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        寬筋藤提取物對小鼠抗炎作用的實驗研究

        2014-08-08 20:01:14薛強羅瑩許小林
        右江醫(yī)學 2014年3期
        關(guān)鍵詞:抗炎小鼠

        薛強+羅瑩+許小林

        基金項目:20072009年度右江民族醫(yī)學院普高學生科研課題(編號:66)

        作者簡介:薛強,男,高級技師,醫(yī)學學士。Email:xueqiang116@126.com.

        ▲通信作者:羅瑩,女,實驗師,碩士。Email:luoxf@139.com.

        薛強1,羅瑩2▲,許小林1

        (右江民族醫(yī)學院,1.藥學院,2.基礎(chǔ)醫(yī)學院,百色 533000)

        【摘要】目的觀察寬筋藤提取物對小鼠的抗炎作用。

        方法①采用二甲苯致小鼠耳郭腫脹法,觀察寬筋藤大、中、小劑量對小鼠耳郭腫脹的抑制率;②采用雞蛋清致小鼠足趾腫脹法,觀察致炎后1 h、2 h、4 h、6 h、8 h,寬筋藤大、中、小劑量對小鼠足趾腫脹的抑制作用。

        結(jié)果寬筋藤提取物灌胃可減輕二甲苯致小鼠耳郭腫脹程度和雞蛋清致小鼠足趾腫脹程度(P<001),且腫脹抑制率隨劑量的增加而加強。

        結(jié)論 寬筋藤對小鼠組織腫脹具有抑制作用,并且呈現(xiàn)劑量依賴性,具有抗炎藥理作用。

        【關(guān)鍵詞】寬筋藤;抗炎;小鼠

        中圖分類號:R965文獻標識碼:A文章編號:10031383(2014)03028503

        DOI:10.3969/j.issn.10031383.2014.03.007

        

        Experimental study of the antiinflammatory effect of Kuan Jin Teng extract on mice

        XUE Qiang1,LUO Ying2▲,XU Xiaolin1

        (1.College of Pharmacy,2.College of Preclinical Medicine,

        Youjiang Medical University for Nationalities,Baise 533000,Guangxi,China)

        【Abstract】ObjectiveTo investigate the antiinflammatory effect of water extract from Kuan Jin Teng on mice.

        Methods①Xylene was used to induce pinna swelling on mice.②Toe swelling of mice was induced by egg white.Observe the inhibition effect of large,middle,small dose of Kuan Jin Teng on the inflammation of mice 1h,2h,4 h,6 h and 8 h later.

        Results The intragastric administration of water extract of Kuan Jin Teng can relieve the pinna swelling induced by xylene and toe swelling induced by egg white(P<0.01) and the inhibition effect on swelling enhanced with the increase of dose.

        Conclusion Kuan Jin Teng has inhibition effect on tissue swelling of mice,which shows dose dependency,and has antiinflammatory pharmacologiccal effect.

        【Key words】Kuan Jin Teng;antiinflammatory;mice

        寬筋藤是防己科植物寬筋藤的干燥藤莖[1],又叫伸筋藤、舒筋藤、砍不死、松根藤,廣泛分布于廣西、廣東、西藏、云南、海南等地區(qū)[2,3],其味微苦、性涼[4],廣西壯族民間常用其治療風濕骨痛、腰肌勞損、肩周炎等[5,6],是舒筋活絡(luò)常用的中藥。目前有關(guān)寬筋藤的藥理作用報道較少,我們對其抗炎活性作用進行實驗研究。

        1材料與方法

        1.1藥品

        寬筋藤購于廣西百色市藥材市場,經(jīng)我校中藥學教研室劉春榮副主任藥師鑒定。取寬筋藤200 g自然干燥,粉碎加蒸餾水液料比1∶10,浸泡24 h 后,80℃超聲提取60 min,過濾,提取3次,合并濾液,濃縮至每ml溶液含生藥2 g。

