張海茂周愛鳳張 蓉

（1 山東省青島市腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 青島 266042；2 山東省青島市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 青島 266042）

胃泌素釋放肽前體檢測對小細(xì)胞肺癌診治的意義

張海茂1周愛鳳2張 蓉2

（1 山東省青島市腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 青島 266042；2 山東省青島市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 青島 266042）

目的探討血漿胃泌素釋放肽前體（ProGRP）對小細(xì)胞肺癌（SCLC）的臨床診斷價(jià)值。方法用化學(xué)發(fā)光法檢測50例健康體檢者、49例非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）及50例初診SCLC（局限期29例、廣泛期21例）患者血漿ProGRP水平，評估血漿ProGRP診斷SCLC的臨床價(jià)值。結(jié)果健康對照組、NSCLC組和SCLC組血漿ProGRP水平分別為34.3、39.1和403.1 ng/L；各組間血漿ProGRP差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。局限期SCLC（LD-SCLC）組血漿ProGRP高于健康對照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。廣泛期SCLC（ED-SCLC）組血漿ProGRP高于LD-SCLC組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以健康組為對照，ROC曲線上取約登指數(shù)最大點(diǎn)確定ProGRP臨界值為36.9 ng/L，ProGRP的敏感度為88%，特異度為98%；以NSCLC組為對照，ROC曲線上取約登指數(shù)最大點(diǎn)確定ProGRP的臨界值為62.9 ng/L，ProGRP的敏感度為82%，特異度為96%。結(jié)論血漿ProGRP檢測可作為SCLC診斷、病情監(jiān)測的敏感和特異性指標(biāo)，可廣泛應(yīng)用于臨床。

小細(xì)胞肺癌肺癌：胃泌素釋放肽前體；病情監(jiān)測；化學(xué)發(fā)光法；血漿

胃泌素釋放肽前體（ProGRP）作為一種新興的小細(xì)胞肺癌腫瘤標(biāo)志物，受到了越來越多的重視。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）是ProGRP相對經(jīng)典的檢測方法，對這方面的研究也較多。隨著技術(shù)的不斷革新，化學(xué)發(fā)光法檢測ProGRP逐漸涌入了我們的視線?；瘜W(xué)發(fā)光法具有高敏感度和特異度，可以及時(shí)檢測，自主化程度更高，同時(shí)也大大縮短了檢測時(shí)間。雖然，國內(nèi)外專家學(xué)者一再強(qiáng)調(diào)血漿ProGRP較血清ProGRP有更高的穩(wěn)定性，但對ProGRP的檢測仍多使用血清標(biāo)本。本研究旨在初步確立本實(shí)驗(yàn)室血漿ProGRP的臨界值，并對血漿ProGRP在小細(xì)胞肺癌診斷中的價(jià)值進(jìn)行探討。

1 對象與方法

1.1 對象

①小細(xì)胞肺癌（SCLC）組：青島中心醫(yī)院病理確診的SCLC初診患者50例，男34例，女16例，中位年齡57（39～77）歲；其中按美國退伍軍人管理局系統(tǒng)醫(yī)院SCLC分期方法，局限期（1imited disease，LD）29例；廣泛期（extensive disease，ED）21例。②非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）組：同期本院經(jīng)病理確診的NSCLC患者49例，男35例，女14例，中位年齡51（45～78）歲。③健康對照組：同期本院健康體檢者50例，男性31例，女性19例，中位年齡53歲。均為體格檢查正常，肝腎功能正常和影像學(xué)檢查無異常者。3組受試對象均無腎功能衰竭、甲狀腺和前列腺腫瘤，各組問性別、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。

1.2 方法

①試劑與儀器：ProGRP試劑盒和ARCHITECT i2000SR化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（美國雅培公司）。②標(biāo)本采集：空腹采靜脈血2 mL于EDTA抗凝管中，輕輕混勻，3500 g離心10 min，收集上層血漿于-70 ℃冰箱保存待測。③血漿ProGRP檢測：用ARCHITECT i2000SR化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套ProGRP試劑盒、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品測定血漿受試對象ProGRP水平，均嚴(yán)格按操作步驟進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。因ProGRP檢測數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，用中位數(shù)及四分位數(shù) [M（QR）]表示，多組間比較采用非參數(shù)Kruskal-wallis H檢驗(yàn)；兩組間比較用非參數(shù)Mann-Whitney U檢驗(yàn)。用受試者工作特征曲線（ROC）確定血漿ProGRP診斷SCLC的臨界值及曲線下面積（ROC-AUC）。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組血漿ProGRP水平比較

