彭麗英+彭攸靈+楊先國(guó)

[摘要] 目的 建立不同產(chǎn)地桑葉UPLC指紋圖譜。 方法 采用ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×50.0 mm，1.7 μm）色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為358 nm，流速為0.6 ml/min，柱溫40℃，進(jìn)樣體積1 μl。 結(jié)果 建立了桑葉專屬性的UPLC指紋圖譜，確定了15個(gè)共有峰，不同產(chǎn)地桑葉樣品具有較好的相似度。結(jié)論 UPLC指紋圖譜方法重復(fù)性好，簡(jiǎn)便可靠，可用于桑葉的快速鑒別，可以為桑葉的質(zhì)量控制和市場(chǎng)應(yīng)用提供依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 桑葉；指紋圖譜；超高效液相色譜法

[中圖分類號(hào)] R286[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1674-4721（2014）05（b）-0008-04

Study on UPLC fingerprint of Morus alba L. from different regions

PENG Li-ying PENG You-ling YANG Xian-guo▲

Hunan Traditional Chinese Medical College,Zhuzhou412012,China

[Abstract] Objective To establish UPLC fingerprint of Morus alba L. from different regions. Methods Column ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50.0 mm,1.7 μm)was used.The mobile phase was methanol-0.2％ phosphoric acid water with gradient elution.The detection wave-lengths was 358 nm and column temperature was 40℃ with the flow rate of 0.6 ml/min.The sample injection was 1 μl. Results A specificity fingerprint chromatogram was produced and 15 characteristic peaks were designated.The results showed that the collected samples had a good similarity. Conclusion UPLC fingerprint is a reliable,available and quick method of quality control of Morus alba L. and it is necessary for the safe and practicable use of the medicine.

[Key words] Morus alba L.;Fingerprint;UPLC

桑葉為桑科植物桑（Morus alba L.）的葉，初露后采收，除去雜質(zhì)，曬干，具有疏散風(fēng)熱、清肺潤(rùn)燥、清肝明目的功效，主要用于風(fēng)熱感冒、肺熱燥咳、頭暈頭痛、目赤昏花[1]。桑葉藥食兩用，現(xiàn)代研究表明桑葉具有降血糖[2-4]、降血壓[5]、降血脂、抗炎、抗衰老[6]、抗腫瘤[7]等功效，在藥用和食品保健方面都發(fā)揮了重要作用。目前，桑葉的質(zhì)量控制主要集中于蘆丁和綠原酸含量的測(cè)定[8-12]，除蘆丁外，其他黃酮類化合物也是桑葉質(zhì)量控制的熱點(diǎn)[13-16]。隨著國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)桑葉的需求愈來(lái)愈大，桑葉的質(zhì)量也參差不齊。課題組認(rèn)為中藥是多成分、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)的藥物，質(zhì)量控制也需要體現(xiàn)中藥特色，僅靠單一或幾個(gè)指標(biāo)難以衡量質(zhì)量的優(yōu)劣。中藥指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒定手段，是建立在中藥化學(xué)成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，主要用于評(píng)價(jià)中藥材及中藥制劑半成品質(zhì)量的真實(shí)性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性，符合中醫(yī)中藥整體性和模糊性的特點(diǎn)[17]。課題組為了進(jìn)一步控制桑葉質(zhì)量，采用UPLC方法，對(duì)從全國(guó)收集的桑葉藥材進(jìn)行指紋圖譜進(jìn)行研究。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

KQ-100B型超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；JA51002型電子分析天平（島津）；Waters Acquity UPLC H-Class超高效液相色譜系統(tǒng)，Empower工作站，含四元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、紫外檢測(cè)器（Waters公司）。

1.2 試劑

甲醇（色譜純，TEDIA公司），乙腈（色譜純，TEDIA公司），水為娃哈哈純凈水，磷酸（色譜純，北京化工廠）。

1.3 對(duì)照品及藥材

對(duì)照品異槲皮苷和紫云英苷，購(gòu)于成都植標(biāo)化純生物技術(shù)有限公司，供含量測(cè)定用，批號(hào)分別為PCS0371-lot 120510和PCS0468-lot 120328；對(duì)照品蘆丁購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)為0080-9705。不同產(chǎn)地的桑葉藥材11批，均由湖南中醫(yī)藥大學(xué)生藥學(xué)教研室潘清平教授鑒定為?？浦参锷＃∕orus alba L.）的葉，藥材批號(hào)及來(lái)源見(jiàn)表1。