        昆明種小鼠,SPF級,右江民族醫(yī)學院實驗動物中心提供(許可證號:SYXK桂20110010)。

        1.3儀器

        電子分析天平(AR1140/C),奧豪斯(上海)公司生產(chǎn);足趾容積測量儀(YLS7B),山東省醫(yī)學科學院設(shè)備站生產(chǎn)。

        1.4實驗方法

        1.4.1二甲苯致小鼠耳郭腫脹實驗

        小鼠50只,體重(20±2)g,雌雄各半,隨機分成5組,每組10只,分別為生理鹽水組,地塞米松組(10 mg/kg),寬筋藤大、中、小劑量組(20 g/kg、10 g/kg、5 g/kg),各組連續(xù)灌胃7 d,末次給藥1 h后,于小鼠右耳兩面均勻涂抹二甲苯0.02 ml致腫脹,左耳不涂為正常對照耳[7]。1 h后小鼠頸椎脫臼處死,沿著耳郭基線剪下雙耳,用6 mm打孔器沿著左右耳相同部位打一圓片,于電子分析天平上稱重,計算腫脹率,比較各組間的差異。腫脹率(%)=(右耳重量-左耳重量)/左耳重量×100%。腫脹抑制率(%)=(生理鹽水組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/生理鹽水組平均腫脹度×100%。

        1.4.2雞蛋清致小鼠足趾腫脹實驗

        小鼠50只,體重(20±2)g,雌雄各半,隨機分成5組,每組10只,分別為生理鹽水組,地塞米松組(10 mg/kg),寬筋藤大、中、小劑量組(20 g/kg、10 g/kg、5 g/kg),各組連續(xù)灌胃7 d,末次給藥1 h后,小鼠右后足趾關(guān)節(jié)下注射雞蛋清0.1 ml致炎[8]。致炎后1 h、2 h、4 h、6 h、8 h用足趾容積測量儀分別測量小鼠足趾容積。腫脹率(%)=(致炎后足趾容積值-致炎前足趾容積值)/致炎前足趾容積值×100%。

        1.5統(tǒng)計學方法

        實驗數(shù)據(jù)用(-±s)表示,采用SPSS for Windows 15.0統(tǒng)計軟件進行ANOVA分析,P<005為差異有統(tǒng)計學意義。

        2結(jié)果

        2.1寬筋藤提取物對二甲苯致小鼠耳郭腫脹的影響

        地塞米松組和寬筋藤大、中劑量組二甲苯致小鼠耳郭腫脹率與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<001),寬筋藤大劑量組二甲苯致小鼠耳郭腫脹率與地塞米松組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>005)。寬筋藤大劑量組小鼠耳郭腫脹抑制率為4666%,與生理鹽水組差異有統(tǒng)計學意義(P<001)。說明寬筋藤提取物含有抗炎活性成分,能降低二甲苯致小鼠耳郭腫脹的程度。詳見表1。

        2.2寬筋藤提取物對雞蛋清致小鼠足趾腫脹的影響

        各小組足趾腫脹率隨時間推移呈下降趨勢,地塞米松組和寬筋藤大劑量組致炎后1 h足趾腫脹率與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<001)。寬筋藤中、小劑量組抑制小鼠足趾腫脹起效比較慢,致炎后4 h與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<005或<001)。其中寬筋藤大劑量組與地塞米松組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>005)。寬筋藤提取物具有抑制雞蛋清致小鼠足趾腫脹的作用,作用特點為起效比較慢,在致炎后4 h作用逐步增強。詳見表2。

        表1寬筋藤提取物對二甲苯致小鼠耳郭腫脹的影響(n=10,%,-±s)

        分組腫脹率腫脹抑制率

        生理鹽水組47.73±18.32★-

        地塞米松組16.19±11.32●66.09%

        寬筋藤大劑量組25.46±11.41●46.66%

        寬筋藤中劑量組29.29±9.17●☆38.63%

        寬筋藤小劑量組35.00±18.47★26.67%

        注:與生理鹽水組比較,●P<001;與地塞米松組比較,☆P<005,★P<001。

        表2寬筋藤提取物對雞蛋清致小鼠足趾腫脹的影響(n=10,%,-±s)