經(jīng)非參數(shù)Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，健康對照組、NSCLC組和SCLC組問血漿ProGRP水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H值為84.612，P＜0.001）。以Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，SCLC組血漿ProGRP水平與健康對照組和NSCLC組比較（U值分別為97和212，P＜0.001），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LD-SCLC組與健康對照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ED-SCLC組與LD-SCLC組相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 各組血漿ProGRP水平比較[ M（P25～P75 ）]

2.2 ProGRP診斷SCLC的敏感性和特異性

利用受試者工作特征曲線（ROC曲線），以健康組為對照，獲得ProGRP臨界點(diǎn)分別為36.9 ng/L：以NSCLC組為對照，獲得ProGRP臨界點(diǎn)62.9 ng/L，見表2。

表2 ProGRP診斷SCLC的敏感性和特異性比較

3 討 論

胃泌素釋放肽（GRP）是一種具有促胃泌素分泌作用的生物活性肽，1978年首次從豬胃細(xì)胞分離出來[1]。它由27個(gè)氨基酸組成，是健康人腦、胃腸的神經(jīng)纖維以及胎兒肺的神經(jīng)內(nèi)分泌組織存在的激素。Maruno等[2]證明，GRP是SCLC組織的重要產(chǎn)物，也是SCLC的重要腫瘤標(biāo)志物。但GRP在血漿中半衰期短，臨床不易檢測，這使得GRP無法應(yīng)用于SCLC的臨床檢測。胃泌素釋放肽前體（ProGRP）是GRP的前體結(jié)構(gòu)，普遍存在于非胃竇組織、神經(jīng)纖維、腦和肺的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中。ProGRP因部分氨基酸殘基的不同分為3種分子亞型，它們有共同的C端序列ProGRP（31-98），能代表GRP水平和GRP基因表達(dá)，是一種新的SCLC腫瘤標(biāo)志物[3]。

有研究表明，由于凝血過程中產(chǎn)生的內(nèi)源性蛋白酶對ProGRP的降解作用，使得血漿ProGRP的檢測比血清更穩(wěn)定。Nordlund等認(rèn)為以血漿作為檢測標(biāo)本更能提高其測定值的臨床可靠性[4]。本次研究即采用血漿樣本，減少了分析前誤差。Kamata等[5]報(bào)道腎功能衰竭的患者中血清ProGRP水平升高。相關(guān)研究顯示，當(dāng)患者血漿肌酐濃度＞141 μmol/L時(shí)，血漿ProGRP濃度開始升高[6]。同時(shí)，有研究表明，在腎功能障礙患者中，由于腎小球?qū)roGRP的通透性降低，致使其血中濃度上升，52.2%慢性腎功能衰竭患者可出現(xiàn)血清ProGRP升高，引起ProGRP假陽性。故本次試驗(yàn)中同時(shí)檢測受試標(biāo)本腎功，以排除腎衰竭患者，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。另外，有研究顯示，結(jié)直腸癌、前列腺癌和髓樣甲狀腺癌患者也可能出現(xiàn)血清ProGRP升高，故本次試驗(yàn)的受試對象排除上述腫瘤。

本研究中，SCLC組血漿ProGRP明顯高于健康對照組和NSCLC組，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ED-SCLC組與LD-SCLC組相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示，血漿ProGRP對小細(xì)胞肺癌的診斷、病情監(jiān)測有重要的臨床價(jià)值。

目前，Pro-GRP尚沒有普遍適用的參考值范圍和臨界值[7]。利用受試者工作特征曲線（ROC曲線），以健康組為對照，獲得ProGRP臨界點(diǎn)分別為36.9 ng/L：以NSCLC組為對照，獲得ProGRP臨界點(diǎn)62.9 ng/L。本次試驗(yàn)以健康組為對照，血漿ProGRP診斷SCLC的敏感性和特異性分別為88%和98%；以NSCLC組為對照，血漿ProGRP診斷SCLC的敏感性和特異性分別為82%和96%。說明設(shè)定的血漿ProGRP界值能較好地滿足臨床和實(shí)驗(yàn)室需求。

總之，化學(xué)發(fā)光法血漿ProGRP檢測可作為SCLC診斷、病情監(jiān)測的敏感和特異性指標(biāo)，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，可實(shí)時(shí)監(jiān)測等優(yōu)勢，可廣泛應(yīng)用于臨床。

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1671-8194（2014）27-0228-02