武中平　盧劍

摘要：采用氣相色譜-火焰光度法測定了茄子、番茄、辣椒中甲基毒死蜱殘留量。測定取得滿意的結(jié)果，該方法平均加標回收率為81.8%～98.1%，相對標準偏差為3.2%～8.3%，檢出限為0.01 mg/kg。

關(guān)鍵詞：茄果類蔬菜；甲基毒死蜱；殘留量；氣相色譜-火焰光度檢測法

中圖分類號： S481+.8 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0260-02

收稿日期：2013-08-13

基金項目：江蘇省地方標準制定項目（編號：蘇質(zhì)技監(jiān)標發(fā)[2006]171 號文）。

作者簡介：武中平（1974—），男，湖南常德人，碩士，高級工程師，主要從事食品相關(guān)產(chǎn)品檢驗技術(shù)研究。Tel：（025）84470314；E-mail：jszj_wzp@139.com。甲基毒死蜱是一種硫代磷酸酯類殺蟲劑，具有觸殺、胃毒和熏蒸作用，主要用于防治各種葉類作物上和貯藏谷物中的害蟲，也可用于防治蚊、蠅等衛(wèi)生害蟲，應用較為廣泛。

甲基毒死蜱主要是通過抑制昆蟲體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活性而導致神經(jīng)信號傳導阻滯，進一步引起昆蟲死亡。有研究表明，甲基毒死蜱對人紅細胞膜乙酰膽堿酯酶也有明顯抑制作用[1-2]。鑒于此，不少國家和組織，如中國、日本、歐盟都制定了部分農(nóng)產(chǎn)品中甲基毒死蜱的最大殘留限量，中國規(guī)定甲基毒死蜱殘留量大白菜≤0.1 mg/kg、結(jié)球甘藍≤0.1 mg/kg、韭菜和其他葉菜類蔬菜≤0.5 mg/kg；日本規(guī)定大白菜≤0.1 mg/kg、番茄≤0.5 mg/kg；歐盟規(guī)定大米≤0.01 mg/kg、蔬菜、甜菜≤0.03 mg/kg。另外，歐盟經(jīng)過嚴格的安全評價，準備將茄子上甲基毒死蜱的允許殘留量定為1.0 mg/kg[3]。

目前，已有不少研究者對水體、土壤、糧食作物、甘藍、茶葉、果汁、水果等基質(zhì)中甲基毒死蜱殘留量的測定進行了研究，建立了高效液相色譜[4]、超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜[5]、氣相色譜-電子捕獲[6-7]、氣相色譜-火焰光度[8-11]、氣相色譜質(zhì)譜[12-14]等測定方法。但茄子、番茄、辣椒等茄果類蔬菜中甲基毒死蜱殘留量的測定還鮮有報道[15]。本試驗重點研究樣品前處理方法和色譜操作條件，為建立茄果類蔬菜中甲基毒死蜱殘留檢測方法與標準提供參考。

1材料與方法

1.1供試材料與試劑

茄子、番茄、辣椒購于超市。乙腈，色譜純；丙酮，分析純，使用前重蒸；氯化鈉，優(yōu)級純；無水硫酸鈉，分析純，在 650 ℃ 灼燒4 h，貯于干燥器中，冷卻后備用；磷酸三苯酯，分析純；甲基毒死蜱標準物質(zhì)，純度≥99%，由中國計量科學研究院提供。甲基毒死蜱標準溶液：稱取甲基毒死蜱標準物質(zhì)0025 g（精確至 0.000 2 g）于25 mL容量瓶中，加丙酮超聲振蕩溶解，并定容至刻度，搖勻，配制成標準溶液。磷酸三苯酯丙酮溶液：稱取磷酸三苯酯0.025 g（精確至 0.000 2 g）于25 mL容量瓶中，加丙酮超聲振蕩溶解，并定容至刻度，搖勻，配制成磷酸三苯酯丙酮儲備溶液。根據(jù)需要將磷酸三苯酯丙酮儲備溶液稀釋成磷酸三苯酯丙酮溶液。

1.2儀器與設備

6890N氣相色譜儀配火焰光度檢測器（FPD）、化學工作站（美國Agilent公司）；氮吹儀（美國Organomation Associates公司）；分析天平：感量為0.000 1 g和0.01 g；超聲波清洗器；組織搗碎機。

