方圣博,謝湘林,劉 蕾,杜 冰,劉宏雁

(吉林大學(xué)藥學(xué)院藥理學(xué)教研室,吉林長(zhǎng)春 130021)

血栓心脈寧對(duì)β-淀粉樣蛋白致大鼠老年性癡呆的治療作用

方圣博,謝湘林,劉 蕾,杜 冰,劉宏雁

(吉林大學(xué)藥學(xué)院藥理學(xué)教研室,吉林長(zhǎng)春 130021)

目的:觀察血栓心脈寧對(duì)β-淀粉樣蛋白(Aβ)致老年性癡呆(AD)大鼠行為學(xué)及大腦皮層和海馬組織結(jié)構(gòu)的影響,探討血栓心脈寧對(duì)大鼠AD的治療作用。方法:選取100只雄性Wistar大鼠,按體質(zhì)量將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、陽(yáng)性藥組(鹽酸多奈哌齊,1.75 mg·kg－1)和血栓心脈寧1.1、2.2 g·kg－1劑量組。連續(xù)灌胃給藥15 d。大鼠海馬定位注射Aβ建立大鼠AD模型。進(jìn)行Morris水迷宮試驗(yàn)、避暗及病理學(xué)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:水迷宮試驗(yàn),與模型組比較,血栓心脈寧1.1 g·kg－1劑量組大鼠第2、4和5天到達(dá)平臺(tái)的潛伏期和游程明顯縮短(P＜0.05或P＜0.01);血栓心脈寧2.2 g·kg－1劑量組大鼠第3～6天到達(dá)平臺(tái)的潛伏期縮短(P＜0.05或P＜0.01),第3～5天到達(dá)平臺(tái)的游程明顯縮短(P＜0.05或P＜0.01);第7天血栓心脈寧各劑量組大鼠在90 s內(nèi)經(jīng)過(guò)平臺(tái)的次數(shù)、平臺(tái)停留時(shí)間、平臺(tái)區(qū)停留距離、有效區(qū)停留時(shí)間、有效區(qū)停留距離、平臺(tái)停留時(shí)間/總時(shí)間、平臺(tái)停留距離/總路程和有效區(qū)停留時(shí)間/總時(shí)間均明顯增加(P＜0.05或P＜0.01)。避暗實(shí)驗(yàn)中,與模型組比較,血栓心脈寧各劑量組大鼠第2天的錯(cuò)誤潛伏期及錯(cuò)誤次數(shù)無(wú)顯著差異(P＞0.05)。病理學(xué)觀察,血栓心脈寧各劑量組大鼠與模型組比較其病理學(xué)表現(xiàn)無(wú)明顯差異,大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞有變性、壞死;海馬神經(jīng)細(xì)胞數(shù)少,層次不清楚,可見(jiàn)變性、壞死細(xì)胞。結(jié)論:血栓心脈寧可改善AD大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能,但對(duì)其病理學(xué)病變無(wú)明顯改善作用。

