龔惠娥

龔惠娥

目的 通過使用中藥補腦止散，研究采用戊四氮致大鼠海馬谷氨酸（Glu）和氨酪酸（GABA）含量的變化，從而探討中藥補腦止散治療癲的作用機制。方法 將90只正常大鼠隨機抽取15只作為空白對照組，剩余75只大鼠腹腔注射戊四氮制作癲點燃模型，從造模成功的大鼠中隨機選取50只分為模型組、丙戊酸鈉組、中藥補腦止散大劑量組、中劑量組和小劑量組，每組10只。給藥7d和15d后分別處死各組一半實驗大鼠，取其海馬切片，檢測切片中Glu和GABA含量。結(jié)果 與模型組相比，中、大劑量組和小劑量組海馬神經(jīng)元Glu含量均顯著降低，GABA含量有明顯的升高。結(jié)論 中藥補腦止散能對戊四氮慢性點燃癲大鼠中海馬中Glu和GABA含量進行調(diào)節(jié)，提高GABA含量，降低Clu含量，達到治療癲的作用。

癲；中藥；補腦止散；谷氨酸；氨酪酸

1 材料與方法

1.1 材料 選取健康成年SD大鼠90只，雄性，質(zhì)量（200±12）g，一般條件飼養(yǎng)。所有大鼠體重、飼養(yǎng)條件等一般狀況無顯著差異，具有可比性。

1.3 方法

1.3.1 建模方法 每天上午給予大鼠腹腔注射戊四氮（PTZ）35mg/kg，注射后觀察大鼠行為變化60min[3]。根據(jù)Racine分級標準，其將大鼠行為分為6級[4]。若大鼠連續(xù)5d出現(xiàn)4級以上發(fā)作定義為模型點燃成功。將90只大鼠編號，隨機抽取15只作為空白對照組，剩余75只大鼠腹腔注射戊四氮制作癲點燃模型，從造模成功的大鼠中隨機選取50只分為五組，每組10只，即模型組、丙戊酸鈉組、中藥補腦止散大劑量組（以下稱大劑量組）、中藥補腦止散中劑量組（以下稱中劑量組）和中藥補腦止散小劑量組（以下稱小劑量組），建模選取的50只大鼠病情狀況差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。灌胃治療劑量按體表面積比進行折算，折算后中藥補腦止散大、中、小劑量組分別給予1.6g/kg、0.8g/kg和0.4g/kg灌胃治療[5-6]。丙戊酸鈉組大鼠給予丙戊酸鈉等效劑量15.75mg/kg，空白對照組和模型組大鼠灌服等體積0.9%氯化鈉注射液，每天用藥一次，連續(xù)治療30d。

1.3.2 標本采集 灌胃治療7d后，將六組各取一半大鼠給予麻醉，然后開胸暴露心臟，先對大鼠實施灌注后開顱取腦，然后將其固定，切取海馬段腦組織，最后進行石蠟包埋，切片[7]。封片后在高倍鏡下觀察并拍照進行分析，計算GABA和Glu陽性神經(jīng)元的平均灰度值，并記錄數(shù)據(jù)[8]。同樣方法在灌胃15d后將各組剩余大鼠用上述方法獲取GABA和Glu陽性神經(jīng)元的平均灰度值，并記錄數(shù)據(jù)。

1.4 觀察指標 對大鼠海馬谷氨酸（Glu）和氨酪酸（GABA）含量進行觀察計算。

1.5 統(tǒng)計學分析 選擇SPSS 18.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，數(shù)據(jù)采用±s表示，均數(shù)的比較采用t檢驗，當P＜0.05時，差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

表1 第1、7、15天各組發(fā)作等級及頻率比較

2.2 Glu和GABA含量變化 在鏡下觀察及運用圖像分析技術(shù)，對GABA和Glu陽性神經(jīng)元的平均灰度值進行了記錄，分析可知，中、大劑量組與丙戊酸鈉組的Glu和GABA含量比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；大、中、小劑量組海馬神經(jīng)元Glu含量和GABA含量與模型組相比分別顯著降低和明顯升高，且大、中劑量組的變化幅度明顯大于小劑量組的變化幅度，見表2。

表2 第7、15天大鼠海馬Glu陽性細胞GABA陽性細胞平均灰度值(±s)

表2 第7、15天大鼠海馬Glu陽性細胞GABA陽性細胞平均灰度值(±s)

注：第7天大劑量組與模型組Glu含量相比t=4.9296，P=0.0012；大劑量組與模型組Glu含量相比t=8.3018，P＜0.01。第5天大劑量組與模型組Glu含量相比t=5.4627，P=0.0006；大劑量組與模型組Glu含量相比t=20.5498，P＜0.01

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3 討論

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R285.5

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1673-5846(2014)06-0032-03

長沙市第一醫(yī)院藥劑科，湖南長沙 410005

龔惠娥（1975-），本科學歷，副主任中藥師。研究方向：藥事管理。Tel：15273152098，E-mail：275271941@qq.com