1.3試驗方法

1.3.1樣品制備、提取取擦干凈（不可水洗）的茄子、番茄、辣椒的可食部分，將其切成約2 cm×2 cm的小塊，取小塊樣品 500 g，用組織搗碎機搗碎并混合均勻，裝入潔凈的容器內(nèi)作為試樣，密封并標記。將試樣置于-18 ℃ 避光保存。稱取 25 g 試樣（精確至 0.02 g）于100 mL錐形瓶Ⅰ中，向錐形瓶Ⅰ中加入50 mL乙腈，置于超聲波清洗器中超聲提取 20 min，過濾，將濾液轉(zhuǎn)移到100 mL具塞量筒中（預裝5 g氯化鈉），劇烈振蕩 3 min，靜置30 min。準確移取10 mL上層清液，使之通過裝有2 cm厚的無水硫酸鈉層的濾紙進入 100 mL 錐形瓶Ⅱ，用5 mL乙腈洗滌無水硫酸鈉層，收集、合并乙腈于錐形瓶Ⅱ，于65 ℃水浴中氮氣吹干，用 1 mL 磷酸三苯酯丙酮溶液溶解殘渣，超聲1 min，用有機濾膜過濾，供氣相色譜測定。

1.3.2氣相色譜分析條件色譜柱：DB-35ms石英毛細管色譜柱，30 m×0.25 mm×0.25 m；柱溫：起始150 ℃，保持 2 min，以10 ℃/min升溫速率升至250 ℃，再以30 ℃/min升溫速率升至280 ℃，保持5 min；進樣口溫度：220 ℃；檢測器溫度：250 ℃；載氣：氮氣，純度99.999%，柱流速 1.2 mL/min；氫氣，流速75 mL/min；空氣，流速100 mL/min；進樣方式：不分流進樣；進樣量：1.0 L。在上述條件下，甲基毒死蜱標準溶液的氣相色譜圖如圖1所示。由圖1可見，甲基毒死蜱保留時間為10.71 min，磷酸三苯酯保留時間為 16.362 min。

1.3.3標準溶液的配制甲基毒死蜱標準工作溶液：準確移取適當體積的標準溶液于25 mL容量瓶中，加磷酸三苯酯丙酮溶液，定容至刻度，超聲振蕩，配制成濃度分別為0.16、080、8.00、20.00、100.00 mg/L甲基毒死蜱的標準工作溶液。

2結(jié)果與討論

2.1樣品前處理

對于蔬菜、水果中甲基毒死蜱的提取，一般選用乙腈、甲醇、丙酮等有機溶劑作為提取溶劑。在本試驗中，分別用乙腈和甲醇對勻漿后茄果類蔬菜樣品進行提取。發(fā)現(xiàn)用乙腈提取時，振蕩后分層明顯，而用甲醇提取時，分層不明顯，同時上清液較渾濁。分層效果明顯，有利于回收率的提高，上清液透明有利于提取液的后處理。因此，本試驗選用乙腈為茄果類蔬菜中甲基毒死蜱的提取溶劑。endprint

從各種基體中提取化學物質(zhì)時，超聲波是常用的輔助手段。本試驗在同一茄子空白樣品中，加入相同量的甲基毒死蜱標準物質(zhì)，加入相同體積的乙腈作為提取溶劑，對最佳的超聲萃取時間進行試驗。試驗結(jié)果顯示，超聲萃取時間在 20 min 時，甲基毒死蜱的檢出量達到最大，之后增加超聲萃取時間，甲基毒死蜱檢出量并沒有明顯增加，結(jié)果見表1。因此，本試驗確定對茄果類蔬菜中甲基毒死蜱的超聲萃取時間為20 min。

2.2色譜條件

用氣相色譜對甲基毒死蜱進行分析時，可選用火焰光度檢測器、電子捕獲檢測器和氮磷檢測器。在本試驗中，選用火焰光度檢測器進行測定，原因在于火焰光度檢測器對樣品前處理的要求較低，能滿足樣品快速測定的要求，同時火焰光度檢測器屬于選擇性檢測器，對有機磷農(nóng)藥的最小檢出量達10-11 g。在本試驗中，選用DB-35ms對茄果類蔬菜中甲基毒死蜱農(nóng)藥進行測定，主要是考慮柱流失較低，同時能承受較高的柱溫，減少高沸點物質(zhì)對色譜柱、檢測器的污染。

2.3線性范圍和方法檢出限

在“1.3.2”的條件下對濃度分別為0.16、0.80、8.00、2000、100.00 mg/L的甲基毒死蜱標準工作溶液分別進行測定。以濃度（x）-峰面積（y）求出線性方程：y=238.202 687x-10.367 22，相關(guān)系數(shù)為0.999 97。

本試驗對甲基毒死蜱在茄子、番茄、辣椒中的檢測限進行了測定，其中在辣椒中檢測限的氣相色譜測定譜圖見圖2。按3倍噪聲水平，得到氣相色譜檢測限為0.01 mg/kg。

2.4平均回收率及精密度

在空白茄子、番茄、辣椒（25 g樣品）中進行甲基毒死蜱的添加回收率試驗。共設3個添加水平，分別是0.01、005、0.25 mg/kg，同一添加水平在同一樣品上重復6次，按照“1.3.1”前處理方法處理之后，在“1.3.2”條件下測定，計算回收率和變異系數(shù)，結(jié)果見表2。