血栓心脈寧;老年性癡呆;β-淀粉樣蛋白;大鼠,Wistar

血栓心脈寧的主要成分是丹參、川芎、毛冬青、水蛭、槐花、麝香、冰片、牛黃、人參莖葉皂苷和蟾酥等,因其具有開(kāi)竅醒神、活血化瘀功效而廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的治療[1]。老年性癡呆又稱為阿爾茨海默癥(Alzheimer’s disease,AD),是一種不可逆的神經(jīng)退行性疾病,主要表現(xiàn)為學(xué)習(xí)記憶障礙[2]。血栓心脈寧對(duì)AD是否有治療作用,國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)尚未見(jiàn)報(bào)道。大量研究[3-5]表明:血栓心脈寧具有很好的抗自由基氧化損傷、降低丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)水平、改善循環(huán)和抑制血栓形成等作用,這些作用機(jī)制與AD的發(fā)病機(jī)制有部分關(guān)聯(lián)[6]。認(rèn)知功能障礙和學(xué)習(xí)記憶能力下降是AD最主要的表現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)行為學(xué)(水迷宮、避暗)和病理學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察血栓心脈寧對(duì)AD大鼠的治療作用,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要藥品和儀器100只清潔級(jí)Wistar雄性大鼠,體質(zhì)量300～350 g,合格證號(hào): SCXK-(吉)2007-0003,由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。血栓心脈寧(吉林華康藥業(yè)股份有限公司提供,批號(hào):110901),鹽酸多奈哌齊(西安海欣制藥有限公司,批號(hào):111212A),β-淀粉樣蛋白25-35(amyloidβprotein 25-35,Aβ25-35)(美國(guó)Sigma公司,批號(hào):20110929)。Morris水迷宮及避暗裝置(成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品),單臂腦立體定位儀(深圳市瑞沃德生命科技有限公司,型號(hào)68001)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法在手術(shù)前隨機(jī)選取假手術(shù)組15只大鼠,再按文獻(xiàn)[7]制備大鼠AD模型。將腹腔注射10%水合氯醛(0.3 m L·100 g－1)的麻醉大鼠固定于立體定位儀上,頭頂皮膚做正中豎切口,暴露頂骨。海馬區(qū)定位坐標(biāo):前囟后3.5 mm,中線外側(cè)2.0 mm,硬腦膜下2.7 mm。每側(cè)用微量注射器分別注入5μL(10μL)聚集肽的Aβ25-35,5 min內(nèi)注完,注射后留針5 min,以免拔針時(shí)藥物溢出。假手術(shù)組手術(shù)方法相同,注射同體積的生理鹽水。術(shù)后14 d將AD大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性藥組(鹽酸多奈哌齊,1.75 mg·kg－1)、血栓心脈寧1.1和2.2 g·kg－1劑量組,每組10只。連續(xù)灌胃給藥(每日1次),15 d后進(jìn)行水迷宮試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)期間繼續(xù)給藥。由于感染等原因,動(dòng)物有死亡,各組大鼠例數(shù)不一致。水迷宮試驗(yàn)連續(xù)7 d,前6 d在1、2、3、4象限4個(gè)不同的入水點(diǎn)測(cè)定大鼠到達(dá)平臺(tái)的潛伏期、游程、朝向角及平均速度;第7天撤掉平臺(tái),測(cè)定大鼠在90 s內(nèi)經(jīng)過(guò)平臺(tái)次數(shù)、經(jīng)過(guò)有效區(qū)次數(shù)、平臺(tái)停留時(shí)間、平臺(tái)區(qū)停留距離、有效區(qū)停留時(shí)間、有效區(qū)停留距離、平臺(tái)停留時(shí)間/總時(shí)間、平臺(tái)停留距離/總路程、有效區(qū)停留時(shí)間/總時(shí)間和有效區(qū)停留距離/總路程。水迷宮試驗(yàn)結(jié)束后,進(jìn)行避暗實(shí)驗(yàn),記錄大鼠第2天進(jìn)入暗箱潛伏期和大鼠被電擊的次數(shù)(即錯(cuò)誤次數(shù))。行為學(xué)測(cè)定后,快速取鼠腦,10%甲醛固定,常規(guī)制備組織病理切片,觀察其大腦皮層和海馬組織的病理學(xué)變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 18.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。Morris水迷宮試驗(yàn)第1～6天大鼠到達(dá)平臺(tái)潛伏期、游程、朝向角及平均速度,第7天大鼠在90 s內(nèi)經(jīng)過(guò)平臺(tái)次數(shù)、經(jīng)過(guò)有效區(qū)次數(shù)、平臺(tái)停留時(shí)間、平臺(tái)區(qū)的停留距離、有效區(qū)的停留時(shí)間、有效區(qū)的停留距離、平臺(tái)停留時(shí)間/總時(shí)間、平臺(tái)停留距離/總路程、有效區(qū)停留時(shí)間/總時(shí)間和有效區(qū)停留距離/總路程,避暗實(shí)驗(yàn)大鼠第2天進(jìn)入暗箱潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)均以±s表示,組間比較采用單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠Morris水迷宮試驗(yàn)與假手術(shù)組比較,模型組大鼠第1～6天到達(dá)平臺(tái)的潛伏期明顯延長(zhǎng)(P＜0.05或P＜0.01),見(jiàn)表1;第2～5天到達(dá)平臺(tái)的游程明顯延長(zhǎng)(P＜0.05或P＜0.01),見(jiàn)表2;第1～6天的朝向角及游泳速度均無(wú)明顯變化(P＞0.05),見(jiàn)表3和4;第7天血栓心脈寧1.1和2.2 g·kg－1劑量組大鼠在90 s內(nèi)經(jīng)過(guò)平臺(tái)經(jīng)過(guò)次數(shù)、經(jīng)過(guò)有效區(qū)次數(shù)、平臺(tái)停留時(shí)間、平臺(tái)停留距離、有效區(qū)停留時(shí)間、有效區(qū)停留距離和平臺(tái)停留時(shí)間/總時(shí)間明顯縮短(P＜0.05),見(jiàn)表5。