表1 桑葉藥材批號(hào)及來(lái)源

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×50.0 mm，1.7 μm）；流速：0.6 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：358 nm；柱溫：40℃；進(jìn)樣體積：1 μl；流動(dòng)相：甲醇（A）-0.2%磷酸水（B）梯度洗脫，洗脫程序：0→22 min，10%A→32%A。

2.2 供試品溶液的制備

藥材粉碎，過(guò)60目篩，取藥粉約0.5 g，精密稱定，置于100 ml三角瓶中，加入75%甲醇50 ml，超聲處理（功率250 W，頻率33 kHz）30 min，放冷，用75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

2.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取對(duì)照品異槲皮苷、蘆丁和紫云英苷適量，用75%甲醇溶解，定容，得到其濃度分別為0.092、0.042、0.054 μg/μl。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 精密度試驗(yàn)取同一批桑葉供試品（20080305），按照2.2項(xiàng)的方法制備供試品溶液1份，按照上述色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定指紋圖譜。以10號(hào)峰（圖1）的保留時(shí)間和峰面積為參照，計(jì)算樣品中所含15個(gè)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間的RSD＜0.5％，相對(duì)峰面積的RSD＜1.0％，表明儀器的精密度良好。

圖1 桑葉藥材共有模式指紋圖譜

2.4.2 重復(fù)性試驗(yàn)按上述方法平行制備同一批桑葉供試品（20080305），測(cè)定指紋圖譜。考察樣品中所含有15個(gè)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間的RSD＜0.5%，相對(duì)峰面積的RSD＜1.0％，提示方法的重復(fù)性良好。

2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)同一批桑葉供試品（20080305）溶液，分別于0、2、4、6、8、12、24 h進(jìn)樣測(cè)定，以各峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積進(jìn)行考察，桑葉樣品24 h各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間的RSD＜0.5％，相對(duì)峰面積的RSD＜1.0％，表明桑葉樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5 指紋圖譜的建立

2.5.1 指紋圖譜共有模式的建立取桑葉藥材樣品11批，按照2.2下方法制備供試品溶液，分別進(jìn)樣1 μl，記錄UPLC色譜圖。采用國(guó)家藥典委員會(huì)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件（2.0版）進(jìn)行分析，生成共有模式指紋圖譜，有15個(gè)共有峰（圖1），其中以峰10（S峰）為參照物，其余各共有峰與峰10的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)保留面積見(jiàn)表2。

2.5.2 共有峰的確定11批桑葉藥材樣品導(dǎo)入軟件，得共有指紋圖譜（圖2），對(duì)照品溶液的色譜圖見(jiàn)圖3，經(jīng)與對(duì)照品對(duì)照，指認(rèn)10、11、12號(hào)峰分別為異槲皮苷、蘆丁、紫云英苷。

2.5.3 指紋圖譜的相似度評(píng)價(jià)上述11批桑葉樣品相似度計(jì)算結(jié)果依次為0.970、0.968、0.967、0.896、0.941、0.983、0.983、0.918、0.964、0.994、0.989、0.989，以上數(shù)據(jù)表明桑葉各批次相似性較好。

3 討論

本次實(shí)驗(yàn)選用UPLC開展桑葉指紋圖譜研究，與HPLC相比，UPLC方法快速簡(jiǎn)便、穩(wěn)定可靠。本次桑葉指紋圖譜實(shí)驗(yàn)分析時(shí)間在22 min內(nèi)，更加快捷和節(jié)約溶劑。

本實(shí)驗(yàn)根據(jù)桑葉中主要成分為黃酮類、酚酸類化合物，在75%甲醇中有相對(duì)較好的溶解度，選擇75%甲醇超聲，樣品前處理簡(jiǎn)單、可控；樣品呈弱酸性，選擇極低濃度的磷酸水溶液作為水相；選擇甲醇作為有機(jī)相來(lái)分析中藥桑葉，與乙腈相比更加安全和便宜；波長(zhǎng)選擇358 nm也是基于主要化合物在該波長(zhǎng)處吸收相對(duì)最大，且雜質(zhì)干擾較少；梯度選擇均一梯度變化以保證樣品具有更好的重復(fù)性。

相似度結(jié)果表明，不同批次桑葉樣品相似度計(jì)算結(jié)果均＞0.85，表明所收集的桑葉藥材質(zhì)量相對(duì)均一穩(wěn)定，當(dāng)然也與藥用桑葉樣品只有一種來(lái)源有關(guān)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：279.

[2]李超，潘建明，羅新根，等.桑葉消渴膠囊對(duì)2型糖尿病大鼠的影響[J].海南醫(yī)學(xué)，2012，23（2）：18-20.

[3]陳建國(guó)，步文磊.桑葉多糖降糖作用及其機(jī)制研究[J].中草藥，2011，42（3）：515-520.

