申惠敏1,賈秀珍2
(1.山西省長治市畜牧獸醫(yī)局,山西長治046000;2.山西省長治市城區(qū)農(nóng)林委,山西長治046000)
近些年來,相關(guān)政府機(jī)構(gòu)做了大量工作改造收奶站,以質(zhì)論價(jià),嚴(yán)厲打擊摻假使假,使鮮奶質(zhì)量有了明顯改善。但鮮奶摻假是一個(gè)普遍存在的問題,這些行為不僅嚴(yán)重影響了鮮奶的營養(yǎng)品質(zhì),也危害了消費(fèi)者的健康,如何提高原料奶的質(zhì)量仍是一個(gè)值得注意的問題。
生鮮乳是液體乳、乳粉和其他乳制品的源頭,其質(zhì)量好壞非常重要,直接影響乳制品質(zhì)量安全。以下是常見的生鮮乳快速檢測技術(shù)及方法:
1.1 牛奶中摻堿類物質(zhì)的危害 在牛奶中摻入堿類物質(zhì)的目的是為掩蓋牛奶酸敗現(xiàn)象、中和牛奶中的乳酸、降低牛奶酸度、防治牛奶因酸敗而凝結(jié);通常以摻純堿(Na2CO3)或小蘇打(NaHCO3)為多。加堿后牛奶口感差,而且便于細(xì)菌的生長,同時(shí)破壞牛奶中某些維生素。
1.2 摻堿快速檢測原理 正常牛乳呈微酸性,加堿后變?yōu)閴A性,可使溴麝香草酚藍(lán)指示劑變色,由顏色深淺的不同,判斷加堿量的多少。此法既簡便、快速,又靈敏。奶站、乳制品生產(chǎn)企業(yè)多采用酸度滴定法、溴麝香草酚藍(lán)試管法或溴麝香草酚藍(lán)試紙法。目前我國執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)是《乳與乳制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》GB/T 5009.46-2003(即溴麝香草酚藍(lán)試管法)。
1.3 快速檢測步驟 配制0.4 g/L溴麝香草酚藍(lán)-乙醇溶液,變色范圍 pH 6.0~7.6(黃→藍(lán)),反應(yīng)很靈敏,加入少量的堿就可以使該指示液變色,如果含堿過多顏色就加深至深青色。量取5mL試樣,置試管中,將試管保持傾斜位置,沿管壁小心加入5滴溴麝香草酚藍(lán)-乙醇溶液;將試管輕輕傾斜轉(zhuǎn)2~3圈,使其更好地相互接觸,切勿使溶液相互混合,然后將試管垂直放置,2min后根據(jù)環(huán)層指示劑顏色的特征確定結(jié)果;同時(shí)用未摻堿的鮮乳做空白對照試驗(yàn),或者用小蘇打配制的陽性樣品進(jìn)行對照。
2.1 檢測步驟 調(diào)節(jié)孵育器溫度至56℃;將牛奶樣品搖勻;取出相應(yīng)數(shù)量的檢測條,水平放置在孵育器上,小心揭開貼膜至指示線處;用移液器取300μL牛奶樣品,緩慢豎直滴加至檢測條的凹槽中;將貼膜重新封好,可同時(shí)操作四個(gè)樣品,要在60 s內(nèi)完成四個(gè)樣品的操作;蓋上孵育器塑料蓋,自動(dòng)開始倒計(jì)時(shí);孵育8min結(jié)束后,蜂鳴器響動(dòng),取出檢測條,3 min內(nèi)判讀結(jié)果。
2.2 判讀標(biāo)準(zhǔn) 首先查看控制線(C線),如果不顯色,本次檢測結(jié)果無效。在控制線(C線)正常顯色的情況下,按以下標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果:
如果檢測線(T線)的顏色和控制線(C線)的顏色一致或者比控制線顏色深,則判斷樣品為陰性。如果檢測線(T線)的顏色不可見或者比控制線(C線)顏色淺時(shí),則判斷樣品為陽性。
3.1 檢測步驟 配制陽性質(zhì)控溶液;調(diào)節(jié)孵育器溫度至56℃;取陽性質(zhì)控溶液50μL~1mL的離心管中,再加入350μL待檢測樣品充分混勻,靜置20~30min,配成待檢溶液;取出相應(yīng)數(shù)量的檢測條,水平放置在孵育器上,小心揭開貼膜至指示線處;用移液器取300μL已配好的待檢溶液,緩慢豎直滴加至檢測條的凹槽中;將貼膜重新封好,可同時(shí)操作四個(gè)樣品,要在75 s內(nèi)完成四個(gè)樣品的操作;蓋上孵育器塑料蓋,自動(dòng)開始倒計(jì)時(shí);孵育8min結(jié)束后,蜂鳴器響動(dòng),取出檢測條,3min內(nèi)判讀結(jié)果。
3.2 判定標(biāo)準(zhǔn) 首先查看控制線(C線),如果不顯色,本次檢測結(jié)果無效。在控制線(C線)正常顯色的情況下,按以下標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果:
如果檢測線(T線)的顏色和控制線(C線)的顏色一致或者比控制線顏色深,則判斷樣品為陽性,也就是牛奶樣品中含有檢測限水平或者高出檢測限水平的β內(nèi)酰胺酶,樣品中含有β-內(nèi)酰胺酶可降解質(zhì)控液中的青霉素G。
如果檢測線(T線)的顏色不可見或者比控制線(C線)顏色淺,則判斷樣品為陰性,即被檢的牛奶樣品中不含β-內(nèi)酰胺酶,不能分解質(zhì)控液中的青霉素G。
3.3 注意事項(xiàng) 如果個(gè)別牛奶或奶粉因?yàn)槿橹虻鞍缀亢芨?,?dǎo)致檢測條的質(zhì)控線(C線,上面的檢測線)不出現(xiàn)顏色,請離心后除去脂肪蛋白質(zhì)再進(jìn)行檢測。
4.1 生鮮乳處理 用干燥、潔凈的離心管或適當(dāng)容器盛放樣品,吸取1mL樣品于離心管中,根據(jù)所需檢測限檢測。
4.2 檢測步驟 用滴管吸取待檢樣品溶液,垂直滴加3~4滴(100μL)于加樣孔中,加樣的同時(shí)開始計(jì)時(shí),5~10min讀取結(jié)果。
4.3 結(jié)果判定 C、T線均顯色。表示樣品中不含有待檢測物質(zhì)或其濃度低于檢測限;檢測T線不顯色,則表示樣品中待檢測物質(zhì)濃度高于檢測限;質(zhì)控C線未顯色,表明操作過程不正確或檢測卡已失效。
4.4 注意事項(xiàng) 檢測卡應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)一次性使用,拆開包裝后盡量在一個(gè)小時(shí)內(nèi)用完;使用前將檢測卡和待檢樣本恢復(fù)至室溫;請勿觸摸檢測卡中央的白色膜面;滴管不可混用,以免交叉污染。
檢測時(shí)避免陽光直射和電風(fēng)扇直吹;請勿使用自來水、純化水或蒸餾水作為陰性對照;如樣品非常粘稠,有可能導(dǎo)致樣品無法層析,此時(shí)可適當(dāng)多滴1~2滴。