與模型組比較,陽(yáng)性藥組大鼠在第5、6天到達(dá)平臺(tái)的潛伏期明顯縮短(P＜0.05),第1～4天到達(dá)平臺(tái)潛伏期有縮短的趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),見(jiàn)表1;第5天到達(dá)平臺(tái)游程明顯縮短(P＜0.05),第1～4天及第6天達(dá)平臺(tái)的游程有縮短趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),見(jiàn)表2;第6天的朝向角明顯降低(P＜0.05),見(jiàn)表3;第1～6天的游泳速度無(wú)明顯變化,見(jiàn)表4; 第7天陽(yáng)性藥組大鼠90 s內(nèi)在有效區(qū)停留時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.05),經(jīng)過(guò)平臺(tái)次數(shù)、平臺(tái)停留時(shí)間、平臺(tái)停留距離、有效區(qū)停留距離、平臺(tái)停留時(shí)間/總時(shí)間、平臺(tái)停留距離/總路程、有效區(qū)停留時(shí)間/總時(shí)間、有效區(qū)停留距離/總路程均有增加的趨勢(shì),但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);經(jīng)過(guò)有效區(qū)次數(shù)無(wú)明顯變化(P＞0.05),見(jiàn)表5。與模型組比較,血栓心脈寧1.1 g·kg－1劑量組大鼠第2、4 和5天到達(dá)平臺(tái)的潛伏期和游程均明顯縮短(P＜0.05或P＜0.01),第3及6天有降低的趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),見(jiàn)表1和2;第1～6天游泳速度及朝向角無(wú)明顯變化(P＞0.05),見(jiàn)表3和4。與模型組比較,血栓心脈寧2.2 g·kg－1劑量組大鼠第3～6天到達(dá)平臺(tái)潛伏期明顯縮短(P＜0.05或P＜0.01),第2天有降低的趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),見(jiàn)表1; 第3～5天到達(dá)平臺(tái)游程明顯縮短(P＜0.05或P＜0.01),第2及6天有縮短的趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),見(jiàn)表2;第1～6天游泳速度及朝向角無(wú)明顯變化,見(jiàn)表3和4。第7天血栓心脈寧1.1和2.2 g·kg－1劑量組大鼠在90 s內(nèi)經(jīng)過(guò)平臺(tái)次數(shù)、平臺(tái)停留時(shí)間、平臺(tái)停留距離、有效區(qū)停留時(shí)間、有效區(qū)停留距離、平臺(tái)停留時(shí)間/總時(shí)間、平臺(tái)停留距離/總路程、有效區(qū)停留時(shí)間/總時(shí)間明顯增加(P＜0.05或P＜0.01);經(jīng)過(guò)有效區(qū)次數(shù)、有效區(qū)停留距離/總路程無(wú)明顯變化(P＞0.05)。見(jiàn)表5。