[4]羅存敏.桑葉提取物對(duì)小鼠血糖的影響及其有效成份測(cè)定[J].蠶業(yè)科學(xué)，2005，31（4）：418-421.

[5]閻百傳.霜桑葉穩(wěn)定了我的血壓[J].長(zhǎng)壽，2008，（12）：43.

[6]王燦，左艇，王琳琳.桑葉黃酮抗皮膚衰老實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，8（3）：30-32.

[7]楊燕，王洪慶，陳若蕓.桑葉中的黃酮類化合物[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2010，（1）：77-81.

[8]周美環(huán)，趙書楷，陳淼，等.HPLC法測(cè)定桑葉中蘆丁的含量[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，12（5）：228-229.

[9]雷霖，何健飛.高效液相色譜法測(cè)定桑葉中蘆丁的含量[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22（3）：468-469.

[10]郭紅霞，謝文劍，曹藝，等.RP-HPLC測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2014，21（4）：17-19.

[11]徐韌柳，李麗華，康懷萍.RP-HPLC測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2005，12（1）：53-54.

[12]孫蓮，張麗靜，孟磊，等.RP-HPLC法測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中草藥，2003，34（1）：78-79.

[13]嚴(yán)安定，袁野，吳亮，等.HPLC法同時(shí)測(cè)定桑葉中蘆丁、異槲皮苷、紫云英苷的含量[J].安徽醫(yī)藥，2011，15（3）：296-298.

[14]吳羽艷.桑葉中總黃酮的含量測(cè)定方法研究[J].輕工科技，2013，（4）：43-44.

[15]張亮亮，汪詠梅，徐曼，等.不同品種桑葉多酚和黃酮含量變化規(guī)律研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2013，24（5）：1064-1066.

[16]張強(qiáng)，孫長(zhǎng)波，張晶.桑葉中多糖和總黃酮的含量測(cè)定[J].吉林農(nóng)業(yè)·學(xué)術(shù)版，2011，（3）：73-74.

[17]李強(qiáng)，杜思邈，張忠亮，等.中藥指紋圖譜技術(shù)進(jìn)展及未來(lái)發(fā)展方向展望[J].中草藥，2013，44（22）：3095-3104.

（收稿日期：2014-04-08本文編輯：李亞聰）

[作者簡(jiǎn)介] 彭麗英（1977-），女，湖南懷化人，本科，主管中藥師，主要從事中藥鑒定與中藥調(diào)劑、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的教學(xué)與科研工作

▲通訊作者：楊先國(guó)（1977-），男，湖南桃源人，講師，博士，主要研究方向?yàn)橹兴庤b定與質(zhì)量控制研究

2.5 指紋圖譜的建立

2.5.1 指紋圖譜共有模式的建立取桑葉藥材樣品11批，按照2.2下方法制備供試品溶液，分別進(jìn)樣1 μl，記錄UPLC色譜圖。采用國(guó)家藥典委員會(huì)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件（2.0版）進(jìn)行分析，生成共有模式指紋圖譜，有15個(gè)共有峰（圖1），其中以峰10（S峰）為參照物，其余各共有峰與峰10的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)保留面積見(jiàn)表2。

2.5.2 共有峰的確定11批桑葉藥材樣品導(dǎo)入軟件，得共有指紋圖譜（圖2），對(duì)照品溶液的色譜圖見(jiàn)圖3，經(jīng)與對(duì)照品對(duì)照，指認(rèn)10、11、12號(hào)峰分別為異槲皮苷、蘆丁、紫云英苷。

2.5.3 指紋圖譜的相似度評(píng)價(jià)上述11批桑葉樣品相似度計(jì)算結(jié)果依次為0.970、0.968、0.967、0.896、0.941、0.983、0.983、0.918、0.964、0.994、0.989、0.989，以上數(shù)據(jù)表明桑葉各批次相似性較好。

3 討論

本次實(shí)驗(yàn)選用UPLC開展桑葉指紋圖譜研究，與HPLC相比，UPLC方法快速簡(jiǎn)便、穩(wěn)定可靠。本次桑葉指紋圖譜實(shí)驗(yàn)分析時(shí)間在22 min內(nèi)，更加快捷和節(jié)約溶劑。

本實(shí)驗(yàn)根據(jù)桑葉中主要成分為黃酮類、酚酸類化合物，在75%甲醇中有相對(duì)較好的溶解度，選擇75%甲醇超聲，樣品前處理簡(jiǎn)單、可控；樣品呈弱酸性，選擇極低濃度的磷酸水溶液作為水相；選擇甲醇作為有機(jī)相來(lái)分析中藥桑葉，與乙腈相比更加安全和便宜；波長(zhǎng)選擇358 nm也是基于主要化合物在該波長(zhǎng)處吸收相對(duì)最大，且雜質(zhì)干擾較少；梯度選擇均一梯度變化以保證樣品具有更好的重復(fù)性。

相似度結(jié)果表明，不同批次桑葉樣品相似度計(jì)算結(jié)果均＞0.85，表明所收集的桑葉藥材質(zhì)量相對(duì)均一穩(wěn)定，當(dāng)然也與藥用桑葉樣品只有一種來(lái)源有關(guān)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：279.

