陳愛東 朱正日 陳東麟

海藻多糖對肝癌小鼠的相關(guān)因子作用

陳愛東 朱正日 陳東麟

目的 研究海藻多糖對肝癌小鼠模型中TNF-a和VEGF表達(dá)的影響，從而分析該藥物的臨床應(yīng)用價值。方法 采用接種H22肝癌細(xì)胞株的種植瘤小鼠模型，通過灌胃給藥大、中、小劑量的海藻多糖對其體內(nèi)腫瘤細(xì)胞生長的影響，陽性組給予豬苓多糖，模型對照組給予相同體積的0.9%氯化鈉注射液。ELISA法檢測對肝癌小鼠模型外周血血清中TNF-a和VEGF含量的影響。結(jié)果 海藻多糖各劑量組均對肝癌細(xì)胞生長有抑制作用，能夠提高肝癌小鼠外周血血清中TNF-a及減少VEGF的含量，此現(xiàn)象以中劑量為佳。結(jié)論 海藻多糖在小鼠體內(nèi)具有抑制肝癌小鼠模型癌細(xì)胞增殖和擴(kuò)散的作用。

海藻多糖；TNF-a；VEGF；肝癌

肝癌是我國常見的腹部好發(fā)的惡性腫瘤，平均患病年齡為43.7歲。肝癌惡性程度既高又發(fā)展迅速，若不積極治療或者治療方案不妥，患病后生存年限不超過半年。肝癌早期無癥狀，一旦發(fā)病表現(xiàn)出病理特征，大部分已是晚期，因此，給疾病的診治帶來了很大的困難，這也是其病死率高的另一因素，鑒于以上該疾病的特點(diǎn)，探尋一種能夠針對發(fā)病后，對其轉(zhuǎn)移和惡化有極大遏制作用的一種良藥，通過外界藥物的干預(yù)延長患者生存時間和控制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移[1]。

1 材料與方法

1.1 藥品和試劑 海藻多糖（青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院制備）；肝素鈉（靈泰藥業(yè)提供）；豬苓多糖；TNF-a和VEGF測試劑盒（哈爾濱海霞試劑公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物 SPF級健康昆明種小鼠，體重（20.0 ±2.0）g，雌雄各半，H22肝癌細(xì)胞種鼠。

1.3 儀器 電子天平（上?？萍及l(fā)展公司）；電熱恒溫水浴鍋（四川泰陽儀器公司）；微量移液器（成都儀器廠）；TD5M-WS型臺式低速離心機(jī)（北京宏遠(yuǎn)醫(yī)療器械公司）。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 將接種了H22肝癌細(xì)胞株的小鼠40只小鼠隨機(jī)分為五組，每組8只，分別對小鼠進(jìn)行灌胃給藥。藥物為海藻多糖大（200 mg/kg）劑量組、中（100 mg/kg）劑量組、?。?0 mg/kg）劑量組，陽性組給豬苓多糖100 mg/kg，模型對照組給予相同體積的0.9%氯化鈉注射液，連續(xù)給藥15 d。最后給藥當(dāng)天將小鼠處死，眼球取血，檢測血清中TNF-a和VEGF含量。海藻多糖對小鼠外周血血清TNF-a和VEGF的測定（ELISA法）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 18.0軟件處理，計量數(shù)據(jù)由（±s）表示，樣本比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

由表1實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可得，海藻多糖大、中、小劑量組對腫瘤均有抑制作用，使TNF-a的含量升高，同時使VEGF含量下降，以中劑量組最為明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

表1 海藻多糖對肝癌小鼠外周血清中TNF-a和VEGF含量的影響(±s)

表1 海藻多糖對肝癌小鼠外周血清中TNF-a和VEGF含量的影響(±s)

注：與陽性組比較*P＜0.01

組別 劑量[mg(kg·d)]TNF-a(μg/ml) VEGF(μg/ml)模型照組 - 23.0±1.5*3.4±0.4*陽性組 100 31.0±1.3*1.4±0.3*低劑量組 50 25.3±1.7*1.6±0.4*中劑量組 100 27.6±1.8*1.7±0.4*高劑量組 200 26.9±1.4*1.6±0.4*

3 討論

海藻多糖是多糖的混合物[2]。目前的研究主要集中于其所包含的糖單元及含量層次上。其重要功能大致有對機(jī)體免疫器官的調(diào)節(jié)作用、抗腫瘤、抗氧化、抗病毒、抗菌抗炎等。有資料記載，抗腫瘤作用主要是由于其可以激活機(jī)體的免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體自身的抗腫瘤能力，釋放腫瘤殺傷的生物因子，間接起到控制腫瘤增長和轉(zhuǎn)移的效果。

豬苓多糖[3]早已應(yīng)用于抗腫瘤領(lǐng)域中，本實(shí)驗(yàn)中，通過復(fù)制H22肝癌疾病模型，對照比較不同劑量對腫瘤動物的體內(nèi)相關(guān)因子檢測進(jìn)一步判斷海藻多糖拮抗癌細(xì)胞增殖的效果，結(jié)果表明，海藻多糖各劑量組對腫瘤均有抑制作用，數(shù)據(jù)顯示可以使TNF-a的含量升高，同時使VEGF含量不同程度下降，以中劑量組最為明顯，結(jié)合TNF-a和VEGF對腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)效應(yīng)可以得出，該藥物對肝癌的發(fā)生發(fā)展有一定的影響，希望通過更多的實(shí)驗(yàn)證實(shí)其具體機(jī)制。

[1] Bazan JF,Bucon KB,Hardiman G,et al.A new class of membranebound chemokine with a CX3C motif[J].Nature,2007(385):640-644.

[2] 季宇彬,高世勇,張秀娟,等.羊棲菜多糖抗腫瘤作用及其作用機(jī)制的研究[J].中國海洋藥物雜志,2004(4):7-7.

[3] 徐紅薇,李波,田景先.豬苓多糖與IL-2協(xié)同誘導(dǎo)PBMC殺傷腫瘤細(xì)胞活性的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國免疫學(xué)雜志,1998,14(2):109- 111.

R322.4+7

A

1673-5846(2014)07-0227-02

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