黃 杰顏 南王正東

康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦梗死大鼠學(xué)習(xí)記憶能力減退的影響

黃 杰1顏 南1王正東2

目的 探討康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦梗死后學(xué)習(xí)記憶功能的影響。方法 共計(jì)30只Wistar雄性大鼠，對(duì)其中20只大鼠實(shí)施線栓法制作腦梗死模型，其余10只大鼠僅給予相同手術(shù)處理而不施行動(dòng)脈栓塞，24 h后將存活并符合選擇條件的大鼠分為三組，其中腦梗死模型組16只大鼠隨機(jī)分為自由活動(dòng)組（模型組）和腦梗死康復(fù)訓(xùn)練組（康復(fù)組），8只非栓塞大鼠作為正常組；康復(fù)組于造模5 d后開始給予康復(fù)訓(xùn)練，分別在大鼠造模前、造模后5 d、康復(fù)訓(xùn)練后14、21、28 d時(shí)進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試。結(jié)果 大鼠單側(cè)腦梗死后較梗死前學(xué)習(xí)記憶功能下降（P＜0.01）；康復(fù)組不同時(shí)相的學(xué)習(xí)記憶成績(jī)較模型組恢復(fù)（P＜0.05）。結(jié)論 康復(fù)訓(xùn)練可促進(jìn)腦梗死大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的恢復(fù)。

腦梗死；學(xué)習(xí)；記憶；大鼠；康復(fù)訓(xùn)練

腦梗死是指腦部血液供應(yīng)障礙、缺血、缺氧引起的局限性腦組織的缺血性壞死或腦軟化，其發(fā)病率和病死率、致殘率都很高。而大多患者不能在有效的融栓時(shí)間窗內(nèi)到達(dá)有效溶栓。所以，康復(fù)訓(xùn)練受到廣大醫(yī)務(wù)工作者的廣泛認(rèn)可。本文就康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦梗死大鼠記憶功能的恢復(fù)做一研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar雄性大鼠，體重（250±50）g，8周齡，共30只，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。

1.2 模型制作及分組 根據(jù)Longa法制作局灶性腦梗死模型[1]。取20只大鼠分別給予水合氯醛（350 mg/kg）腹腔注射麻醉后，頸部正中切口找到右側(cè)頸總動(dòng)脈分叉處將其暴露；對(duì)將頸外動(dòng)脈分支實(shí)施熱凝，并用5-0絲線將翼腭動(dòng)脈結(jié)扎；取4-0的尼龍線尖端熱化呈圓錐狀后，將其插入頸總動(dòng)脈分叉處，進(jìn)入16～18 mm后達(dá)到大腦中動(dòng)脈起始處及大腦前動(dòng)脈近端，然后將其固定2 h后取出，完成大腦中動(dòng)脈的栓塞模型制作，縫合切口。術(shù)中恒溫水袋保證大鼠直腸溫度維持在（37.0±1.0）℃。另外10只大鼠僅實(shí)施手術(shù)不做插線栓塞，處理側(cè)均選右側(cè)。右側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血模型成功動(dòng)物的入選標(biāo)準(zhǔn)：動(dòng)物蘇醒后，提尾試驗(yàn)時(shí)表現(xiàn)左側(cè)前肢內(nèi)收屈曲，同側(cè)Horner征；爬行時(shí)向左劃圈；站立時(shí)左側(cè)傾倒者列入研究對(duì)象。符合條件共計(jì)16只，隨機(jī)分為兩組即腦梗死自由活動(dòng)組（模型組）和腦梗死康復(fù)訓(xùn)練組（康復(fù)組），未行栓塞大鼠，存活8只，為正常組。模型組不施加任何訓(xùn)練，任其在康復(fù)訓(xùn)練器中自由爬行；康復(fù)組于術(shù)后第5天開始接受康復(fù)訓(xùn)練；正常組亦不施加任何處理。所有動(dòng)物均保證能夠自由獲得食物和水。

1.3 康復(fù)訓(xùn)練 康復(fù)組于第5天后置于滾筒式圓主形網(wǎng)狀儀上。滾筒式網(wǎng)狀訓(xùn)練器為長(zhǎng)100 cm，直徑60 cm的圓形網(wǎng)狀儀器，中間分為4個(gè)格，可同時(shí)訓(xùn)練4只大鼠，底座有一固定架，一端有一手搖柄，可手搖按5 r/min進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng)訓(xùn)練，將大鼠放入該容器內(nèi)可訓(xùn)練大鼠的抓握、旋轉(zhuǎn)、行走等功能。

