何長生，朱良強(qiáng)，占松鶴，王 軍，沈 艷，劉 華，周迎春，陳 靜

(安徽省動物疫病預(yù)防與控制中心，合肥230091)

豬瘟(Classical Swine Fever，CSF)是由豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus，CSFV)引起豬的一種高熱稽留、出血和高病死率為特征的高度接觸性傳染病，嚴(yán)重危害全球養(yǎng)豬業(yè)，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失［1－2］。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報(bào)告的動物疫?。?］，我國將其列為一類動物傳染病。目前，豬瘟在50多個國家和地區(qū)都有不同程度的發(fā)生和流行［4－6］。

至今，對該病尚無有效的治療藥物，疫苗免疫是唯一有效預(yù)防該病的手段［7］。為有效防控豬瘟，我國將其列為強(qiáng)制免疫病種。生產(chǎn)中使用的豬瘟疫苗為均弱毒活疫苗，主要有兩種:一種是細(xì)胞苗，另一種為脾淋組織苗。目前，這兩種疫苗均在安徽省使用，且由不少于20個廠家提供疫苗。為準(zhǔn)確掌握豬瘟疫苗免疫效果，給豬瘟防控工作提供依據(jù)和參考，2010年下半年至2012年上半年，對投放安徽省的豬瘟疫苗田間免疫效果進(jìn)行了監(jiān)測，現(xiàn)報(bào)道如下:

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清來源 2010年下半年至2012年上半年全國重大動物疫病集中強(qiáng)制免疫期間，委托安徽省縣級動物疫控機(jī)構(gòu)，采集免疫豬瘟細(xì)胞苗或豬瘟脾淋組織苗后1個月左右的豬血清，每個豬場按5%比例隨機(jī)采集，共采集了454個豬場的7439份血清。其中，種豬血清1375份，商品豬血清6064份。

1.1.2 檢測試劑 豬瘟病毒抗體阻斷ELISA檢測試劑盒，購自美國IDEXX公司，批號有:43200－V731、43220 －X561、43220 －X681、43220 －2431、43220 －2551、43220 －2571、43220 －2821。

1.1.3 疫苗 豬瘟細(xì)胞苗和豬瘟脾淋組織苗，主要由南京、成都、廣西等20家國內(nèi)豬瘟疫苗廠家生產(chǎn)，田間使用按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。

1.2 方法 采用ELISA檢測試劑盒對不同廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗對規(guī)模場和散養(yǎng)戶飼養(yǎng)的種豬及商品豬的免疫效果進(jìn)行了監(jiān)測和比較。

1.2.1 檢測方法 按照豬瘟病毒抗體阻斷ELISA檢測試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.2 判定標(biāo)準(zhǔn) 樣品的陰陽性按照試劑盒說明書進(jìn)行。樣品阻斷率=(陰性對照平均OD450值－樣品OD450值)/陰性對照平均OD450值×100%。阻斷率大于或等于40%，為陽性樣品;阻斷率小于或等于30%，為陰性樣品;樣品阻斷率在30% ～40%之間，為可疑樣品。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用卡方檢驗(yàn)(χ2)。

2 結(jié)果

2.1 種豬和商品豬豬瘟免疫效果 共檢測了1375份種豬血清、6064份商品豬血清，結(jié)果見表1。

表1 不同類型豬群使用豬瘟疫苗免疫效果

可以看出:(1)種豬和商品豬的豬瘟免疫抗體合格率分別為80.07%和74.11%，達(dá)到了農(nóng)業(yè)部免疫抗體合格率不低于70%的要求，兩者之間差異不顯著(P＞0.05);(2)種豬的脾淋組織苗和細(xì)胞苗的免疫抗體合格率分別為77.39%和92.59%，差異不顯著(P＞0.05);(3)商品豬的脾淋組織苗和細(xì)胞苗的免疫抗體合格率分別為76.05%和66.87%，差異極其顯著(P＜0.01)。

由此可見，種豬和商品豬的豬瘟免疫效果總體良好，種豬的脾淋組織苗和細(xì)胞苗免疫效果相當(dāng)，商品豬的脾淋組織苗免疫效果顯著好于細(xì)胞苗。

2.2 不同飼養(yǎng)方式豬瘟免疫效果 共檢測了6371份規(guī)模場豬血清、1068份散養(yǎng)戶豬血清，結(jié)果見表2。

表2 不同飼養(yǎng)方式的豬群使用豬瘟疫苗免疫效果

可以看出:(1)規(guī)模場和散養(yǎng)戶豬瘟免疫抗體合格率分別為75.37%和74.25%，達(dá)到了農(nóng)業(yè)部免疫抗體合格率不低于70%的要求，兩者之間差異不顯著(P＞0.05);(2)規(guī)模場脾淋組織苗和細(xì)胞苗的免疫抗體合格分別為76.93%和69.82%，差異顯著(P＜0.05);(2)散養(yǎng)戶脾淋組織苗和細(xì)胞苗的免疫抗體合格率分別為73.00%和83.21%，差異不顯著(P ＞0.05)。

由此可見，規(guī)模場和散養(yǎng)戶豬瘟免疫效果均較好，規(guī)模場的脾淋組織苗免疫效果明顯好于細(xì)胞苗，散養(yǎng)戶的脾淋組織苗和細(xì)胞苗免疫效果相當(dāng)。