        組別足趾腫脹率(%)

        1 h2 h4 h6 h8 h

        生理鹽水組61.33±16.17★45.74±18.89★34.59±15.03★5.51±6.54★14.63±11.61★

        地塞米松組35.75±14.13●21.03±10.29●11.30±6.76●10.25±10.34●2.67±3.43●

        寬筋藤大劑量組41.89±18.92●33.97±17.2215.73±9.93●12.04±7.20●5.06±5.55●

        寬筋藤中劑量組47.95±16.1135.41±18.1722.42±10.13○☆13.07±8.98○5.95±4.28●

        寬筋藤小劑量組47.13±15.5934.79±19.5223.44±11.35○☆12.83±11.34○8.51±6.28○

        注:與生理鹽水組比較,○P<005,●P<001 ;與地塞米松組比較,☆P<005,★P<001。

        3討論

        在炎癥性疾病模型中,炎性細胞被激活后,炎性介質(zhì)被釋放出來,導致了動脈和靜脈的擴張,引起血管通透性增加,結(jié)果導致體液和血漿蛋白外滲,形成水腫。二甲苯致小鼠耳郭腫脹模型、雞蛋清致小鼠足趾腫脹模型屬于炎癥反應(yīng)的第一時相,是以由化學物質(zhì)、蛋白介導的血管通透性改變?yōu)橹鞯牡湫偷募毙匝装Y模型[9,10],主要用于評價藥物對炎癥早期血管通透性增加的抑制作用以及炎性滲出的影響程度,從而反映藥物對急性炎癥的作用,常用于抗炎藥物的初篩。

        實驗結(jié)果顯示,寬筋藤提取物大、中、小劑量組均能減輕二甲苯致小鼠耳郭腫脹程度,寬筋藤各劑量組的耳郭腫脹抑制率為46.66%、38.63%、2667%,其中寬筋藤大劑量組效果與地塞米松組作用相近,優(yōu)于中、小劑量組。寬筋藤提取物各劑量組對雞蛋清致小鼠足趾腫脹具有抑制作用,隨著時間增加小鼠足趾腫脹率明顯減小,其中地塞米松組和寬筋藤大劑量組小鼠足趾腫脹率在致炎后1 h與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義,寬筋藤中、小劑量組小鼠足趾腫脹率在致炎后4 h與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義,呈現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系,各小組在致炎后8 h對小鼠足趾腫脹抑制作用最明顯。實驗結(jié)果說明了寬筋藤在一定程度上對早期炎癥的炎性滲出、組織腫脹具有抑制作用,并且呈現(xiàn)劑量依賴性,具有抗炎藥理作用。本實驗為今后進一步研究寬筋藤抗炎活性的中藥有效成分和臨床應(yīng)用提供參考,也為開發(fā)利用寬筋藤中草藥材資源提供實驗依據(jù)。

        參考文獻

        [1] 國家藥典委員會.中國藥典[M].2010版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:附錄25.

        [2] 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳.廣西中藥材標準[M].南寧:廣西科學技術(shù)出版社,1992:7879.

        [3] 廣東中藥志編輯委員會.廣東中藥志[M].廣州:廣東科技出版社,1994:501502.

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        [6] 林耐球,朱英,周廣軍,等.壯醫(yī)藥治療痹證研究概況[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報,2013,15(11):139142.

        [7] 陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:355379.

        [8] 徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:882886.

        [9] Liu J,Yang F,Zhang Y,Li J. Studies on the cellimmunosuppressive mechanism of Oridonin from Isodon serra[J].Int Immunopharmacol,2007,7(7):945954.

        [10]Feng X,Cheng Q,Chen SY,et al. Evaluation of the burn healing properties of oil extraction from housefly larva in mice[J].J Ethnopharmacol,2010,130(3): 586592.