1.4 學(xué)習(xí)記憶的行為學(xué)研究方法 采用國(guó)際通用方法Morris水迷宮測(cè)試[2]，觀察指標(biāo)為逃避潛伏期。分別在大鼠造模前、造模后5 d、康復(fù)訓(xùn)練后14、21和28 d時(shí)進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試。Morris水迷宮為一直徑150 cm、高70 cm的圓池，內(nèi)有乳白色溶液，水深47 cm。池壁上標(biāo)有東南西北4個(gè)入水點(diǎn)，將水池分為4個(gè)象限。將大鼠分別從4個(gè)入水點(diǎn)放入水中，記錄2 min內(nèi)尋找到平臺(tái)時(shí)間。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件統(tǒng)一錄入分析，組間采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在造模前后不同時(shí)段，分別對(duì)三組大鼠進(jìn)行Morris水迷宮行為測(cè)試，由表1數(shù)據(jù)顯示，大鼠單側(cè)腦梗死后較梗死前學(xué)習(xí)記憶功能下降（P＜0.01）；康復(fù)組不同時(shí)相的學(xué)習(xí)記憶成績(jī)較模型組恢復(fù)（P＜0.05）。無(wú)論是模型組還是康復(fù)組，腦梗死大鼠隱匿平臺(tái)逃避潛伏期與正常組比較明顯延長(zhǎng)，康復(fù)組大鼠與模型組大鼠比較其隱匿平臺(tái)逃避潛伏期顯著性縮短（P＜0.05；P＜0.01）。

表1 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)潛伏期比較(±s)

表1 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)潛伏期比較(±s)

注：與正常組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

組別 例數(shù) 造模前 造模后5d 造模后14d 造模后21d 造模后28d康復(fù)組 8 89±13**83±12**73±16**67±14*#60±7*##模型組 8 94±7**94±13*87±9**89±17**85±11**正常組 8 62±15 55±11 51±12 43±10 40±10

3 討論

腦梗死又稱缺血性腦卒中，腦梗死后腦組織的壞死、軟化，導(dǎo)致部分腦功能障礙，高級(jí)智能活動(dòng)受到影響。國(guó)內(nèi)學(xué)者發(fā)現(xiàn)，康復(fù)訓(xùn)練對(duì)大鼠記憶功能的恢復(fù)有促進(jìn)作用[3]。本文通過(guò)比較三組不同大鼠隱匿平臺(tái)逃避潛伏期發(fā)現(xiàn)，與正常組大鼠相比腦梗死大鼠其隱匿平臺(tái)逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)，而接受康復(fù)訓(xùn)練的腦梗死大鼠（康復(fù)組）與未接受康復(fù)訓(xùn)練大鼠（模型組）相比較，隱匿平臺(tái)逃避潛伏期明顯縮短。提示，腦梗死后大鼠學(xué)習(xí)記憶能力減弱，康復(fù)訓(xùn)練可以提高大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步表明，腦梗死后大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力大幅下降，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的康復(fù)訓(xùn)練腦梗死大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能較未接受康復(fù)訓(xùn)練大鼠有顯著提高，從而證實(shí)了康復(fù)訓(xùn)練對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能的恢復(fù)有重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死致運(yùn)動(dòng)皮質(zhì)損傷后，康復(fù)訓(xùn)練能使腦損傷的周邊區(qū)發(fā)生功能重組，非損傷區(qū)在運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)上發(fā)揮重要作用[4]。

[1] Longa EZ,Weinstein PR,Carlson S,et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J].Stroke,1989,20(1): 84-91.

[2] Morris RGM.Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat[J].J Neurosci Meth,1984,11(1):47-60.

[3] 李玲,徐莉,袁華,等.康復(fù)訓(xùn)練促進(jìn)腦梗死大鼠記憶功能的恢復(fù)[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2000,21(12):1555-1558.

[4] 高謙.康復(fù)訓(xùn)練促進(jìn)缺血性腦梗死后運(yùn)動(dòng)恢復(fù)的神經(jīng)基礎(chǔ)研究新進(jìn)展[J].現(xiàn)代康復(fù),1998,2(6):544-545.

R743.33

A

1673-5846(2014)07-0106-02

1沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110011

2沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院解剖教研室，遼寧沈陽(yáng) 110011