辛 穎

子宮內膜腺癌中熱休克蛋白70、90的表達及其臨床意義

辛 穎

目的 分析子宮內膜腺癌組織中的熱休克蛋白70、90的表達和其臨床意義。方法 使用免疫組化Envision法和圖像分析儀，檢測正常子宮內膜、增生過長子宮內膜以及子宮內膜腺癌中的熱休克蛋白70、90的表達。結果 子宮內膜腺癌中的熱休克蛋白70表達灰度值為（209．05±5．35），比正常內膜（145．20±4．08）明顯更高，差異顯著，具有統(tǒng)計學意義（P＜0．05）。其與增生過長內膜（148．58±4．22）相比也有顯著性差異（P＜0．05）；子宮內膜腺癌中熱休克蛋白90其表達灰度值為（166．87±5．70），與正常子宮內膜（208．56±3．13）和增生過長子宮內膜（249．72±4．62）差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0．05）。結論 熱休克蛋白70、90與子宮內膜腺癌的發(fā)生有密切關系，并對子宮內膜腺癌的診斷及判斷腫瘤的惡性程度以及治療有參考價值。

子宮內膜腺癌；熱休克蛋白；免疫組織化學

子宮內膜癌是發(fā)生于子宮內膜的一組上皮性惡性腫瘤，以來源于子宮內膜腺體的腺癌最常見[1]。為女生生殖道三大惡性腫瘤之一，出現概率最高的年齡段是58～61歲，分為雌激素依賴性和非雌激素依賴性兩種發(fā)病機制[2]。但是關于子宮內膜病變的分子病理學機制的了解還非常少。熱休克蛋白體系中熱休克蛋白(heat shock protein， HSP) 70、90與腫瘤的發(fā)生具有相關性。本次研究中使用免疫組織化學法以及圖像分析儀對子宮內膜腺癌組織當中的熱休克蛋白70、90表達方式以及臨床意義進行了探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取大連大學附屬中山醫(yī)院2013年10月～2014年5月入院進行子宮切除或者內膜刮除的正常子宮內膜、增生過長子宮內膜與子宮內膜腺癌標本的蠟塊，正常內膜50例，年齡34～63歲，平均年齡（54.00±5.39）歲；增生過長內膜55例，平均年齡（52.00±6.77）歲，子宮內膜腺癌45例，年齡33～64歲，平均年齡（53.00±6.80）歲。所有研究標本全部經過HE染色，經過病理學檢測確診，子宮內膜腺癌患者在手術前均未經化療，所有患者手術前半年均未使用過雌激素藥物，也無合并任何其他惡性腫瘤。

1.2 方法 所有檢測標本當中的熱休克蛋白70、90表達，全部使用Envision免疫組化染色法做檢測，把石蠟切片經過二甲苯做脫蠟操作、梯度酒精入水和PSB沖洗之后，將其放在微波爐中加入0.01 mol/L的枸櫞酸鈉緩沖液做抗原修復操作，每次持續(xù)時間5 min，一共進行2次。待其自然冷卻之后，再另外加入30 mL/L的過氧化氫放置在常溫環(huán)境中0.5 h，封閉內源性過氧化物酶。之后再使用20 mL/L的正常指標山羊血清將非特異性抗原封閉10 min。

使用濾紙將血清吸去，各加入兔抗人熱休克蛋白70、90抗體her山羊抗兔IgG，之后使用DAB做顯色，同時還有蘇水精復染、脫水、透明以及樹膠封片等。

1.3 統(tǒng)計學方法 結果選擇LeicaQ 500 Mc當成圖像分析儀，對其做半定量操作分析，另外一種灰度值對結果的差異進行判定。本組數據采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件對數據進行處理與分析，正態(tài)計量資料結果用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

子宮內膜腺癌中，HSP 70的表達相比正常子宮內膜以及增生過長子宮內膜明顯更強，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；子宮內膜腺癌中HSP 90表達和正常內膜以及增生過長子宮內膜相比明顯減弱，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，見表1）。