        (收稿日期:2014-04-10修回日期:2014-06-11)

        編輯:潘明志)

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        表1寬筋藤提取物對二甲苯致小鼠耳郭腫脹的影響(n=10,%,-±s)

        分組腫脹率腫脹抑制率

        生理鹽水組47.73±18.32★-

        地塞米松組16.19±11.32●66.09%

        寬筋藤大劑量組25.46±11.41●46.66%

        寬筋藤中劑量組29.29±9.17●☆38.63%

        寬筋藤小劑量組35.00±18.47★26.67%

        注:與生理鹽水組比較,●P<001;與地塞米松組比較,☆P<005,★P<001。

        表2寬筋藤提取物對雞蛋清致小鼠足趾腫脹的影響(n=10,%,-±s)

        組別足趾腫脹率(%)

        1 h2 h4 h6 h8 h

        生理鹽水組61.33±16.17★45.74±18.89★34.59±15.03★5.51±6.54★14.63±11.61★

        地塞米松組35.75±14.13●21.03±10.29●11.30±6.76●10.25±10.34●2.67±3.43●

        寬筋藤大劑量組41.89±18.92●33.97±17.2215.73±9.93●12.04±7.20●5.06±5.55●

        寬筋藤中劑量組47.95±16.1135.41±18.1722.42±10.13○☆13.07±8.98○5.95±4.28●

        寬筋藤小劑量組47.13±15.5934.79±19.5223.44±11.35○☆12.83±11.34○8.51±6.28○

        注:與生理鹽水組比較,○P<005,●P<001 ;與地塞米松組比較,☆P<005,★P<001。

        3討論

        在炎癥性疾病模型中,炎性細胞被激活后,炎性介質(zhì)被釋放出來,導致了動脈和靜脈的擴張,引起血管通透性增加,結(jié)果導致體液和血漿蛋白外滲,形成水腫。二甲苯致小鼠耳郭腫脹模型、雞蛋清致小鼠足趾腫脹模型屬于炎癥反應(yīng)的第一時相,是以由化學物質(zhì)、蛋白介導的血管通透性改變?yōu)橹鞯牡湫偷募毙匝装Y模型[9,10],主要用于評價藥物對炎癥早期血管通透性增加的抑制作用以及炎性滲出的影響程度,從而反映藥物對急性炎癥的作用,常用于抗炎藥物的初篩。

        實驗結(jié)果顯示,寬筋藤提取物大、中、小劑量組均能減輕二甲苯致小鼠耳郭腫脹程度,寬筋藤各劑量組的耳郭腫脹抑制率為46.66%、38.63%、2667%,其中寬筋藤大劑量組效果與地塞米松組作用相近,優(yōu)于中、小劑量組。寬筋藤提取物各劑量組對雞蛋清致小鼠足趾腫脹具有抑制作用,隨著時間增加小鼠足趾腫脹率明顯減小,其中地塞米松組和寬筋藤大劑量組小鼠足趾腫脹率在致炎后1 h與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義,寬筋藤中、小劑量組小鼠足趾腫脹率在致炎后4 h與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義,呈現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系,各小組在致炎后8 h對小鼠足趾腫脹抑制作用最明顯。實驗結(jié)果說明了寬筋藤在一定程度上對早期炎癥的炎性滲出、組織腫脹具有抑制作用,并且呈現(xiàn)劑量依賴性,具有抗炎藥理作用。本實驗為今后進一步研究寬筋藤抗炎活性的中藥有效成分和臨床應(yīng)用提供參考,也為開發(fā)利用寬筋藤中草藥材資源提供實驗依據(jù)。

        參考文獻

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        [3] 廣東中藥志編輯委員會.廣東中藥志[M].廣州:廣東科技出版社,1994:501502.

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        [5] 滕紅麗,梅之南,郭力城.壯醫(yī)風濕免疫病常用藤本藥物藥學及臨床應(yīng)用研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2011,38(5):873875.

        [6] 林耐球,朱英,周廣軍,等.壯醫(yī)藥治療痹證研究概況[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報,2013,15(11):139142.

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        [9] Liu J,Yang F,Zhang Y,Li J. Studies on the cellimmunosuppressive mechanism of Oridonin from Isodon serra[J].Int Immunopharmacol,2007,7(7):945954.