2.2 各組大鼠避暗實(shí)驗(yàn)與假手術(shù)組比較,第2天模型組大鼠錯(cuò)誤潛伏期明顯縮短(P＜0.05),錯(cuò)誤次數(shù)明顯增加(P＜0.05)。與模型組比較,陽(yáng)性藥組及血栓心脈寧各劑量組大鼠第2天的錯(cuò)誤潛伏期及錯(cuò)誤次數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表6。

2.3 各組大鼠病理形態(tài)學(xué)與假手術(shù)組比較,模型組大鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞有變性、壞死、噬神經(jīng)細(xì)胞和水腫現(xiàn)象;模型組海馬神經(jīng)細(xì)胞數(shù)少,層次不清楚,可見(jiàn)較多的變性、壞死和水腫細(xì)胞。與模型組比較,陽(yáng)性藥組及血栓心脈寧各劑量組大鼠大腦皮層及海馬無(wú)明顯變化。見(jiàn)圖1和2(插頁(yè)四)。

表1 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)的潛伏期Tab.1 Latency of Morris water maze test of rats in various groups(±s,t/s)

表1 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)的潛伏期Tab.1 Latency of Morris water maze test of rats in various groups(±s,t/s)

?P＜0.05,??P＜0.01 vs sham operation group;△P＜0.05,△△P＜0.01 vs model group.

Group n Latency (t/d) 1 2 3 Sham operation 9 42.26±17.01 13.33±4.55 11.76±3.15 Model 9 62.53±22.68?33.71±14.44??34.75±31.94?Positive drug 9 49.16±24.82 30.27±22.18 18.36±16.21 1.1 g·kg－1XSXMN 8 46.58±11.75 17.14±6.79△△13.15±5.74 2.2 g·kg－1XSXMN 10 56.59±17.60 25.01±16.37 12.94±4.55△Group n Latency (t/d) 4 5 6 Sham operation 9 6.93±1.99 7.40±1.85 7.37±1.99 Model 9 15.97±6.68??14.89±5.24??11.82±5.77?Positive drug 9 11.59±5.14 9.09±4.07△7.10±2.47△1.1 g·kg－1XSXMN 8 9.01±3.59△8.29±3.48△8.05±2.52 2.2 g·kg－1XSXMN 10 7.76±2.17△△8.92±2.05△△6.85±2.37△

表2 各組大鼠Morris水迷宮試驗(yàn)的游程Tab.2 Swimming distances of Morris water maze test of rats in various groups(±s,l/cm)

表2 各組大鼠Morris水迷宮試驗(yàn)的游程Tab.2 Swimming distances of Morris water maze test of rats in various groups(±s,l/cm)

?P＜0.05,??P＜0.01 vs sham operation group;△P＜0.05,△△P＜0.01 vs model group.

Group n Swimming distance (t/d) 1 2 3 Sham operation 9 1 090.63±462.58 406.88±126.37 336.27±61.40 Model 9 1 274.50±387.52 804.80±301.27??688.72±481.93?Positive drug 9 1 007.85±352.08 699.00±389.30 437.59±258.83 1.1 g·kg－1XSXMN 8 1 096.84±239.33 491.90±179.35△375.61±156.79 2.2 g·kg－1XSXMN 10 1 178.16±342.63 609.05±203.77 330.04±88.71△Group n Swimming distance (t/d) 4 5 6 Sham operation 9 211.39±75.62 236.94±84.59 233.62±41.75 Model 9 409.63±132.60??387.08±119.91??398.30±284.01 Positive drug 9 309.86±123.14 255.66±90.05△216.01±92.59 1.1 g·kg－1XSXMN 8 236.23±104.40△250.43±90.71△222.75±52.37 2.2 g·kg－1XSXMN 10 250.28±78.92△△258.75±80.81△231.39±55.71

表3 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)的朝向角Tab.3 Starting angles of Morris water maze test of rats in various groups(±s,θ/°)

表3 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)的朝向角Tab.3 Starting angles of Morris water maze test of rats in various groups(±s,θ/°)

?P＜0.05 vs model group.

