劉 芬，呂文偉，陳 霞，王秋靜

（吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130021）

“家兔有機(jī)磷中毒與解救”作為傳統(tǒng)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中有著重要意義，是醫(yī)學(xué)生必做的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。學(xué)生從實(shí)驗(yàn)中可觀察到機(jī)體從正常生理狀態(tài)到有機(jī)磷中毒狀態(tài)的病理變化以及藥物對(duì)中毒治療的整個(gè)作用過(guò)程，該實(shí)驗(yàn)為機(jī)能綜合性實(shí)驗(yàn)。急性有機(jī)磷中毒使機(jī)體器官功能紊亂，出現(xiàn)多種臨床癥狀，但以往該實(shí)驗(yàn)用肉眼粗略觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呼吸頻率、肌張力、瞳孔大小等指標(biāo)，對(duì)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的觀察不定量、不直接、不準(zhǔn)確。我們通過(guò)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法，完善實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，應(yīng)用先進(jìn)儀器，客觀評(píng)價(jià)有機(jī)磷中毒的各種癥狀指標(biāo)。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中結(jié)合臨床檢查項(xiàng)目和用藥情況培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐能力[1]。

1 增加實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1.1 心電圖監(jiān)測(cè)

有機(jī)磷中毒表現(xiàn)為各類(lèi)心律失常和心肌細(xì)胞損害，嚴(yán)重的心律失常已成為急性有機(jī)磷中毒后期主要致死原因[2]。臨床上已將心電圖（ECG）檢查作為判斷急性有機(jī)磷中毒患者中毒程度和預(yù)后的指標(biāo)，所以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心電圖監(jiān)測(cè)是非常重要的項(xiàng)目，學(xué)生可直觀地了解有機(jī)磷中毒對(duì)心肌電活動(dòng)的影響。心電圖表現(xiàn)為心動(dòng)過(guò)速、過(guò)緩和Q-T間期延長(zhǎng)。通過(guò)對(duì)心電圖的監(jiān)測(cè)，可準(zhǔn)確記錄心率變化，也可觀察到肌顫的出現(xiàn)。

1.2 血壓監(jiān)測(cè)

急性有機(jī)磷中毒可抑制血管運(yùn)動(dòng)中樞造成血壓下降。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中增加頸總動(dòng)脈插管測(cè)量血壓，可以直接監(jiān)測(cè)血壓變化，同時(shí)以備取血測(cè)量膽堿酯酶活性。

1.3 呼吸監(jiān)測(cè)

有機(jī)磷中毒時(shí)，呼吸系統(tǒng)癥狀最為明顯。由支氣管平滑肌收縮、呼吸道腺體分泌增加引起的呼吸困難導(dǎo)致缺氧，呼吸流量和頻率發(fā)生明顯改變。在實(shí)驗(yàn)中增加動(dòng)物氣管插管，用PowerLab記錄系統(tǒng)直接測(cè)量呼吸流量、呼吸頻率和幅度指標(biāo)。

以上指標(biāo)可用PowerLab記錄系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，如圖1、2。

圖1 PowerLab記錄系統(tǒng)

1.4 血?dú)夥治?/h3>

有機(jī)磷中毒時(shí)出現(xiàn)呼吸困難，導(dǎo)致血氧變化和電解質(zhì)紊亂，因此血?dú)夥治鍪桥卸ㄓ袡C(jī)磷中毒程度很重要的指標(biāo)[3]，也是臨床上快速診斷和判定預(yù)后的重要指標(biāo)。所以實(shí)驗(yàn)增加血?dú)夥治鲋笜?biāo)測(cè)定，使學(xué)生學(xué)習(xí)和掌握用AVL-OPTI血?dú)夥治鰞x測(cè)定血氧飽和度和電解質(zhì)的方法，培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力。

圖2 有機(jī)磷中毒的ECG表現(xiàn)

