丁珊珊 康潔 張凌媛 沈建英 廖凌虹

隨著生活水平的提高，多食少動(dòng)使得肥胖相關(guān)疾病普遍可見，這與胰島素抵抗密切相關(guān)，大量脂肪的攝入是造成胰島素抵抗形成的主要原因。胰島素抵抗屬于中醫(yī)“痰濁”范疇，對(duì)其應(yīng)從“痰”論治。二陳湯出自《太平惠民和劑局方》，具有燥濕化痰理氣和中的作用，主治痰濕之證，本研究采用經(jīng)典化痰方藥——二陳湯干預(yù)高脂飲食大鼠，觀察大鼠的血脂和胰島素抵抗等的變化情況，從而探討高脂飲食引起的病理本質(zhì)及其與血脂異常和胰島素抵抗的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料 選取3月齡健康雄性Wistar大鼠30只，體重（200±10）g，按照隨機(jī)數(shù)字表法將其分為：正常組、高脂組和化痰組各10只，3組大鼠一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 （1）正常組采用普通飼料喂養(yǎng)，脂肪占總熱量的10%。（2）高脂組和化痰組采用高脂飼料喂養(yǎng)，脂肪占總熱量的60%（豬油20%、白糖4%、脫脂奶粉2%、膽固醇1%、基礎(chǔ)料73%）。第11周起用化痰方（二陳湯）對(duì)化痰組大鼠進(jìn)行干預(yù)，二陳湯（半夏15 g、橘紅15 g、茯苓9 g、甘草4.5 g）每日灌胃1次（每mL藥液含原生藥0.435 g，劑量1 mL/100 g體質(zhì)量），干預(yù)4周。在此期間，正常組大鼠仍然采用普通飼料喂養(yǎng)，高脂組和化痰組仍然采用高脂飼料喂養(yǎng)。所有大鼠自由進(jìn)食進(jìn)水，光照時(shí)間為每日8：00至 20：00。

1.2.1 測(cè)量大鼠體重、體長(zhǎng)、腹圍 每周測(cè)量并記錄各組大鼠的體重、體長(zhǎng)和腹圍。體長(zhǎng)的測(cè)量：大鼠鼻尖到肛門的距離。腹圍的測(cè)量：經(jīng)大鼠雙側(cè)髖骨頂點(diǎn)繞腹1周的長(zhǎng)度。

1.2.2 口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)（OGTT）大鼠禁食12 h后，用血糖儀檢測(cè)尾靜脈血糖（0 min），50%葡萄糖按2 g/kg體重劑量灌胃后開始計(jì)時(shí)，分別于30、60、120 min時(shí)用血糖儀檢測(cè)尾靜脈血糖。

1.2.3 胰島素耐量實(shí)驗(yàn)（ITT）大鼠禁食12 h后，以血糖儀檢測(cè)尾靜脈血糖（0 min），腹腔注射0.5 U/kg胰島素后開始計(jì)時(shí)，分別于30、60、90、120 min后用血糖儀檢測(cè)尾靜脈血糖。

1.2.4 檢測(cè)血清總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）的含量 大鼠處死后腹主動(dòng)脈采集血液，靜置2 h后，1500 rpm離心10 min分離血清，采用日立7180自動(dòng)生化分析儀對(duì)血清中TC（total cholesterol）和TG（triglyceride）進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（s）表示，采用方差分析，若方差齊，兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)；若方差不齊，兩兩比較用Tamhane’s T2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 第14周各組大鼠體重、體長(zhǎng)和腹圍的比較 前10周喂養(yǎng)時(shí)，正常組大鼠與高脂組和化痰組大鼠之間的體重、體長(zhǎng)和腹圍差異隨喂養(yǎng)時(shí)間而逐漸增大。開始進(jìn)行干預(yù)時(shí)，高脂組和化痰組大鼠的體重、體長(zhǎng)和腹圍較正常組大鼠均明顯增加；干預(yù)4周后，高脂組大鼠的體重、體長(zhǎng)和腹圍較正常組仍然明顯增加（P<0.01），而化痰組大鼠的體重、體長(zhǎng)和腹圍卻有所減少，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

表1 第14周各組大鼠體重、體長(zhǎng)及腹圍的比較（s）

表1 第14周各組大鼠體重、體長(zhǎng)及腹圍的比較（s）

*與正常組比較，P<0.01

?