2.3 不同年份監(jiān)測的豬瘟免疫效果 共檢測了5913份免疫脾淋組織苗豬血清、1526份免疫細(xì)胞苗血清，結(jié)果見表3。

表3 不同年份監(jiān)測的豬瘟免疫效果

可以看出:(1)脾淋組織苗和細(xì)胞苗總體抗體合格率分別為76.31%和70.97%，達(dá)到了農(nóng)業(yè)部免疫抗體合格率不低于70%的要求，兩者之間差異不顯著(P＞0.05)。2010年和2012年，脾淋組織苗和細(xì)胞苗差異不顯著(P＞0.05);2011年，脾淋組織苗和細(xì)胞苗差異極其顯著(P＜0.01)。(2)脾淋組織苗總體免疫合格率為76.31%。2010、2011、2012年的抗體合格率分別為79.09%、74.70%和79.45%，差異不顯著(P ＞0.05)。(3)細(xì)胞苗總體抗體合格率為70.97%。2010、2011、2012 年的抗體合格率分別為 80.60%、39.47%和 75.28%，2010與2012差異不顯著(P＞0.05)，2011年與其余兩年相比，差異極其顯著(P＜0.01)。

結(jié)果表明，脾淋組織苗和細(xì)胞苗免疫效果均較好，但不同年份，脾淋組織苗免疫效果較穩(wěn)定，細(xì)胞苗免疫效果不太穩(wěn)定。

2.4 不同廠家疫苗豬瘟免疫效果 選取了疫苗用量在我省較大的南京、成都、廣西等地 A、B、C、D、E、F、G等6個廠的疫苗進(jìn)行免疫效果監(jiān)測，結(jié)果見表4。

可以看出:(1)A廠、E廠、F廠疫苗免疫效果最好，差異不明顯(P＞0.05)，與 C廠、G廠相比，差異極其顯著(P＜0.01)，與B廠、D廠相比，差異顯著(P＜0.05);(2)G廠疫苗免疫效果較差，與B廠、D廠相比，差異顯著(P＜0.05)，與C廠相比，差異不顯著(P＞0.05);(3)B廠、C、廠、D廠疫苗免疫效果相當(dāng)，差異不顯著(P＞0.05)。

表4 不同廠家疫苗豬瘟疫苗免疫效果

結(jié)果表明，不同廠家疫苗質(zhì)量存在差異，六個廠中，G廠疫苗免疫效果較差，其免疫抗體合格率僅為63.56%，達(dá)不到不低于70%的要求。

3 討論

3.1 我省豬瘟疫苗免疫效果總體良好。從監(jiān)測結(jié)果來看，無論是種豬還是商品豬，無論是規(guī)模場還是散養(yǎng)戶，無論是種豬場還是商品豬場，豬瘟疫苗的免疫抗體合格率均超過了70%。說明近年來我省大力推行豬瘟疫苗強(qiáng)制免費(fèi)免疫，提高豬群群體免疫力，已取得了一定的成效。

3.2 從本次監(jiān)測結(jié)果來看，不同廠家疫苗的免疫效果有差異，少數(shù)廠家疫苗免疫效果達(dá)不到農(nóng)業(yè)部要求。這可能與不同廠家疫苗毒株來源、生產(chǎn)工藝、疫苗抗原含量等因素有關(guān)。因此，相關(guān)部門要加強(qiáng)疫苗質(zhì)量監(jiān)管，從根本上杜絕劣、次、假疫苗流入市場。

3.3 從本次監(jiān)測結(jié)果來看，豬瘟脾淋組織苗免疫效果要優(yōu)于豬瘟細(xì)胞苗，這與曹世禎等［8］試驗(yàn)結(jié)果一致，可能與脾淋組織液中的確含有某些免疫增強(qiáng)因子，能夠明顯增強(qiáng)活疫苗的免疫作用有關(guān)［9］。但是，不同年份，豬瘟細(xì)胞苗的免疫效果波動性較大。經(jīng)過分析，2011年之前(包括2011年)我省豬瘟細(xì)胞疫苗用量很小，2010年使用的疫苗主要是F廠的，2011年主要是G廠的，而F廠疫苗免疫效果較好，G廠疫苗的免疫效果較差，從而導(dǎo)致2011年豬瘟細(xì)胞疫苗免疫抗體合格率只有39.47%?？梢娂訌?qiáng)疫苗質(zhì)量的監(jiān)管顯得尤為重要。

3.4 部分豬場豬瘟免疫不到位。本次監(jiān)測，雖然大多數(shù)豬場豬瘟疫苗免疫效果較好，但是仍有少部分豬場豬瘟免疫抗體水平達(dá)不到保護(hù)水平。推測其原因可能有以下幾種:一是與豬群中廣泛存在豬瘟病毒的持續(xù)感染，多病原感染、免疫抑制、母源抗體參差不齊等因素的存在，使常規(guī)免疫劑量和完全統(tǒng)一的免疫預(yù)防接種，很難達(dá)到有效控制豬瘟的目的;二是與疫苗的質(zhì)量有關(guān)，有學(xué)者指出，當(dāng)前我國豬瘟疫苗的生產(chǎn)主要存在兩大問題，即疫苗中病毒含量低和疫苗污染問題［10］。同時，從本次監(jiān)測結(jié)果來看，不同疫苗生產(chǎn)廠家，疫苗免疫效果參差不齊，而且細(xì)胞苗免疫效果不穩(wěn)定;三是可能與疫苗接種技術(shù)和豬場管理有關(guān)，部分養(yǎng)殖場免疫程序不合理，農(nóng)村散養(yǎng)戶補(bǔ)免不及時，疫苗使用和保管不當(dāng)、管理粗放等，往往導(dǎo)致抗體水平較低。因此，規(guī)模豬場應(yīng)定期或不定期開展豬瘟免疫抗體水平監(jiān)測，及時掌握豬群免疫水平，以利于豬瘟的防控。

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［2］Ruggli N，Summerfield A，F(xiàn)iebach A R，et al.Classical swine fever virus can remain virulent after elimination of the interferon regulatory factor 3 － degrading function of Npro［J］.J Virol，2009，83:817－829.

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