3結(jié)語

本試驗采用氣相色譜測定茄果類蔬菜（茄子、番茄、辣椒）中甲基毒死蜱的殘留量。該方法簡便、快速、可操作性很強，準確度、精密度和靈敏度等指標均令人滿意。本測定方法的建立為茄果類蔬菜中甲基毒死蜱殘留的標準化檢測提供了技術(shù)參考。

參考文獻：

[1]李龍，宋瑞琨，劉毓谷.甲基毒死蜱的代謝轉(zhuǎn)化機制研究[J]. 中國公共衛(wèi)生，2002，18（10）：1185-1186.

[2]朱砂，鄒俊，羅運達，等. 甲基毒死蜱對紅細胞膜乙酰膽堿酯酶的抑制作用及其與膜脂相互關(guān)系[J]. 生物化學雜志，1993，9（5）：569-573.

[3]EC.No 396/2005 European parliament and of the council to establish Annex I listing the food and feed products to which maximum levels for pesticide residues apply[S/OL]. [2013-07-20]. http：//bbs.instrument.com.cn/shtml/20110615/3364411/.

[4]張超，楊紅. 水、土壤和蔬菜中毒死蜱、甲基毒死蜱殘留檢測前處理方法[J]. 農(nóng)藥，2010，49（5）：367-370.

[5]劉輝，汪霞，何藝梅，等. 水果、蔬菜中11種有機磷農(nóng)藥殘留的快速測定[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2009（10）：2314-2316.

[6]孫大利，胡瓊波，楊峰，等. 分散固相萃取-氣相色譜法測定水果中9種農(nóng)藥殘留[J]. 華南農(nóng)業(yè)大學學報，2011，32（2）：44-47.

[7]張霞，曹艷平，季萍.水中毒死蜱和甲基毒死蜱的GC-ECD測定方法[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2010（7）：1656-1657，1659.

[8]范志先，朱杰麗，許允成，等. 甲基毒死蜱在甘藍及土壤上的殘留動態(tài)研究[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報，2003，22（2）：235-237.

[9]侯志廣，王秀梅，范志先，等. 甲基毒死蜱在甘藍及土壤上的殘留動態(tài)研究[J]. 吉林農(nóng)業(yè)大學學報，2005，27（6）：654-657.

[10]張敬平，劉文衛(wèi)，周閏，等. 氣相色譜法同時檢測生活飲用水中的27種有機磷農(nóng)藥殘留[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2010（3）：527-528.

[11]高巍，盧劍，武中平，等. 氣相色譜雙柱法測定果汁中多種有機磷類農(nóng)藥殘留量[J]. 食品科學，2010，31（4）：190-193.

[12]朱杰麗，范志先，沈翠麗，等. 氣質(zhì)聯(lián)用法測定甲基毒死蜱的水解速率[J]. 青島科技大學學報：自然科學版，2008，29（3）：210-212.

[13]陳紅平，劉新，汪慶華，等. 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定茶葉中88種農(nóng)藥殘留量[J]. 色譜，2011，29（5）：409-416.

[14]SN/T 2324—2009進出口食品中抑草磷、毒死蜱、甲基毒死蜱等33種有機磷農(nóng)藥殘留量的檢測方法[S].

[15]張征，武中平.番茄、辣椒、茄子中甲基毒死蜱殘留量測定[J]. 食品科學，2011，32（22）：257-259.endprint

從各種基體中提取化學物質(zhì)時，超聲波是常用的輔助手段。本試驗在同一茄子空白樣品中，加入相同量的甲基毒死蜱標準物質(zhì)，加入相同體積的乙腈作為提取溶劑，對最佳的超聲萃取時間進行試驗。試驗結(jié)果顯示，超聲萃取時間在 20 min 時，甲基毒死蜱的檢出量達到最大，之后增加超聲萃取時間，甲基毒死蜱檢出量并沒有明顯增加，結(jié)果見表1。因此，本試驗確定對茄果類蔬菜中甲基毒死蜱的超聲萃取時間為20 min。

2.2色譜條件

用氣相色譜對甲基毒死蜱進行分析時，可選用火焰光度檢測器、電子捕獲檢測器和氮磷檢測器。在本試驗中，選用火焰光度檢測器進行測定，原因在于火焰光度檢測器對樣品前處理的要求較低，能滿足樣品快速測定的要求，同時火焰光度檢測器屬于選擇性檢測器，對有機磷農(nóng)藥的最小檢出量達10-11 g。在本試驗中，選用DB-35ms對茄果類蔬菜中甲基毒死蜱農(nóng)藥進行測定，主要是考慮柱流失較低，同時能承受較高的柱溫，減少高沸點物質(zhì)對色譜柱、檢測器的污染。

