度提取物對榆紫葉甲24 h急性毒性試驗,結果表明榆紫葉甲死亡率最高的是艾蒿提取物,選定艾蒿為后續(xù)試驗材料。
1.1.2供試昆蟲榆紫葉甲于2012年9月采集于遼寧省葫蘆島市龍港區(qū)雙樹鄉(xiāng),帶回實驗室經(jīng)過48 h室內培養(yǎng),觀察藥劑處理前活動情況。
1.1.3提取物橙黃鵝膏菌取子實體菌蓋和菌柄交界處組織進行固體斜面培養(yǎng)3~5 d,分離菌落接種到液體培養(yǎng)基中搖床培養(yǎng)5~7 d后超聲波破碎,破碎后的發(fā)酵物經(jīng)9 000 r/min離心取上清液,旋轉蒸發(fā)儀蒸發(fā)得濃縮液,濃縮液放鼓風干燥箱中40 ℃干燥至恒重,放入藥瓶中備用[7]。
艾蒿全草剪切后放入鼓風干燥箱中干燥至恒重,中草藥粉碎機粉碎過40目篩得艾蒿粉。艾蒿粉與95%乙醇按質量比1∶4混合裝入溶劑瓶,在振蕩培養(yǎng)箱內振蕩提?。梗?h,真空泵抽濾,濾液經(jīng)旋轉蒸發(fā)儀蒸發(fā)后經(jīng)40 ℃鼓風干燥至恒重,放入藥瓶中備用[8]。
1.1.4主要儀器LDZX-75KBS型立式壓力蒸汽滅菌器、ZDP-150型恒溫培養(yǎng)振蕩器、HG9146A型電熱恒溫鼓風干燥箱、PRX-205B型智能人工氣候箱、TD型電子天平、JY99-2D型超聲波細胞粉碎機、SW-CJ-2F(D)型醫(yī)用凈化工作臺、GL-161X型箱式高速冷凍離心機。
1.2方法
1.2.1毒殺效果測定0.1 g橙黃鵝膏菌提取物中加入0.5 mL 95%乙醇溶解后用蒸餾水稀釋,配制終濃度為10、12、14、15、16、18 mg/mL的藥液進行預試驗,確定毒殺試驗所用處理終濃度分別為14、15、16、17、18 mg/mL的橙黃鵝膏菌提取液,以蒸餾水為空白對照,藥液pH為6.8~7.3。榆紫葉甲以榆樹枝葉飼養(yǎng)于玻璃瓶中,每12 h換瓶1次。取10 mL藥液用小噴壺噴淋蟲體后放入人工氣候箱中,溫度(24±2) ℃,通風,光暗比為12 h/12 h,每組試蟲30頭,分別測定12、24、48、72 h的急性毒性。試驗重復3次。
艾蒿提取物藥液的稀釋終濃度分別為1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mg/mL,毒殺效果測定試驗方法同橙黃鵝膏菌提取物。
共毒試驗將橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物按照質量比100∶1進行混合后得到復合物混劑,總濃度為14、15、16、17、18 mg/mL,采用相同方式測定12、24、48、72 h的急性毒性。
觀察試蟲中毒癥狀。以榆紫葉甲蟲體不動、三對足收縮不動、用針觸碰胸部時足末端不動、觸角收縮或未收縮的觸角用針觸碰時不動視為已死亡。
1.2.2數(shù)據(jù)處理
死亡率=死亡蟲數(shù)/供試蟲數(shù)×100%;校正死亡率=(處理死亡率-對照死亡率)/(1-對照死亡率)×100%。
運用SPSS 17.0輔助進行數(shù)據(jù)分析,計算毒力回歸方程和半致死濃度(LC50)。
共毒系數(shù)=(1/混劑LC50值)/(1/橙黃鵝膏菌提取物的LC50值×橙黃鵝膏菌提取物占比+1/艾蒿提取物的LC50值×艾蒿提取物占比)×100。
2結果分析
2.1榆紫葉甲中毒癥狀
噴藥前榆紫葉甲行動活躍,沿著榆樹枝葉上下爬動,早晨爬到樹枝高處,午間在樹葉背面,晚間爬到樹枝底部,用玻璃棒觸碰其身體或周圍時會出現(xiàn)假死現(xiàn)象,3對足呈收縮狀,受重力影響掉落于飼養(yǎng)瓶底部,不再觸碰其身體和周圍30 s后恢復活動,伸出3對足繼續(xù)運動。噴藥后的榆紫葉甲行動遲緩,早中晚未出現(xiàn)有規(guī)律性爬行,對陽光的感應變弱,但是仍會出現(xiàn)假死性,反應速度變慢,多數(shù)躲在固定的樹葉背面,不喜爬動。
2.2橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和混劑對榆紫葉甲的毒殺效果
不同濃度的橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者的復合混劑藥后12、24、48、72 h對榆紫葉甲的毒殺情況見表1。
橙黃鵝膏菌提取物處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0.33、1.33、2.67頭;艾蒿提取物處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0、1.67、2.33頭;復合混劑處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0.33、0.33、1.33、2.67頭。