表1 不同子宮內膜中熱休克蛋白70、90的表達

3 討論

熱休克蛋白是機體細胞在一些理化因素刺激后高效表達的一組蛋白質，又稱為應激蛋白(stress protein，CSP)或分子伴侶(Chaperones)。HSP是生物細胞（包括原核細胞及真核細胞）在受熱、生物應激、理化因素等應激原刺激后，發(fā)生熱休克反應時所產生的一類在生物進化中最保守并由熱休克基因編碼的伴隨細胞蛋白。因最先發(fā)現于果蠅唾液腺的熱應激反應中而得名?，F在已經有研究結果顯示，熱休克蛋白和腫瘤的出現以及腫瘤細胞的增殖和調亡有密切聯系[3-4]。熱休克蛋白70是進化上高度保守的一種的蛋白質，具有細胞保護及抗細胞凋亡功能，并參與免疫調節(jié)。熱休克蛋白90參與細胞中眾多信號蛋白的構象成熟和功能穩(wěn)定的調控，而這些信號蛋白的過度表達或突變能促進腫瘤細胞的增殖及存活。

子宮內膜腺癌中熱休克蛋白70的表達對于腫瘤細胞的損傷保護性明顯，內膜腺癌組織中的熱休克蛋白90表達有明確的抗腫瘤活性，并與腫瘤細胞有高親和力，可選擇性地殺傷腫瘤細胞。研究表明，當子宮內膜腺癌中的熱休克蛋白HSP 70表達越高時，相應的熱休克蛋白90表達就會越弱，其細胞分化程度也更低，臨床表現的惡性程度也相應的越高[5]。所以熱休克蛋白70、90可以作為對子宮內膜腺癌的診斷及判斷腫瘤的惡性程度的一項重要生物學指標。對控制熱休克蛋白70、90的表達能夠有效的抑制腫瘤細胞增生和促進腫瘤細胞的凋亡，將其和腫瘤化療藥物結合能夠有效提升子宮內膜腺癌的臨床治療效果[6]。

本研究中，正常子宮內膜和增生過長子宮內膜中均有熱休克蛋白70、90表達，與前期的報道一致[8]，提示熱休克蛋白70、90對維持正常子宮內膜的生長和功能具有積極作用。與正常子宮內膜和增生過長子宮內膜相比，熱休克蛋白70在子宮內膜腺癌中表達量增加，熱休克蛋白90表達量下降，提示熱休克蛋白70、90表達對內膜腺癌細胞的生長的作用不同。目前有研究表明，熱休克蛋白90在膽囊癌及乳腺癌組織中高表達[7-8]，但本研究中，子宮內膜腺癌組織中熱休克蛋白90表現為低表達，其機制仍有待進一步研究。

本次研究結果顯示，在子宮內膜腺癌中，熱休克蛋白70高表達，而熱休克蛋白90低表達。說明熱休克蛋白70、90與子宮內膜腺癌的發(fā)生有密切聯系，對子宮內膜腺癌的診斷、判斷腫瘤惡性程度以及治療有一定參考價值。在今后的研究中，可以針對熱休克蛋白70、90表達與子宮內膜腺癌的臨床分期、淋巴結轉移及預后的相關性進行進一步分析。

[1] 豐有吉，沈鏗．婦產科學[M]．2版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：334．

[2] 王穎梅,薛鳳霞．年輕婦女子宮內膜癌(Ⅰ型)發(fā)病機制的研究進展[J]．實用婦產科雜志,2012,28(7)：515-518．

[3] 段律芳,李瑞珍,胡艷．熱休克蛋白10在子宮內膜癌中的表達及意義[J]．廣東醫(yī)學,2013,34(6)：928-930．

[4] 吳永梅,居來提,靳瑜,等．熱休克蛋白27在常見消化道癌及癌前病變中的表達及意義[J]．新疆醫(yī)學,2012,42(12)：18-22．

[5] 郝凡凡．MTA-1及p 73在子宮內膜癌中的表達及其臨床意義[D]．吉林大學,2013,11：92-93．

[6] 王俊巧．SULT 1A 1、SULT 1E 1在子宮內膜癌中的表達及其臨床意義[D]．新疆醫(yī)科大學,2013,8：15-17．

[7] 耿鳳勇,孫誼,錢紅綱,等．熱休克蛋白(HSP 70)在膽囊癌中的表達及其意義[J]．中國腫瘤外科雜志，2009,1(3)：143-144．

[8] 羅浩銘,孫薇,尹建元,等．熱休克蛋白90抑制劑的研究進展[J]．藥學學報,2010,45(7)：813-820．

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.35.046

遼寧 116001 大連大學附屬中山醫(yī)院（辛穎）