田雨香 張 菁

（上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院,上海 200237）

乙型肝炎病毒大蛋白檢測的臨床意義

田雨香 張 菁

（上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院,上海 200237）

目的探尋乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒表面大蛋白（LHBs）表達(dá)量的變化及其與病毒載量的相關(guān)性。方法對臨床確診為慢性乙型肝炎的170例病例及28例健康對照血清樣本分析，ELISA檢測乙型肝炎表面大蛋白的含量、實時定量PCR檢測乙型肝炎病毒。結(jié)果乙型肝炎病毒表面大蛋白在乙型肝炎患者的血清中表達(dá)，在非乙型肝炎的患者中不表達(dá)，并且和乙型肝炎病毒的載量成正相關(guān)。結(jié)論乙型肝炎病毒表面大蛋白的表達(dá)，可以作為臨床感染乙型肝炎病毒及臨床療效判斷的參考依據(jù)。

乙型肝炎病毒；大蛋白；病毒載量；血清

乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染性疾病之一,而我國是慢性乙型肝炎（cHB）的高發(fā)區(qū),感染率達(dá)到10%～15%。近年來研究發(fā)現(xiàn),乙型肝炎病毒表面的大蛋白（LHBs）與HBV的復(fù)制密切相關(guān),是HBV感染、復(fù)制及乙型肝炎患者的診斷、治療和預(yù)后的一個新的標(biāo)志。本文通過對170例慢性乙型肝炎患者同時進(jìn)行LHBs檢測,并將結(jié)果進(jìn)行比較和分析,探討乙型肝炎患者血清中LHBs與HBV-DNA的關(guān)系。

1 對象與方法

1.1 患者資料:選擇2010年10月至2011年3月在中醫(yī)肝科門診就診的慢性乙型肝炎患者,診斷按2000年西安會議《病毒性肝炎防治方案標(biāo)準(zhǔn)》[1]排除其他病毒感染:HAV,HCV,HDV,HEV及HIV。非乙型肝炎患者（脂肪肝及丙型肝炎患者或者健康人）28例,作為正常對照組。采集靜脈血,同時進(jìn)行LHBs和HBV-DNA 檢測,LHBs檢測試劑盒由熱景公司提供,ELISA方法,酶標(biāo)儀為伯樂550型,HBV-DNA檢測試劑為廣州達(dá)安生產(chǎn),ABI7000型熒光定量PCR進(jìn)行擴(kuò)增。

1.2 統(tǒng)計方法:比較病毒載量和大蛋白的相關(guān)性,病毒載量取對數(shù),進(jìn)行t檢驗,同時以病毒含量分組,用χ2檢驗比較各組大蛋白含量的差異,應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

170例患者符合納入標(biāo)志,平均年齡48.6歲,其中女性68例,經(jīng)檢測,病毒載量和大蛋白的結(jié)果,經(jīng)Pearson檢驗,相關(guān)系數(shù)為r=0.828, P＜0.01。按病毒載量分為三組:單位IU/mL。①組:毒載量＜103男性14例,女性9例,平均年齡50.3歲,LHBs檢測結(jié)果為（0.027± 0.014）；②組:病毒載量為103～106 男性51例,女性35例,平均年齡48.8歲,LHBs檢測結(jié)果為（0.286±0.091）；③組:病毒載量＞106男性為37例,女性為24例,LHBs檢測結(jié)果為0.937±0.214；④組:為非乙型肝炎患者組,男性17例,女性11例,平均年齡54.2歲,乙型肝炎病毒含量均低于檢測下限并且擴(kuò)增曲線無抬高,LHBs檢測結(jié)果均為陰性,部分結(jié)果為負(fù)值。各實驗組相關(guān)資料見表1。

表1 各實驗組臨床資料

3 討 論

乙型肝炎病毒的外膜蛋白有三種:表面抗原、PreS1抗原和PreS2抗原,組裝成三種不同的HBV顆粒,大蛋白（LHBs）與含有HBVDNA的Dane顆粒關(guān)系最為密切[2],是由表面抗原。國內(nèi)外的基礎(chǔ)及臨床研究表明:LHBs可以激活蛋白激酶C,導(dǎo)致c-Raf/MEK信號通路的激活,表明LHBs具有轉(zhuǎn)錄激活功能[3]。魏紅山課題組經(jīng)過48周的阿德福韋酯治療慢性肝炎的系列血清乙型肝炎病毒LHBs的動態(tài)監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)治療前患者血清LHBs的抗病毒治療效果有一定的預(yù)測作用,并且LHBs的含量和HBV-DNA拷貝數(shù)的對數(shù)值有相關(guān)性[4]本文研究結(jié)果與其基本一致,即隨著乙型肝炎病毒含量的增加,大蛋白的濃度也隨之增加。浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院傳染病研究所的研究表明:在拉米夫定治療應(yīng)答明顯的患者中,HBV LHBs比HBV DNA轉(zhuǎn)陰大約晚5個月,結(jié)合臨床,抗病毒治療后HBV DNA陰轉(zhuǎn)后停藥相當(dāng)比例患者病情反彈[5],因此,研究人員認(rèn)為治療效果監(jiān)測單獨采用HBV DNA指標(biāo)是不夠的,應(yīng)該增加對乙型肝炎病毒復(fù)制有轉(zhuǎn)錄激活作用的乙型肝炎LHBs的檢測。在臨床診斷治療病毒性乙型肝炎時,需綜合考慮各種因素,LHBs可以作為感染、復(fù)制、病情觀察和預(yù)后評估的聯(lián)合監(jiān)測指標(biāo).尤其對無條件開展DNA檢測的中小型實驗室。可將其列為乙型肝炎感染的常規(guī)輔助診斷項目來推廣應(yīng)用。

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Clinical Significance of Testing the Large Protein on the Surface of Hepatitis B Virus in the Serum

TIAN Yu-xiang, ZHANG Jing
(DaHua Hospital of Xuhui District, Shanghai 200237, China)

ObjectiveTo find the relationtion of the large protein on the surface of hepatitis B virus(LHBs) and loading of hepatitis B virus in the serum .MethodsTesting the concentration of LHBs by ELISA and loading of hepatitis B virus by real-time PCR in serum of 170 patients and 28 controls.ResultThere are some LHBs in the serum of patients with hepatitis B ,as the same time they are positive correlation and there are not any LHBs in the healthy control.ConclusionThe large protein on the surface of hepatitis B virus could regard as a marker thought which indicate the infection hepatitis B virus and effect of the treatment.

Hepatitis B virus; Large protein (LHBs); Loading of the virus; Serum

R512.62

B

1671-8194（2014）25-0097-02

上海市科學(xué)技術(shù)委員會科技支撐項目（編號：1340190290A）