Group n Starting angle (t/d) 1 2 3 Sham operation 9 20.90±9.13 37.03±18.68 48.24±28.60 Model 9 29.81±19.58 38.68±26.49 46.86±20.17 Positive drug 9 26.65±13.53 38.80±20.50 33.33±18.53 1.1 g·kg－1XSXMN 8 24.31±19.35 37.40±19.49 32.88±16.54 2.2 g·kg－1XSXMN 10 28.62±18.20 26.50±16.80 54.82±24.05 Group n Starting angle (t/d) 4 5 6 Sham operation 9 57.24±23.40 42.55±7.22 49.22±24.43 Model 9 62.73±22.95 58.62±15.73 55.09±14.00 Positive drug 9 50.56±26.84 62.19±21.19 37.99±18.31?1.1 g·kg－1XSXMN 8 54.74±13.86 40.25±27.05 49.00±22.40 2.2 g·kg－1XSXMN 10 44.08±22.95 46.86±21.67 44.22±32.52

表4 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)的平均速度Tab.4 Average speeds of Morris water maze test of rats in various groups[±s,v/(cm·s－1)]

表4 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)的平均速度Tab.4 Average speeds of Morris water maze test of rats in various groups[±s,v/(cm·s－1)]

Group n Average speed (t/d) 1 2 3 Sham operation 9 29.82±4.64 32.27±4.54 31.38±7.72 Model 9 21.83±3.83 27.99±4.18 27.34±4.82 Positive drug 9 26.49±6.74 29.76±7.61 34.24±11.28 1.1 g·kg－1XSXMN 8 25.33±4.49 31.82±5.66 35.70±11.64 2.2 g·kg－1XSXMN 10 22.73±4.92 32.65±9.33 25.91±7.34 Group n Average speed (t/d) 4 5 6 Sham operation 9 29.57±6.75 33.48±7.73 35.02±9.67 Model 9 27.36±4.81 27.35±6.05 28.33±4.97 Positive drug 9 27.75±4.31 58.62±10.91 30.80±5.00 1.1 g·kg－1XSXMN 8 26.60±5.58 33.66±15.73 29.90±9.30 2.2 g·kg－1XSXMN 10 34.86±9.86 29.30±6.06 39.73±14.93

表5 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)第7天的各項(xiàng)指標(biāo)Tab.5 Each index of Morris water maze test of rats on the 7th day in various groups(±s)

表5 各組大鼠水迷宮試驗(yàn)第7天的各項(xiàng)指標(biāo)Tab.5 Each index of Morris water maze test of rats on the 7th day in various groups(±s)

?P＜0.05,??P＜0.01 vs sham operation group;△P＜0.05,△△P＜0.01 vs model group.

Group n Times of passing platform Times of passing effective area Distance of staying on platform(l/cm) Duration of staying on platform(t/s) Distance of staying in effective area(l/cm) Sham operation 9 5.78±1.86 6.80±82.89 88.21±37.41 2.95±1.34 684.92±153.36 Model 9 3.33±2.00?4.33±2.12?50.25±30.24?1.76±0.96?446.59±240.27?Positive drug 9 5.78±2.91 4.00±2.12 84.83±59.31 3.88±3.07 604.20±125.06 1.1 g·kg－1XSXMN 8 6.00±2.00△5.25±2.49 91.28±31.79△3.77±1.43△△658.08±151.51△2.2 g·kg－1XSXMN 10 5.00±1.25△5.80±2.25 78.62±12.04△3.35±0.82△△595.80±175.16△Group n Duration of staying in effective area(t/s) Duration of staying on platform/Total time Duration of staying in effective area/Total time Distance of staying in effective area/Total distance Distance of staying on platform/Total distance Sham operation 9 25.19±7.30 0.03±0.02 0.28±0.08 0.29±0.05 0.04±0.02 Model 9 16.45±6.83?0.02±0.01?0.20±0.10 0.23±0.10 0.03±0.01 Positive drug 9 25.77±7.30△0.04±0.03 0.29±0.08 0.30±0.07 0.04±0.03 1.1 g·kg－1XSXMN 8 27.31±6.18△△0.04±0.02△△0.30±0.07△0.31±0.07 0.04±0.02△2.2 g·kg－1XSXMN 10 25.22±5.92△0.03±0.01△0.28±0.06△0.28±0.10 0.04±0.01△

