孫 雪

HPLC法測(cè)定天王補(bǔ)心丸丹參中丹參素鈉的含量

孫 雪

目的測(cè)定天王補(bǔ)心丸丹參中丹參素鈉的含量。方法用HPLC法定量測(cè)定天王補(bǔ)心丸中丹參的含量。結(jié)果丹參素鈉的線性范圍為12.8μg·mL-1～128.0μg·mL-1（r=0.9991，n=5）；平均回收率為94.6%。結(jié)論該方法準(zhǔn)確可靠，可用于天王補(bǔ)心丸丹參中丹參素鈉的含量測(cè)定。

HPLC法；天王補(bǔ)心丸；丹參素鈉

天王補(bǔ)心丸的檢驗(yàn)方法現(xiàn)收載于《中國(guó)藥典》2010年版二部[1]，由丹參等十六味中藥組成，其中丹參作為主藥，但該版藥典未對(duì)丹參進(jìn)行定量檢測(cè)，本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定天王補(bǔ)心丸丹參中丹參素鈉的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent1100高效液相色譜儀；BP110S電子天平。

1.2 試藥 甲醇為色譜純，水為純化水，其它試劑為分析純；丹參素鈉對(duì)照品（批號(hào)：11085-201205，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；天王補(bǔ)心丸（赤峰丹龍藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字 Z15021315，生產(chǎn)批號(hào)：20120908）。

2 含量測(cè)定

2.1 色譜條件[2]C18 200mm×4.65μm；以甲醇-1%冰醋酸（20:80）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為281nm；檢測(cè)器：Agilent1100 DAD檢測(cè)器；工作站型號(hào)：G2170AA G2180AA；柱溫35℃。進(jìn)樣量：10μl；流速：1.0ml/min，見(jiàn)圖1。

圖1 王補(bǔ)心丸HPLC色譜圖（a.對(duì)照品；b.樣品；c陰性對(duì)照）

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定丹參素鈉對(duì)照品適量，加甲醇配成每1ml含丹參素64μg，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取本品大蜜丸1.1g，置錐形瓶中，加50%甲醇加熱回流5h，放冷，過(guò)濾，至20ml的量瓶中，加 50%甲醇至刻度，進(jìn)樣前就0.45μm濾過(guò)。

2.4 陰性對(duì)照溶液的制備 按處方比例制成陰性對(duì)照品，同供試品的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.5 線性關(guān)系的考查 精密稱定丹參素鈉對(duì)照品0.01288g，置100ml容量瓶中，加50%甲醇溶解至刻度，搖勻，做為貯備溶液，分別吸取1、2、3、5、10ml，置10ml容量瓶中，分別加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按上述色譜條件測(cè)定，得回歸方程：Y=1.45 ×104X－9.955×103，r=0.9991。結(jié)果表明，丹參素鈉在12.8μg·mL-1～128.0μg·mL-1范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取上述對(duì)照溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積，RSD為0.75%（n=5）。結(jié)果表明儀器具有良好的精密度。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取供試品（批號(hào)：101102），照2.1方法配制5份供試液，按上述條件測(cè)定，每丸含丹參按丹參素鈉計(jì)，大蜜丸為0.560mg，RSD為0.45%（n=5）。結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一批供試品溶液各10μl，分別在0、3、6、9、12、18h測(cè)定峰面積值的變化，結(jié)果RSD為0.8%。

2.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知丹參素鈉含量的天王補(bǔ)心丸（批號(hào)：120507）6份，每份稱重約為 0.55g，分別精密加入丹參素鈉對(duì)照品溶液（0.28mg/ml）1.0ml，照2.3制備待測(cè)溶液，按2.1測(cè)定，結(jié)果平均回收率為94.6%，RSD為1.9%。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 天王補(bǔ)心丸中丹參素鈉加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

3.1 用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行掃描，結(jié)果在281nm處該溶液的吸收度最高，將測(cè)定波長(zhǎng)選定在281nm 波長(zhǎng)處，此波長(zhǎng)對(duì)紫外吸收靈敏。

3.2 在進(jìn)行含量測(cè)定時(shí)選用三種流動(dòng)相進(jìn)行比較：甲醇-水-冰醋酸（8:91:1）、以甲醇-1%冰醋酸（20:80）、甲醇-1%冰醋酸（12:88），實(shí)驗(yàn)證明采用以甲醇-1%冰醋酸（20:80）作為流動(dòng)相能得到最佳的分離效果，分離度好，保留時(shí)間合適，無(wú)拖尾現(xiàn)象。

3.3 供試品溶液的制備用分別加熱回流2h、3h、5h、6h，結(jié)果回流5h、6h有效成份提取更加完全，但是回流5h、6h結(jié)果無(wú)差別，因此選擇用回流5h。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明所用此方法能更有效地測(cè)定天王補(bǔ)心丸丹參中丹參素鈉的含量。

[1] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].一部.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:70,97,313,372.

[2] 傅黎春,李桃英,彭?xiàng)澚?HPLC法測(cè)定丹棗口服液中丹參素及原兒茶醛的含量[J].中國(guó)藥師,2009,12(1):72-73.

R927.2

A

1673-5846(2014)02-0035-02

衡水市食品藥品檢驗(yàn)所，河北衡水 053000

孫雪（1973-），女，本科，副主任藥師。