劉婷 王仕平

摘要：本文通過實(shí)驗(yàn)，采用薄層色譜法，對不同產(chǎn)地的10批蒼耳草藥材進(jìn)行了系統(tǒng)的定性分析，研究和建立了蒼耳草的薄層色譜方法。這種方法靈敏、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好，可用于蒼耳草的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：蒼耳草 薄層色譜 綠原酸

蒼耳草為菊科植物蒼耳Xanthium sibiricum Patrin.干燥地上部分具有祛風(fēng)散熱、除濕解毒的功效，用于治療感冒、頭風(fēng)、頭暈、鼻淵、目赤、風(fēng)濕痹痛、拘攣麻木、目翳、風(fēng)癩、疔腫、熱毒瘡瘍、皮膚瘙癢，痢疾等癥狀。全草含蒼耳苷（strumaroside）、隱蒼耳內(nèi)酯（xanthinin）、蒼耳內(nèi)酯（xanthumin）、8-（3-異戊烯基）-5，7，3，4-四羥基黃酮、咖啡酸（caffeic acid）、1，4-二咖啡?？鼘幩?、β-谷甾醇、豆甾醇、二十八醇、β-香樹脂醇等。蒼耳草分布在全國各地，山東、江西宜春、湖北、江蘇及安徽等都是它的主產(chǎn)區(qū)。該品種類型多收載于各地方的藥材標(biāo)準(zhǔn)中，如《江西省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1996年版。為了更有效地控制蒼耳草的質(zhì)量，筆者參考了相關(guān)文獻(xiàn)，研究和建立了蒼耳草的TLC鑒別法。

一、儀器與試藥

儀器包括BP211D Sartorius電子天平（十萬分之一，由德國賽多利斯公司制造）；FA2004電子天平（萬分之一，由上海天平儀器公司制造）；KH-250DB型數(shù)控超聲波清洗器（由昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司制造）；CAMAG紫外觀測箱（254 nm/365 nm）（由瑞士卡瑪公司制造）；929型薄層鋪板儀。

試藥包括綠原酸對照品（由中國食品藥品檢定研究院提供，批號是110753-201214，含量為96.6%）；蒼耳草對照藥材（自采，經(jīng)本草考證為菊科植物蒼耳Xanthium sibiricum Patrin的干燥地上部分）；蒼耳草藥材（自采或市場購買）；硅膠GF254（由青島海洋化工廠生產(chǎn)）；聚酰胺薄膜（由臺州市路橋私家生化塑料廠生產(chǎn)）；其他試劑均為分析純。

二、方法與結(jié)果

第一步，取蒼耳草粉末（過三號篩）1g，置具塞錐形瓶中，加50%甲醇25 mL，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，進(jìn)行過濾，然后濾液蒸干，殘?jiān)?0%甲醇1mL進(jìn)行溶解，作為供試品溶液。另外，取蒼耳草對照藥材粉末（過三號篩）約1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取上述對照藥材溶液、供試品溶液、空白試劑溶液各2μL，分別點(diǎn)于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）為展開劑，展開，取出晾干，在紫外光燈（254 nm/365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，分別顯現(xiàn)相同顏色的熒光斑點(diǎn)，空白試劑無影響（見圖1）。

1～5.供試品；6.對照藥材；7～9.供試品；10.空白；11～12.供試品

圖1 薄層色譜圖

第二步，取蒼耳草粉末（過三號篩）2g，置具塞錐形瓶中，加乙醚25 mL，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）20 min，進(jìn)行過濾，濾液低溫?fù)]至約1 mL，作為供試品溶液。另外，取蒼耳草對照藥材粉末（過三號篩）約2 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗(yàn)，吸取上述對照藥材溶液、供試品溶液、空白試劑溶液各2 μL，分別點(diǎn)于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）為展開劑，展開，取出晾干，分別在日光和紫外光燈（254 nm/365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，分別顯現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)，空白試劑無影響（見圖2）。

1～5.供試品；6.對照藥材；7～9.供試品；10.空白；11～12.供試品

圖2 薄層色譜圖

第三步，取蒼耳草粉末（過三號篩）1g，置具塞錐形瓶中，加石油醚（30℃～60℃）25mL，超聲10 min（功率250 W，頻率40 kHz），放冷，棄去石油醚液，藥渣揮干，殘?jiān)酉←}酸1mL與乙酸乙酯20 mL，搖勻，超聲30 min，進(jìn)行過濾，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另取蒼耳草對照藥材粉末1g，同法制成對照藥材溶液。取綠原酸對照品適量，加甲醇制成2 mg·mL-1的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液、供試品溶液、空白試劑溶液各2μL，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出晾干，在紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品和對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，分別顯現(xiàn)相同顏色的熒光斑點(diǎn)，空白試劑無影響（見圖3）。

4.綠原酸；5.對照藥材 7.空白（A圖）；其他為供試品

圖3 薄層色譜圖

三、討論

在蒼耳子的薄層鑒別中，有的文獻(xiàn)采用蘆丁作為對照品。但是，在本文中，筆者采用了對照藥材和綠原酸對照品作為參照。

在第一個試驗(yàn)中，筆者分別考察了甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）、正丁醇-冰醋酸-水（4：1： 5）上層溶液、乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水（6：2：1：1）展開系統(tǒng)；在第二個試驗(yàn)中，筆者分別考察了環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）和正己烷-乙酸乙酯（9：1）展開系統(tǒng)；在第三個試驗(yàn)中，筆者分別考察了乙酸丁酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）上層溶液、乙酸乙酯-甲醇-甲酸（8：1：1）、醋酸展開系統(tǒng)，并同時采用了硅膠GF254薄層板及聚酰胺薄膜試驗(yàn)。

結(jié)果表明：在第一個實(shí)驗(yàn)中，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）展開的效果最好；在第二個實(shí)驗(yàn)中，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）為展開系統(tǒng)的效果最好；在第三個實(shí)驗(yàn)中，采用醋酸為展開劑，聚酰胺薄膜展開的效果最好。

綜上所述，本文采用了兩種不同極性的溶劑提取后展開，能夠很好地鑒別出蒼耳草的不同成分，可作為鑒別蒼耳草藥材的方法，同時也可以作為以蒼耳草為原料，采用不同提取工藝制劑的鑒別方式。

參考文獻(xiàn)：

[1]江西省衛(wèi)生廳.江西省中藥材標(biāo)準(zhǔn)（1996年版）[M].南昌：江西科學(xué)技術(shù)出版社，1996.

[2]南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典（第二版）[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2006.

[3]沈連生.中藥圖典[M].北京：華夏出版社，2006.

[4]孟繁智.新編中草藥圖譜大典[M].貴州：貴州科技出版社，2003.

[5]朱圣和.中國藥材商品學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1990.

[6]中華人民共和國藥典編委會.中國藥典（2010年版）[M]. 北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[7]尹靖先，鄧曉鴻，車曉彥等.蒼耳子的薄層層析鑒別研究[J].華西藥學(xué)雜志，2005，（1）.

[8]楊柳，吳金雄，許舜軍等.蒼耳子中酚酸類化合物的鑒別及綠原酸的含量測定[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)，2011， （19）.

[9]吳建偉，付小梅，譚道朋等.蒼耳子藥材薄層鑒別與含量測定[J].江西中醫(yī)藥，2011，（4）.

[10]尹靖先，車曉彥，鄧曉鴻.蒼耳子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，（3）.

（作者單位：劉婷 宜春職業(yè)技術(shù)學(xué)院；王仕平 宜春市食品藥品檢驗(yàn)所 ）