表6 各組大鼠避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.6 Results of dark avoidance task of rats in various groups(±s)

表6 各組大鼠避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.6 Results of dark avoidance task of rats in various groups(±s)

?P＜0.05 vs sham operation group.

Group n Latency(t/s)Error times Sham operation 9 272.55±32.98 0.55±0.53 Model 9 173.67±120.31?2.44±2.45?Positive drug 9 211.78±114.40 1.11±1.05 1.1 g·kg－1XSXMN 8 221.00±115.45 3.38±4.21 2.2 g·kg－1XSXMN 10 182.40±115.47 2.10±2.61

3 討論

Morris水迷宮是用來(lái)測(cè)查動(dòng)物空間學(xué)習(xí)記憶能力的主要方法,其實(shí)驗(yàn)原理是收集與空間定位有關(guān)的視覺(jué)信息,然后對(duì)信息進(jìn)行整理、記憶、加固和提取,使大鼠找到水下隱藏的平臺(tái)而從水中逃脫[8]。Morris水迷宮測(cè)試程序可分為定位航行實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)[9],定位航行實(shí)驗(yàn)考察動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力;空間探索實(shí)驗(yàn)主要考察動(dòng)物的空間記憶能力。本研究結(jié)果顯示:與模型組比較,血栓心脈寧各劑量組大鼠在前6 d定位航行實(shí)驗(yàn)中,到達(dá)平臺(tái)潛伏期和游程有不同程度的縮短,第7天空間探索實(shí)驗(yàn)中測(cè)試的多項(xiàng)指標(biāo)亦顯著提高,提示血栓心脈寧可改善AD大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力,其改善作用可能與丹參、川芎和人參等組分相互作用有關(guān)。

避暗實(shí)驗(yàn)是利用嚙齒類動(dòng)物趨暗避明的生理習(xí)性設(shè)計(jì)的,可反映動(dòng)物被動(dòng)回避能力。本研究避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與模型組比較,血栓心脈寧各劑量組大鼠第2天的錯(cuò)誤潛伏期及錯(cuò)誤次數(shù)無(wú)顯著差異,提示血栓心脈寧對(duì)AD大鼠的被動(dòng)回避能力無(wú)明顯改善作用。本研究中光鏡下病理學(xué)觀察顯示:與模型組比較,血栓心脈寧各劑量組大鼠皮層和海馬組織結(jié)構(gòu)無(wú)明顯改善。

學(xué)習(xí)記憶能力下降,特別是空間學(xué)習(xí)記憶能力的降低,嚴(yán)重影響了AD患者的生存質(zhì)量,給家庭和社會(huì)帶來(lái)巨大的負(fù)擔(dān)。本研究證實(shí)血栓心脈寧對(duì)AD大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力有明顯改善作用,如能應(yīng)用于AD患者,可增強(qiáng)患者的方向感和位置感,具有重大意義。