2 改進(jìn)取血方法

2.1 膽堿酯酶活性測(cè)定意義

有機(jī)磷酸酯類(lèi)為持久性抗膽堿酯酶劑，進(jìn)入機(jī)體后，能與膽堿酯酶結(jié)合并使后者失去水解乙酰膽堿的能力，導(dǎo)致乙酰膽堿（ACh）在體內(nèi)大量堆積，進(jìn)而激動(dòng)M、N受體并作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，產(chǎn)生M、N樣及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀?？鼓憠A藥阿托品能解除有機(jī)磷中毒的M樣癥狀，而解磷定可恢復(fù)乙酰膽酯酶（AXhE）水解乙酰膽堿的能力，對(duì)M、N樣癥狀均有效[4]。臨床上膽堿酯酶活性測(cè)定是對(duì)急性有機(jī)磷中毒患者進(jìn)行早期診斷、判斷療效和預(yù)后的重要指標(biāo)，對(duì)治療具有指導(dǎo)意義[5]。所以膽堿酯酶活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)是七年制醫(yī)學(xué)生必做的實(shí)驗(yàn)，以學(xué)習(xí)AChE活性的測(cè)定方法，觀察中毒前后及使用不同解救藥后AChE活性的變化。

2.2 取血方法的改進(jìn)

在AChE活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，我們?cè)O(shè)計(jì)了7個(gè)取血時(shí)間點(diǎn)，即給藥前、中毒癥狀明顯時(shí)、給阿托品待癥狀明顯緩解后以及給予解磷定解救后 0 min、10 min、20 min、30 min 各取血 0.8 ml[6]。在以往的實(shí)驗(yàn)中，采用刀片橫斷耳緣靜脈采血法，由于有機(jī)磷中毒后血管收縮，用刀片采血時(shí)血液凝固變黑不易流出[7]，導(dǎo)致錯(cuò)過(guò)最佳取血時(shí)間甚至無(wú)法取出血來(lái)，直接影響了AChE活性測(cè)定結(jié)果。通過(guò)實(shí)驗(yàn)摸索，我們采用家兔頸總動(dòng)脈插管取血測(cè)量AChE活性，由于動(dòng)脈血豐富不易凝固，取血快、時(shí)間短、取血量準(zhǔn)確，所以實(shí)驗(yàn)效果非常好，大大提高了課堂實(shí)驗(yàn)成功率。3先進(jìn)儀器在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用

醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的橋梁，起著承前啟后的重要作用。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)教學(xué)中不單通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作讓學(xué)生初步掌握操作要點(diǎn)，還讓學(xué)生使用一些特定的實(shí)驗(yàn)儀器來(lái)了解未來(lái)臨床和科研工作中常用的儀器[8]。實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行以及結(jié)果的準(zhǔn)確性依賴于精確、敏感的先進(jìn)儀器設(shè)備，完備的實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的基本條件，儀器設(shè)備的質(zhì)量決定實(shí)驗(yàn)研究水平的高低。本實(shí)驗(yàn)使用PowerLab記錄系統(tǒng)同步實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)有機(jī)磷中毒及解救藥物對(duì)心電、血壓、呼吸頻率和呼吸流量的影響，而且是在家兔清醒狀態(tài)下進(jìn)行，不影響觀察肌張力、瞳孔大小指標(biāo)的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行測(cè)量、分析和統(tǒng)計(jì)，培養(yǎng)學(xué)生處理問(wèn)題和科學(xué)分析能力。PowerLab記錄系統(tǒng)抗干擾能力強(qiáng)、性能穩(wěn)定，適合科研和實(shí)驗(yàn)教學(xué)。實(shí)驗(yàn)采用AVL-OPTI血?dú)夥治鰞x測(cè)定血氧飽和度和電解質(zhì)變化，能提供快速方便的全血 PH、PCO2、PO2、Na+、K+結(jié)果。學(xué)生在教師指導(dǎo)下自己操作，一方面拓寬了學(xué)生的知識(shí)面，另一方面還可讓學(xué)生學(xué)會(huì)獨(dú)立操作精密儀器，培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐能力，為今后的科研和臨床工作奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

4 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)改革實(shí)驗(yàn)方法，增加實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，應(yīng)用先進(jìn)儀器，豐富實(shí)驗(yàn)課教學(xué)，使課堂知識(shí)與臨床實(shí)踐緊密結(jié)合，激發(fā)了學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)課的興趣，提高了實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，人才培養(yǎng)的要求增高，今后的實(shí)驗(yàn)教學(xué)應(yīng)加大改革力度，淘汰陳舊的實(shí)驗(yàn)方法，引進(jìn)并應(yīng)用先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)手段，進(jìn)一步開(kāi)發(fā)先進(jìn)儀器在機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用，更新實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，使機(jī)能實(shí)驗(yàn)課與培養(yǎng)高素質(zhì)應(yīng)用型人才的要求相適應(yīng)，從而提高學(xué)生綜合素質(zhì)。