2.2 各組大鼠血清中TC和TG含量的比較 高脂組大鼠血清中TC和TG的含量較正常組均明顯升高（P<0.01）?；到M大鼠血清中的TC含量較高脂組明顯降低（P<0.05），且與正常組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），且化痰組血清中TG含量較高脂組明顯降低（P<0.01），但與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表 2。

表2 各組大鼠血清中TC和TG含量的比較（s）mmol/L

表2 各組大鼠血清中TC和TG含量的比較（s）mmol/L

*與正常組比較，P<0.01；△P<0.05，△△P<0.01，與高脂組比較

組別 TC TG正常組（n=10）1.40±0.11 0.79±0.11高脂組（n=10）2.00±0.09* 1.04±0.09*化痰組（n=10）1.82±0.13*△ 0.75±0.10△△

2.3 第14周各組大鼠OGTT結(jié)果的比較 高脂組大鼠的空腹血糖明顯高于正常組（P<0.05），而化痰組大鼠的空腹血糖與正常組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；高脂組大鼠糖負(fù)荷后30 min血糖明顯高于正常組（P<0.01），糖負(fù)荷后60 min和120 min血糖均高于正常組（P<0.05）；化痰組大鼠除糖負(fù)荷后120 min血糖明顯高于正常組外（P<0.01），其余時(shí)間點(diǎn)的血糖與正常組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見圖1。

圖1 第14周各組大鼠OGTT結(jié)果

2.4 第14周各組大鼠ITT結(jié)果的比較 腹腔注射胰島素30 min后，高脂組大鼠的血糖較基礎(chǔ)值降低18%，而化痰組大鼠降低26%，各組在90 min時(shí)血糖均降低至最低值，高脂組、化痰組和正常組大鼠血糖分別降低36%、44%和56%，120 min時(shí)血糖已上升，高脂組的下降幅度仍低于化痰組（24% vs 32%），見圖2。

圖2 第14周各組大鼠ITT結(jié)果

3 討論

高脂飲食容易導(dǎo)致脂質(zhì)代謝紊亂，膽固醇和甘油三酯堆積，從而促使脂肪肝、高脂血癥等疾病的發(fā)生[1]。高脂飲食使得脾胃功能受損，脾運(yùn)化失常，形成膏脂停積體內(nèi)，膏脂過剩表現(xiàn)為痰濁為患而致痰濕內(nèi)阻，痰阻必然影響氣血運(yùn)行，而致氣滯、血瘀；氣滯、血瘀，水津不布又可化生痰濁[2]?！疤怠痹谥嗅t(yī)傳統(tǒng)理論中被認(rèn)為是肥胖相關(guān)疾病的重要病理因素。肥胖是產(chǎn)生胰島素抵抗的重要因素，高脂飲食容易導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)不同程度的胰島素抵抗[3-4]。中醫(yī)臨床研究表明，對(duì)于胰島素抵抗的治療應(yīng)該從“痰”論治[5-7]。

二陳湯方中主要為陳皮、半夏、茯苓、甘草，陳皮理氣降逆、調(diào)中開胃、燥濕化痰，半夏燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結(jié)，茯苓滲濕利水、健脾和胃、寧心安神，甘草補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、調(diào)和諸藥，全方起著燥濕化痰，理氣和中的作用[8]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，二陳湯加減對(duì)高脂血癥有較好的療效，可較好改善高脂血癥的血脂代謝異常[9]。

本研究用二陳湯對(duì)高脂飲食大鼠化痰祛濕，觀察二陳湯對(duì)高脂飲食大鼠血脂和胰島素抵抗的影響。結(jié)果顯示，高脂組大鼠血清中TC和TG的含量較正常組均明顯升高（P<0.01）?；到M大鼠血清中的TG含量較高脂組明顯降低（P<0.01），但與正常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；化痰組血清中的TC含量較高脂組明顯降低（P<0.01），且與正常組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）?？梢姡咧嬍硨?dǎo)致大鼠的血脂含量出現(xiàn)紊亂，而二陳湯具有調(diào)節(jié)血脂異常的作用。文獻(xiàn)[9-11]的研究結(jié)果均明確表明，二陳湯能夠有效地起到降低血脂的作用。但本研究的結(jié)果顯示，二陳湯對(duì)TG的調(diào)節(jié)作用較TC顯著，這其中的相關(guān)機(jī)制需要進(jìn)一步的研究探討。