從表1可見,同種提取物同一濃度處理隨時間延長試蟲死亡率提高,同種提取物處理相同時間,隨著提取物濃度增大試蟲的死亡率增高。要得到相近的死亡率,橙黃鵝膏菌提取物的處理濃度要大于艾蒿提取物,說明橙黃鵝膏菌提取物的毒性比艾蒿提取物的毒性小。黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物100∶1混合,所得復合混劑在橙黃鵝膏菌提取物相近濃度水平上的殺蟲效果優(yōu)于單一的橙黃鵝膏菌提取物。
分析橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者復合混劑對榆紫葉甲12、24、48和72 h毒力(表2-表4)可知,所有試驗的R2均大于0.90,說明試驗準確性高,誤差??;3種藥劑處理的毒力方程都能實現(xiàn)直線回歸,說明在同一處理時間試蟲死亡率和藥劑濃度存在正相關。
橙黃鵝膏菌提取物對榆紫葉甲12、24、48和72 h的半致死濃度(LC50)分別是17.889、16.521、14.688、13.588 mg/mL。艾蒿提取物對榆紫葉甲12、24、48、72 h的半致死濃度分別是3.555、2.764、1.784、1.436 g/mL。橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物對榆紫葉甲12、24、48、72 h的半致死濃度分別是16.317、15.193、14.028、13.503 mg/mL。同種藥劑對試蟲的半致死濃度隨時間延長而降低,而在相同時間內,艾蒿提取物對試蟲的半致死濃度最小,橙黃鵝膏菌提取物對試蟲的半致死濃度最大,橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物對試蟲的半致死濃度介于二者之間,接近于橙黃鵝膏菌提取物對試蟲的半致死濃度,說明艾蒿提取物對榆紫葉甲的毒性最高,提取物復合混劑的毒性高于橙黃鵝膏菌?;靹┲谐赛S鵝膏菌提取物與艾蒿提取物的質量比為100∶1,橙黃鵝膏菌提取物所占比例遠大于艾蒿提取物,這可能是復合提取物的毒力與橙黃鵝膏菌毒力更接近的原因。
計算和分析共毒系數(shù)得知,橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物100∶1復合混劑的共毒系數(shù)12、24、48、72 h分別為105.43、103.64、97.70、92.84,表現(xiàn)出隨時間延長而呈遞減的趨勢。
當共毒系數(shù)大于100時復合成分為增效作用,當共毒系數(shù)小于80時為拮抗作用。從橙黃鵝膏菌提取物與艾蒿提取物二者進行混合的共毒系數(shù)來看,二者在前期表現(xiàn)出輕微增效作用,后期表現(xiàn)出輕微的拮抗作用趨勢。
3小結與討論
本試驗研究了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物的殺蟲活性,明確了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物及二者復合物對榆紫葉甲不同時間內的毒力情況,可以為生物源農(nóng)藥的開發(fā)研制提供參考。
試驗所用混劑為橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物(質量比)100∶1復合液,橙黃鵝膏菌提取物比例大,可能是其毒力較低,與橙黃鵝膏菌提取物相接近的原因。而從試驗結果看,艾蒿提取物殺蟲效果較好,可以通過采用增加復合提取物中艾蒿提取物的比例來提高殺蟲效果;復合混劑在試驗前期表現(xiàn)出一定的增效作用,加大混劑用量,在短時間內可達到更好的殺蟲效果。
研究提取物復合混劑是為了尋找更好的生物源殺蟲劑配方。由于微生物源殺蟲劑可以通過大規(guī)模擴繁微生物得到,一定程度上可解決殺蟲劑成本問題,而適當加入植物提取物可以增加藥效,在生產(chǎn)實踐中具有應用前景。榆紫葉甲為中國北方發(fā)生普遍且危害較大的園林綠化有害昆蟲,對其進行生物源殺蟲劑研究,旨在尋找城市綠化中對害蟲安全有效的防治思路和方法。
試驗采用的大型真菌和植物提取物的安全性和殺蟲有效成分有待進一步研究。
參考文獻:
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[8] 郭亞紅.蒼耳子中揮發(fā)油的研究[J].中國中藥雜志,1994,19(4):235-241.