        [10]Feng X,Cheng Q,Chen SY,et al. Evaluation of the burn healing properties of oil extraction from housefly larva in mice[J].J Ethnopharmacol,2010,130(3): 586592.

        (收稿日期:2014-04-10修回日期:2014-06-11)

        編輯:潘明志)

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        表1寬筋藤提取物對二甲苯致小鼠耳郭腫脹的影響(n=10,%,-±s)

        分組腫脹率腫脹抑制率

        生理鹽水組47.73±18.32★-

        地塞米松組16.19±11.32●66.09%

        寬筋藤大劑量組25.46±11.41●46.66%

        寬筋藤中劑量組29.29±9.17●☆38.63%

        寬筋藤小劑量組35.00±18.47★26.67%

        注:與生理鹽水組比較,●P<001;與地塞米松組比較,☆P<005,★P<001。

        表2寬筋藤提取物對雞蛋清致小鼠足趾腫脹的影響(n=10,%,-±s)

        組別足趾腫脹率(%)

        1 h2 h4 h6 h8 h

        生理鹽水組61.33±16.17★45.74±18.89★34.59±15.03★5.51±6.54★14.63±11.61★

        地塞米松組35.75±14.13●21.03±10.29●11.30±6.76●10.25±10.34●2.67±3.43●

        寬筋藤大劑量組41.89±18.92●33.97±17.2215.73±9.93●12.04±7.20●5.06±5.55●

        寬筋藤中劑量組47.95±16.1135.41±18.1722.42±10.13○☆13.07±8.98○5.95±4.28●

        寬筋藤小劑量組47.13±15.5934.79±19.5223.44±11.35○☆12.83±11.34○8.51±6.28○

        注:與生理鹽水組比較,○P<005,●P<001 ;與地塞米松組比較,☆P<005,★P<001。

        3討論

        在炎癥性疾病模型中,炎性細胞被激活后,炎性介質(zhì)被釋放出來,導致了動脈和靜脈的擴張,引起血管通透性增加,結(jié)果導致體液和血漿蛋白外滲,形成水腫。二甲苯致小鼠耳郭腫脹模型、雞蛋清致小鼠足趾腫脹模型屬于炎癥反應(yīng)的第一時相,是以由化學物質(zhì)、蛋白介導的血管通透性改變?yōu)橹鞯牡湫偷募毙匝装Y模型[9,10],主要用于評價藥物對炎癥早期血管通透性增加的抑制作用以及炎性滲出的影響程度,從而反映藥物對急性炎癥的作用,常用于抗炎藥物的初篩。

        實驗結(jié)果顯示,寬筋藤提取物大、中、小劑量組均能減輕二甲苯致小鼠耳郭腫脹程度,寬筋藤各劑量組的耳郭腫脹抑制率為46.66%、38.63%、2667%,其中寬筋藤大劑量組效果與地塞米松組作用相近,優(yōu)于中、小劑量組。寬筋藤提取物各劑量組對雞蛋清致小鼠足趾腫脹具有抑制作用,隨著時間增加小鼠足趾腫脹率明顯減小,其中地塞米松組和寬筋藤大劑量組小鼠足趾腫脹率在致炎后1 h與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義,寬筋藤中、小劑量組小鼠足趾腫脹率在致炎后4 h與生理鹽水組比較差異有統(tǒng)計學意義,呈現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系,各小組在致炎后8 h對小鼠足趾腫脹抑制作用最明顯。實驗結(jié)果說明了寬筋藤在一定程度上對早期炎癥的炎性滲出、組織腫脹具有抑制作用,并且呈現(xiàn)劑量依賴性,具有抗炎藥理作用。本實驗為今后進一步研究寬筋藤抗炎活性的中藥有效成分和臨床應(yīng)用提供參考,也為開發(fā)利用寬筋藤中草藥材資源提供實驗依據(jù)。

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        (收稿日期:2014-04-10修回日期:2014-06-11)

        編輯:潘明志)

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