陳 靜

（河南省商丘市第一人民醫(yī)院藥劑科，商丘476000）

HPLC法測(cè)定益腎調(diào)經(jīng)口服液中芍藥苷的含量

陳 靜

（河南省商丘市第一人民醫(yī)院藥劑科，商丘476000）

目的建立HPLC法測(cè)定益腎調(diào)經(jīng)口服液中芍藥苷含量的方法。方法采用Eclipse XDB-C18色譜柱，乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）為流動(dòng)相；流速1.0ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)230nm。結(jié)果芍藥苷在0.5165～2.066μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9995），平均回收率為98.15%，RSD=0.91%（n=6）。結(jié)論本方法操作簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于益腎調(diào)經(jīng)口服液的質(zhì)量控制。

芍藥苷；高效液相色譜法；含量測(cè)定；益腎調(diào)經(jīng)口服液

益腎調(diào)經(jīng)口服液是由白芍、紫石英、柴胡、鎖陽(yáng)、枸杞子等藥材加工制成的醫(yī)院制劑，具有補(bǔ)腎疏肝，活血化瘀，調(diào)經(jīng)之功效，用于調(diào)節(jié)垂體卵巢功能，促使卵泡發(fā)育，主要治療月經(jīng)不調(diào)，無(wú)排卵性不孕等［1］?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未收載含量測(cè)定項(xiàng)目，不能有效地控制藥品質(zhì)量。白芍為方中主藥，芍藥苷是白芍的主要有效成分［2］，本文以芍藥苷為指標(biāo)成分，建立了益腎調(diào)經(jīng)口服液中芍藥苷的高效液相測(cè)定法，為該制劑的質(zhì)量控制提供了客觀的含量評(píng)價(jià)方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器Agilent 1260型高效液相色譜儀，AUW-220D電子分析天平，5210DT超聲處理器。

1.2 試藥芍藥苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110736-200934）；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。益腎調(diào)經(jīng)口服液（由柘城縣人民醫(yī)院提供，批號(hào)：130112、130311、130611）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件色譜柱：Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6 ×150mm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）為流動(dòng)相［3］；流速1.0ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)230nm；進(jìn)樣量10μl；理論板數(shù)應(yīng)不低于2000。

2.2 線性關(guān)系考察取芍藥苷對(duì)照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。按照“2.1”項(xiàng)色譜條件，分別進(jìn)樣5、8、10、12、15、20μl，記錄芍藥苷峰面積值，以峰面積積分值（Y）對(duì)對(duì)照品濃度（X）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y=285.34X+106.33 r=0.9995。結(jié)果表明，芍藥苷對(duì)照品濃度在0.5165～2.066μg范圍內(nèi)與峰面積值呈良好的線性關(guān)系。

2.3 對(duì)照品溶液的制備取芍藥苷對(duì)照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.4 供試品溶液及陰性對(duì)照溶液的制備精密量取本品約2ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇35ml，超聲處理30分鐘，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。另取缺白芍的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.5 干擾試驗(yàn)取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各10μl，按照“2.1”項(xiàng)色譜條件，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.6 精密度試驗(yàn)取同一對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，每次10μl，記錄峰面積，RSD=0.97%（n=5），表明精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一對(duì)照品溶液，分別在0、1、2、3、4、5、6h進(jìn)樣測(cè)定，RSD=0.88%，供試品溶液在6小時(shí)內(nèi)峰面積基本穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)精密量取6份已知含量為2.389mg／ml的樣品0.5ml，置50ml量瓶中，分別精密加入濃度為0.1190mg／ml對(duì)照品溶液10ml，按照“2.4”項(xiàng)下供試品溶液制備方法制備溶液，按照“2.1”項(xiàng)色譜條件，分別測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（%）

2.9 樣品測(cè)定取3批樣品，按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試液，各進(jìn)樣10μl，按外標(biāo)法計(jì)算芍藥苷的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 3批樣品中芍藥苷的含量（n，%）

3 討論

試驗(yàn)過(guò)程中，參考有關(guān)文獻(xiàn)［3-4］，考察了不同提取溶媒對(duì)芍藥苷提取率的影響，結(jié)果表明，芍藥苷易溶于稀乙醇和甲醇，但甲醇毒性較大，故選用稀乙醇提取。比較了超聲、回流等提取方法，結(jié)果顯示超聲提取簡(jiǎn)便、快速，提取完全。

［1］河南省食品藥品監(jiān)督管理局.河南省醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑標(biāo)準(zhǔn)［S］.2004.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì)，中華人民共和國(guó)藥典（一部）［S］.2010年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，96-97.

［3］尹寧寧，徐華玲，徐麗華.白芍中芍藥苷含量測(cè)定影響因素的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，6（11）：43-44.

［4］張瓊英.高效液相色譜法測(cè)定健兒樂(lè)顆粒中芍藥苷含量［J］.中國(guó)藥業(yè)，2010，19（17）：23.

醫(yī)書(shū)常見(jiàn)典故拾萃

理瀹：代指醫(yī)藥。《子華子·北宮意問(wèn)》云：“子華子居北苓，北宮意公仲承侍，縱言而及于醫(yī)。子華曰：‘醫(yī)者理也，理者意也。藥者瀹也，瀹者養(yǎng)也?！币源嗣哂?，吳師機(jī)改《外治醫(yī)說(shuō)》為《理瀹駢文》，其自跋云：“《外治醫(yī)說(shuō)》刊既成，時(shí)賢皆云不甚解。其欲得吾之說(shuō)者，則取其方而已。予知說(shuō)之不行也，而要圍墾遂棄。爰改名駢方，借《子華子》‘醫(yī)者理也，藥者瀹也’之句，摘理瀹二字以題其篇?！?/p>

珠塵：為傳說(shuō)中的仙藥。晉·王嘉《拾遺記·虞舜》云：“（憑霄雀）常游丹海之際，時(shí)來(lái)蒼梧之野，銜青砂珠，積成壟阜，名曰珠丘。其珠輕細(xì)，風(fēng)吹如塵起，名曰珠塵……仙人方迴《游南岳七言贊》曰：珠塵圓潔輕且明，有道服者得長(zhǎng)生?！贝搜浴爸閴m”為輕細(xì)如塵的青砂珠，為傳說(shuō)中的仙藥，服之可以長(zhǎng)生。以此為書(shū)名者為清代吳省三的《藝海珠塵》。

——國(guó)家中醫(yī)藥管理局網(wǎng)站

De t e r mina tio n o f Pae onif o rin in Yis h en Tiaojin g Or al Liq uid b y HPL C

Chen Jing(Pharmacy Department,Shangqiu First People's Hospital,Shangqiu,Henan Province,476000,China)

ObjectiveTo establish a HPLC method of determination of paeoniforin in Yishen Tiaojing oral liquid.MethodThe chromatographic sxstem consisted of C18 column，used acetonitrile-0.1%phosphatesolution（14∶86）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 230nm，the flow rate was 1.0ml·min-1.ResultsThe paeoniforin have a good a linear relationship in the range of 0.5165～2.066μg（r= 0.9995），the average recoverx vas 98.15%and RSD=0.91%（n=6）.ConolusionThe established method is accurate，sensitive and simple.It can be used for qualitx control of Yishen Tiaojing oral liquid.

Paeoniforin；HPLC；Determination；Yishen Tiaojing oral liquid

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.02.104

：1672-2779（2014）-02-0154-02

??楊 杰 本文校對(duì)：劉曉云

2013-10-17）