[2]李超，潘建明，羅新根，等.桑葉消渴膠囊對(duì)2型糖尿病大鼠的影響[J].海南醫(yī)學(xué)，2012，23（2）：18-20.

[3]陳建國(guó)，步文磊.桑葉多糖降糖作用及其機(jī)制研究[J].中草藥，2011，42（3）：515-520.

[4]羅存敏.桑葉提取物對(duì)小鼠血糖的影響及其有效成份測(cè)定[J].蠶業(yè)科學(xué)，2005，31（4）：418-421.

[5]閻百傳.霜桑葉穩(wěn)定了我的血壓[J].長(zhǎng)壽，2008，（12）：43.

[6]王燦，左艇，王琳琳.桑葉黃酮抗皮膚衰老實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，8（3）：30-32.

[7]楊燕，王洪慶，陳若蕓.桑葉中的黃酮類化合物[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2010，（1）：77-81.

[8]周美環(huán)，趙書楷，陳淼，等.HPLC法測(cè)定桑葉中蘆丁的含量[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，12（5）：228-229.

[9]雷霖，何健飛.高效液相色譜法測(cè)定桑葉中蘆丁的含量[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22（3）：468-469.

[10]郭紅霞，謝文劍，曹藝，等.RP-HPLC測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2014，21（4）：17-19.

[11]徐韌柳，李麗華，康懷萍.RP-HPLC測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2005，12（1）：53-54.

[12]孫蓮，張麗靜，孟磊，等.RP-HPLC法測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中草藥，2003，34（1）：78-79.

[13]嚴(yán)安定，袁野，吳亮，等.HPLC法同時(shí)測(cè)定桑葉中蘆丁、異槲皮苷、紫云英苷的含量[J].安徽醫(yī)藥，2011，15（3）：296-298.

[14]吳羽艷.桑葉中總黃酮的含量測(cè)定方法研究[J].輕工科技，2013，（4）：43-44.

[15]張亮亮，汪詠梅，徐曼，等.不同品種桑葉多酚和黃酮含量變化規(guī)律研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2013，24（5）：1064-1066.

[16]張強(qiáng)，孫長(zhǎng)波，張晶.桑葉中多糖和總黃酮的含量測(cè)定[J].吉林農(nóng)業(yè)·學(xué)術(shù)版，2011，（3）：73-74.

[17]李強(qiáng)，杜思邈，張忠亮，等.中藥指紋圖譜技術(shù)進(jìn)展及未來(lái)發(fā)展方向展望[J].中草藥，2013，44（22）：3095-3104.

（收稿日期：2014-04-08本文編輯：李亞聰）

[作者簡(jiǎn)介] 彭麗英（1977-），女，湖南懷化人，本科，主管中藥師，主要從事中藥鑒定與中藥調(diào)劑、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的教學(xué)與科研工作

▲通訊作者：楊先國(guó)（1977-），男，湖南桃源人，講師，博士，主要研究方向?yàn)橹兴庤b定與質(zhì)量控制研究

2.5 指紋圖譜的建立

2.5.1 指紋圖譜共有模式的建立取桑葉藥材樣品11批，按照2.2下方法制備供試品溶液，分別進(jìn)樣1 μl，記錄UPLC色譜圖。采用國(guó)家藥典委員會(huì)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件（2.0版）進(jìn)行分析，生成共有模式指紋圖譜，有15個(gè)共有峰（圖1），其中以峰10（S峰）為參照物，其余各共有峰與峰10的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)保留面積見(jiàn)表2。

2.5.2 共有峰的確定11批桑葉藥材樣品導(dǎo)入軟件，得共有指紋圖譜（圖2），對(duì)照品溶液的色譜圖見(jiàn)圖3，經(jīng)與對(duì)照品對(duì)照，指認(rèn)10、11、12號(hào)峰分別為異槲皮苷、蘆丁、紫云英苷。