2.3線性范圍和方法檢出限

在“1.3.2”的條件下對濃度分別為0.16、0.80、8.00、2000、100.00 mg/L的甲基毒死蜱標準工作溶液分別進行測定。以濃度（x）-峰面積（y）求出線性方程：y=238.202 687x-10.367 22，相關(guān)系數(shù)為0.999 97。

本試驗對甲基毒死蜱在茄子、番茄、辣椒中的檢測限進行了測定，其中在辣椒中檢測限的氣相色譜測定譜圖見圖2。按3倍噪聲水平，得到氣相色譜檢測限為0.01 mg/kg。

2.4平均回收率及精密度

在空白茄子、番茄、辣椒（25 g樣品）中進行甲基毒死蜱的添加回收率試驗。共設3個添加水平，分別是0.01、005、0.25 mg/kg，同一添加水平在同一樣品上重復6次，按照“1.3.1”前處理方法處理之后，在“1.3.2”條件下測定，計算回收率和變異系數(shù)，結(jié)果見表2。

3結(jié)語

本試驗采用氣相色譜測定茄果類蔬菜（茄子、番茄、辣椒）中甲基毒死蜱的殘留量。該方法簡便、快速、可操作性很強，準確度、精密度和靈敏度等指標均令人滿意。本測定方法的建立為茄果類蔬菜中甲基毒死蜱殘留的標準化檢測提供了技術(shù)參考。

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[15]張征，武中平.番茄、辣椒、茄子中甲基毒死蜱殘留量測定[J]. 食品科學，2011，32（22）：257-259.endprint

從各種基體中提取化學物質(zhì)時，超聲波是常用的輔助手段。本試驗在同一茄子空白樣品中，加入相同量的甲基毒死蜱標準物質(zhì)，加入相同體積的乙腈作為提取溶劑，對最佳的超聲萃取時間進行試驗。試驗結(jié)果顯示，超聲萃取時間在 20 min 時，甲基毒死蜱的檢出量達到最大，之后增加超聲萃取時間，甲基毒死蜱檢出量并沒有明顯增加，結(jié)果見表1。因此，本試驗確定對茄果類蔬菜中甲基毒死蜱的超聲萃取時間為20 min。

2.2色譜條件

用氣相色譜對甲基毒死蜱進行分析時，可選用火焰光度檢測器、電子捕獲檢測器和氮磷檢測器。在本試驗中，選用火焰光度檢測器進行測定，原因在于火焰光度檢測器對樣品前處理的要求較低，能滿足樣品快速測定的要求，同時火焰光度檢測器屬于選擇性檢測器，對有機磷農(nóng)藥的最小檢出量達10-11 g。在本試驗中，選用DB-35ms對茄果類蔬菜中甲基毒死蜱農(nóng)藥進行測定，主要是考慮柱流失較低，同時能承受較高的柱溫，減少高沸點物質(zhì)對色譜柱、檢測器的污染。

2.3線性范圍和方法檢出限

在“1.3.2”的條件下對濃度分別為0.16、0.80、8.00、2000、100.00 mg/L的甲基毒死蜱標準工作溶液分別進行測定。以濃度（x）-峰面積（y）求出線性方程：y=238.202 687x-10.367 22，相關(guān)系數(shù)為0.999 97。

本試驗對甲基毒死蜱在茄子、番茄、辣椒中的檢測限進行了測定，其中在辣椒中檢測限的氣相色譜測定譜圖見圖2。按3倍噪聲水平，得到氣相色譜檢測限為0.01 mg/kg。

2.4平均回收率及精密度

在空白茄子、番茄、辣椒（25 g樣品）中進行甲基毒死蜱的添加回收率試驗。共設3個添加水平，分別是0.01、005、0.25 mg/kg，同一添加水平在同一樣品上重復6次，按照“1.3.1”前處理方法處理之后，在“1.3.2”條件下測定，計算回收率和變異系數(shù)，結(jié)果見表2。

3結(jié)語

本試驗采用氣相色譜測定茄果類蔬菜（茄子、番茄、辣椒）中甲基毒死蜱的殘留量。該方法簡便、快速、可操作性很強，準確度、精密度和靈敏度等指標均令人滿意。本測定方法的建立為茄果類蔬菜中甲基毒死蜱殘留的標準化檢測提供了技術(shù)參考。

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[3]EC.No 396/2005 European parliament and of the council to establish Annex I listing the food and feed products to which maximum levels for pesticide residues apply[S/OL]. [2013-07-20]. http：//bbs.instrument.com.cn/shtml/20110615/3364411/.

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[15]張征，武中平.番茄、辣椒、茄子中甲基毒死蜱殘留量測定[J]. 食品科學，2011，32（22）：257-259.endprint