橙黃鵝膏菌提取物處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0.33、1.33、2.67頭;艾蒿提取物處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0、1.67、2.33頭;復合混劑處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0.33、0.33、1.33、2.67頭。
從表1可見,同種提取物同一濃度處理隨時間延長試蟲死亡率提高,同種提取物處理相同時間,隨著提取物濃度增大試蟲的死亡率增高。要得到相近的死亡率,橙黃鵝膏菌提取物的處理濃度要大于艾蒿提取物,說明橙黃鵝膏菌提取物的毒性比艾蒿提取物的毒性小。黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物100∶1混合,所得復合混劑在橙黃鵝膏菌提取物相近濃度水平上的殺蟲效果優(yōu)于單一的橙黃鵝膏菌提取物。
分析橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者復合混劑對榆紫葉甲12、24、48和72 h毒力(表2-表4)可知,所有試驗的R2均大于0.90,說明試驗準確性高,誤差??;3種藥劑處理的毒力方程都能實現(xiàn)直線回歸,說明在同一處理時間試蟲死亡率和藥劑濃度存在正相關。
橙黃鵝膏菌提取物對榆紫葉甲12、24、48和72 h的半致死濃度(LC50)分別是17.889、16.521、14.688、13.588 mg/mL。艾蒿提取物對榆紫葉甲12、24、48、72 h的半致死濃度分別是3.555、2.764、1.784、1.436 g/mL。橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物對榆紫葉甲12、24、48、72 h的半致死濃度分別是16.317、15.193、14.028、13.503 mg/mL。同種藥劑對試蟲的半致死濃度隨時間延長而降低,而在相同時間內,艾蒿提取物對試蟲的半致死濃度最小,橙黃鵝膏菌提取物對試蟲的半致死濃度最大,橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物對試蟲的半致死濃度介于二者之間,接近于橙黃鵝膏菌提取物對試蟲的半致死濃度,說明艾蒿提取物對榆紫葉甲的毒性最高,提取物復合混劑的毒性高于橙黃鵝膏菌?;靹┲谐赛S鵝膏菌提取物與艾蒿提取物的質量比為100∶1,橙黃鵝膏菌提取物所占比例遠大于艾蒿提取物,這可能是復合提取物的毒力與橙黃鵝膏菌毒力更接近的原因。
計算和分析共毒系數(shù)得知,橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物100∶1復合混劑的共毒系數(shù)12、24、48、72 h分別為105.43、103.64、97.70、92.84,表現(xiàn)出隨時間延長而呈遞減的趨勢。
當共毒系數(shù)大于100時復合成分為增效作用,當共毒系數(shù)小于80時為拮抗作用。從橙黃鵝膏菌提取物與艾蒿提取物二者進行混合的共毒系數(shù)來看,二者在前期表現(xiàn)出輕微增效作用,后期表現(xiàn)出輕微的拮抗作用趨勢。
3小結與討論
本試驗研究了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物的殺蟲活性,明確了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物及二者復合物對榆紫葉甲不同時間內的毒力情況,可以為生物源農(nóng)藥的開發(fā)研制提供參考。
試驗所用混劑為橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物(質量比)100∶1復合液,橙黃鵝膏菌提取物比例大,可能是其毒力較低,與橙黃鵝膏菌提取物相接近的原因。而從試驗結果看,艾蒿提取物殺蟲效果較好,可以通過采用增加復合提取物中艾蒿提取物的比例來提高殺蟲效果;復合混劑在試驗前期表現(xiàn)出一定的增效作用,加大混劑用量,在短時間內可達到更好的殺蟲效果。
研究提取物復合混劑是為了尋找更好的生物源殺蟲劑配方。由于微生物源殺蟲劑可以通過大規(guī)模擴繁微生物得到,一定程度上可解決殺蟲劑成本問題,而適當加入植物提取物可以增加藥效,在生產(chǎn)實踐中具有應用前景。榆紫葉甲為中國北方發(fā)生普遍且危害較大的園林綠化有害昆蟲,對其進行生物源殺蟲劑研究,旨在尋找城市綠化中對害蟲安全有效的防治思路和方法。
試驗采用的大型真菌和植物提取物的安全性和殺蟲有效成分有待進一步研究。
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[8] 郭亞紅.蒼耳子中揮發(fā)油的研究[J].中國中藥雜志,1994,19(4):235-241.