2.5.3 指紋圖譜的相似度評(píng)價(jià)上述11批桑葉樣品相似度計(jì)算結(jié)果依次為0.970、0.968、0.967、0.896、0.941、0.983、0.983、0.918、0.964、0.994、0.989、0.989，以上數(shù)據(jù)表明桑葉各批次相似性較好。

3 討論

本次實(shí)驗(yàn)選用UPLC開展桑葉指紋圖譜研究，與HPLC相比，UPLC方法快速簡(jiǎn)便、穩(wěn)定可靠。本次桑葉指紋圖譜實(shí)驗(yàn)分析時(shí)間在22 min內(nèi)，更加快捷和節(jié)約溶劑。

本實(shí)驗(yàn)根據(jù)桑葉中主要成分為黃酮類、酚酸類化合物，在75%甲醇中有相對(duì)較好的溶解度，選擇75%甲醇超聲，樣品前處理簡(jiǎn)單、可控；樣品呈弱酸性，選擇極低濃度的磷酸水溶液作為水相；選擇甲醇作為有機(jī)相來(lái)分析中藥桑葉，與乙腈相比更加安全和便宜；波長(zhǎng)選擇358 nm也是基于主要化合物在該波長(zhǎng)處吸收相對(duì)最大，且雜質(zhì)干擾較少；梯度選擇均一梯度變化以保證樣品具有更好的重復(fù)性。

相似度結(jié)果表明，不同批次桑葉樣品相似度計(jì)算結(jié)果均＞0.85，表明所收集的桑葉藥材質(zhì)量相對(duì)均一穩(wěn)定，當(dāng)然也與藥用桑葉樣品只有一種來(lái)源有關(guān)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：279.

[2]李超，潘建明，羅新根，等.桑葉消渴膠囊對(duì)2型糖尿病大鼠的影響[J].海南醫(yī)學(xué)，2012，23（2）：18-20.

[3]陳建國(guó)，步文磊.桑葉多糖降糖作用及其機(jī)制研究[J].中草藥，2011，42（3）：515-520.

[4]羅存敏.桑葉提取物對(duì)小鼠血糖的影響及其有效成份測(cè)定[J].蠶業(yè)科學(xué)，2005，31（4）：418-421.

[5]閻百傳.霜桑葉穩(wěn)定了我的血壓[J].長(zhǎng)壽，2008，（12）：43.

[6]王燦，左艇，王琳琳.桑葉黃酮抗皮膚衰老實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，8（3）：30-32.

[7]楊燕，王洪慶，陳若蕓.桑葉中的黃酮類化合物[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2010，（1）：77-81.

[8]周美環(huán)，趙書楷，陳淼，等.HPLC法測(cè)定桑葉中蘆丁的含量[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，12（5）：228-229.

[9]雷霖，何健飛.高效液相色譜法測(cè)定桑葉中蘆丁的含量[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22（3）：468-469.

[10]郭紅霞，謝文劍，曹藝，等.RP-HPLC測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2014，21（4）：17-19.

[11]徐韌柳，李麗華，康懷萍.RP-HPLC測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2005，12（1）：53-54.

[12]孫蓮，張麗靜，孟磊，等.RP-HPLC法測(cè)定桑葉中綠原酸的含量[J].中草藥，2003，34（1）：78-79.

[13]嚴(yán)安定，袁野，吳亮，等.HPLC法同時(shí)測(cè)定桑葉中蘆丁、異槲皮苷、紫云英苷的含量[J].安徽醫(yī)藥，2011，15（3）：296-298.

[14]吳羽艷.桑葉中總黃酮的含量測(cè)定方法研究[J].輕工科技，2013，（4）：43-44.

[15]張亮亮，汪詠梅，徐曼，等.不同品種桑葉多酚和黃酮含量變化規(guī)律研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2013，24（5）：1064-1066.

[16]張強(qiáng)，孫長(zhǎng)波，張晶.桑葉中多糖和總黃酮的含量測(cè)定[J].吉林農(nóng)業(yè)·學(xué)術(shù)版，2011，（3）：73-74.

[17]李強(qiáng)，杜思邈，張忠亮，等.中藥指紋圖譜技術(shù)進(jìn)展及未來(lái)發(fā)展方向展望[J].中草藥，2013，44（22）：3095-3104.

（收稿日期：2014-04-08本文編輯：李亞聰）

[作者簡(jiǎn)介] 彭麗英（1977-），女，湖南懷化人，本科，主管中藥師，主要從事中藥鑒定與中藥調(diào)劑、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的教學(xué)與科研工作

▲通訊作者：楊先國(guó)（1977-），男，湖南桃源人，講師，博士，主要研究方向?yàn)橹兴庤b定與質(zhì)量控制研究