OGTT和ITT的結(jié)果顯示，高脂組大鼠空腹及糖負(fù)荷后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的血糖均明顯高于正常組（P<0.05或P<0.01）；腹腔注射胰島素后，化痰組各時(shí)間點(diǎn)的血糖下降幅度均明顯高于高脂組，30 min時(shí)高脂組大鼠血糖較基礎(chǔ)值降低18%，而化痰組大鼠降低26%，120 min時(shí)血糖已上升，高脂組的下降幅度仍低于化痰組，分別為24%和32%。這表明高脂飲食的大鼠出現(xiàn)了一定程度的胰島素抵抗，經(jīng)過二陳湯化痰干預(yù)后，胰島素抵抗情況得以改善。胡智闐等[12]和李學(xué)軍等[13]的研究也都表明二陳湯能夠改善胰島素抵抗。

由本研究結(jié)果分析，高脂飲食大鼠出現(xiàn)血脂異常和胰島素抵抗等情況，而二陳湯可明顯降低高脂飲食大鼠的血脂，并減輕體重，同時(shí)改善胰島素抵抗情況。從中醫(yī)學(xué)角度看，高脂飲食引起的內(nèi)在病理機(jī)制以痰濕為主，其痰濕的物質(zhì)基礎(chǔ)與血脂異常和胰島素抵抗有關(guān)。

[1]林曼婷，范應(yīng)，陳少東，等.茵陳蒿湯調(diào)節(jié)高脂飲食誘導(dǎo)大鼠脂質(zhì)代謝紊亂的作用機(jī)制[J].中華中醫(yī)藥雜志，2011，26（10）：2428-2430.

[2]吳同玉，高碧珍，林山，等.不同方藥對(duì)胰島素抵抗模型大鼠血脂的影響[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，4（7）：470-472.

[3]朱夢(mèng)嬌，倪倩倩，姚根宏，等.高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖和肥胖抵抗大鼠胰島素敏感性和血脂譜改變[J].中國(guó)婦幼保健，2013，28（26）：4355-4357.

[4]王智華，宋光耀，劉晶，等.高脂飲食誘發(fā)胰島素抵抗大鼠模型的建立與評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，21（3）：244-245.

[5]熊紅萍，李燦東.代謝綜合征與痰瘀的辨治探討[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2009，7（2）：220-221.

[6]柳紅芳，陶飛寶.2型糖尿病合并脂代謝紊亂的中醫(yī)證候?qū)W研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，7（23）：6-10.

[7]石剛，劉婷.冠心病常見證候臨床流行病學(xué)調(diào)查[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，25（8）：1675-1677.

[8]康潔，張凌媛，丁珊珊，等.二陳湯對(duì)嗎啡依賴小鼠位置偏愛效應(yīng)的影響[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（32）：4-5.

[9]吳同玉，林山，鄭良普.二陳湯對(duì)高脂飲食Wistar大鼠體重及其血脂代謝的影響[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，36（11）：1218-1220.

[10]劉小鳳，鄭海南，王偉蘭.加味二陳湯治療高脂血癥的作用和機(jī)理研究[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2004，4（4）：72-73.

[11]孫蓉，劉持年.烏梅，生姜對(duì)二陳湯降脂作用影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥藥理與臨床，2000，16（4）：10-11.

[12]胡智闐，車念聰，夏蓉，等.二陳湯和桃紅四物湯對(duì)非酒精性脂肪性肝病胰島素抵抗影響的動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)研究[J].北京中醫(yī)藥，2009，28（4）：305-307.

[13]李學(xué)軍，楊叔禹，聶明，等.二陳湯方加減對(duì)2型糖尿病并發(fā)脂肪肝模型大鼠血糖，血脂，胰島素抵抗以及肝功能和肝臟脂肪變的影響[J].中國(guó)臨床康復(fù)，2006，10（11）：77-80.