橙黃鵝膏菌提取物處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0.33、1.33、2.67頭;艾蒿提取物處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0、1.67、2.33頭;復合混劑處理組對照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0.33、0.33、1.33、2.67頭。
從表1可見,同種提取物同一濃度處理隨時間延長試蟲死亡率提高,同種提取物處理相同時間,隨著提取物濃度增大試蟲的死亡率增高。要得到相近的死亡率,橙黃鵝膏菌提取物的處理濃度要大于艾蒿提取物,說明橙黃鵝膏菌提取物的毒性比艾蒿提取物的毒性小。黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物100∶1混合,所得復合混劑在橙黃鵝膏菌提取物相近濃度水平上的殺蟲效果優(yōu)于單一的橙黃鵝膏菌提取物。
分析橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者復合混劑對榆紫葉甲12、24、48和72 h毒力(表2-表4)可知,所有試驗的R2均大于0.90,說明試驗準確性高,誤差?。?種藥劑處理的毒力方程都能實現(xiàn)直線回歸,說明在同一處理時間試蟲死亡率和藥劑濃度存在正相關。
橙黃鵝膏菌提取物對榆紫葉甲12、24、48和72 h的半致死濃度(LC50)分別是17.889、16.521、14.688、13.588 mg/mL。艾蒿提取物對榆紫葉甲12、24、48、72 h的半致死濃度分別是3.555、2.764、1.784、1.436 g/mL。橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物對榆紫葉甲12、24、48、72 h的半致死濃度分別是16.317、15.193、14.028、13.503 mg/mL。同種藥劑對試蟲的半致死濃度隨時間延長而降低,而在相同時間內,艾蒿提取物對試蟲的半致死濃度最小,橙黃鵝膏菌提取物對試蟲的半致死濃度最大,橙黃鵝膏菌和艾蒿的復合提取物對試蟲的半致死濃度介于二者之間,接近于橙黃鵝膏菌提取物對試蟲的半致死濃度,說明艾蒿提取物對榆紫葉甲的毒性最高,提取物復合混劑的毒性高于橙黃鵝膏菌?;靹┲谐赛S鵝膏菌提取物與艾蒿提取物的質量比為100∶1,橙黃鵝膏菌提取物所占比例遠大于艾蒿提取物,這可能是復合提取物的毒力與橙黃鵝膏菌毒力更接近的原因。
計算和分析共毒系數(shù)得知,橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物100∶1復合混劑的共毒系數(shù)12、24、48、72 h分別為105.43、103.64、97.70、92.84,表現(xiàn)出隨時間延長而呈遞減的趨勢。
當共毒系數(shù)大于100時復合成分為增效作用,當共毒系數(shù)小于80時為拮抗作用。從橙黃鵝膏菌提取物與艾蒿提取物二者進行混合的共毒系數(shù)來看,二者在前期表現(xiàn)出輕微增效作用,后期表現(xiàn)出輕微的拮抗作用趨勢。
3小結與討論
本試驗研究了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物的殺蟲活性,明確了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物及二者復合物對榆紫葉甲不同時間內的毒力情況,可以為生物源農(nóng)藥的開發(fā)研制提供參考。
試驗所用混劑為橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物(質量比)100∶1復合液,橙黃鵝膏菌提取物比例大,可能是其毒力較低,與橙黃鵝膏菌提取物相接近的原因。而從試驗結果看,艾蒿提取物殺蟲效果較好,可以通過采用增加復合提取物中艾蒿提取物的比例來提高殺蟲效果;復合混劑在試驗前期表現(xiàn)出一定的增效作用,加大混劑用量,在短時間內可達到更好的殺蟲效果。
研究提取物復合混劑是為了尋找更好的生物源殺蟲劑配方。由于微生物源殺蟲劑可以通過大規(guī)模擴繁微生物得到,一定程度上可解決殺蟲劑成本問題,而適當加入植物提取物可以增加藥效,在生產(chǎn)實踐中具有應用前景。榆紫葉甲為中國北方發(fā)生普遍且危害較大的園林綠化有害昆蟲,對其進行生物源殺蟲劑研究,旨在尋找城市綠化中對害蟲安全有效的防治思路和方法。
試驗采用的大型真菌和植物提取物的安全性和殺蟲有效成分有待進一步研究。
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