AD發(fā)病機(jī)制主要包括Aβ毒性學(xué)說(shuō)、Tau蛋白、炎癥機(jī)制、中樞膽堿能損傷、自由基與氧化應(yīng)激學(xué)說(shuō)、鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)、脂質(zhì)代謝異常、線粒體功能紊亂和血管因素等[10-13]。其中Aβ毒性學(xué)說(shuō)占有非常重要的地位。Aβ具有神經(jīng)毒性作用,可引起神經(jīng)細(xì)胞鈣紊亂和炎癥反應(yīng),誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生氧自由基,改變細(xì)胞膜的離子通道、形成Aβ通道,影響能量代謝,增強(qiáng)氧化應(yīng)激敏感性而加重腦組織損傷[14-16],各個(gè)環(huán)節(jié)相互影響,特別是Aβ與氧化應(yīng)激呈正反饋?zhàn)饔?。有研究[17-19]顯示:血栓心脈寧能降低MDA和LPO水平,升高SOD及GSH-Px活性,減輕自由基的氧化損傷。本研究通過(guò)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)血栓心脈寧可改善AD大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力,對(duì)AD有治療作用,其作用機(jī)制可能與其提高抗自由基相關(guān)酶和減少自由基氧化損傷有關(guān),血栓心脈寧對(duì)AD治療作用的確切機(jī)制有待于進(jìn)一步探討。

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Therapeutic effect of XueShuanXin MaiNing on rats with Alzheimer’s disease induced byβamyloid protein

FANG Sheng-bo,XIE Xiang-lin,LIU Lei,DU Bing,LIU Hong-yan
(Department of Pharmacology,School of Pharmacy,Jilin University,Changchun 130021,China)

ObjectiveTo observe the influence of XueShuan Xin MaiNing(XSXMN)in the behavior and structures of cerebral cortex and hippocampus of the rats withβamyloid protein(Aβ)-induced Alzheimer’s disease(AD),and to explore its therapeutic effects on the rat AD.Methods100 male Wistar rats were selected.According to weight, the rats were randomly divided into sham operation group,model group,positive drug group(donepezil hydrochloride,1.75 mg·kg－1),XSXMN 1.1 g·kg－1group and XSXMN 2.2 g·kg－1group.The rat AD models were made by injecting Aβinto hippocampus.After oral administration for 15 d,Morris water maze test, dark avoidance task and pathology test were performed.ResultsIn Morris water maze test,compared with model group,the latency and swimming distance to platform of the rats in XSXMN 1.1 g·kg－1group were decreased on the 2nd,4th and 5th day(P＜0.05 or P＜0.01);in XSXMN 2.2 g·kg－1group,the latency to platform of the rats were decreased from the 3nd to 6th day(P＜0.05 or P＜0.01),the swimming distances to platform of the rats were decreased from the 3rd to 5th day(P＜0.05 or P＜0.01).On the 7th day,in XSXMN groups,the times ofpassing platform,time of staying on platform,distance of staying on platform,time of staying in effective area, distance of staying in effective area,time of staying on platform/total time,distance of staying on platform/total distance,time of staying on platform/total time were all increased significantly(P＜0.05 or P＜0.01)within 90 s.In dark avoidance task,compared with model group,the error latency and the error times of the rats in XSXMN groups had no obvious change on the 2nd day.The pathological results showed that there were degeneration nerve cells and necrosis nerve cells in the rat cerebral cortex in XSXMN groups,while in the rat hippocampus there were less number of nerve cells with obscure cell layer and many degeneration and necrosis cells were found;compared with model group,there was no obvious improvement.ConclusionXSXMN can improve the learning and memory function of the AD rats.

XueShuanXin MaiNing;Alzheimer’s disease;amyloidβ-protein;rats,Wistar

R749.16

A

2013-06-24

吉林省中醫(yī)藥管理局科研基金資助課題(2010-115)

方圣博(1988－),女,吉林省吉林市人,在讀醫(yī)學(xué)碩士,主要從事中樞藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。

劉宏雁(Tel:0431-85619705,E-mail:hongyl＠jlu.edu.cn)

1671-587Ⅹ(2014)05-0985-06

10.13481/j.1671-587x.20140516