高紅強(qiáng) 黃江波

青藤堿在器官移植免疫耐受方面的研究進(jìn)展

高紅強(qiáng) 黃江波

器官移植術(shù)是當(dāng)前公認(rèn)的治療各種終末期器官衰竭的有效學(xué)科甚至是常規(guī)手段。半個(gè)多世紀(jì)以來器官移植的手術(shù)技術(shù)已經(jīng)非常成熟, 目前影響器官移植患者術(shù)后生存率及生活質(zhì)量的主要因素是器官間的免疫排斥反應(yīng)。隨著技術(shù)的進(jìn)步, 越來越多的新藥物應(yīng)用于抗免疫排斥反應(yīng)。其中中藥提取物具備有效且毒性低的優(yōu)點(diǎn), 受到廣泛關(guān)注。青藤堿是從中藥青風(fēng)藤中提純出來的一種生物堿單體, 其具有免疫抑制、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用, 當(dāng)前在器官抗免疫排斥反應(yīng)的基礎(chǔ)研究越來越廣泛, 是一種有良好應(yīng)用前景的新型免疫抑制劑。

青藤堿；器官移植；免疫排斥

自20世紀(jì)中葉以來, 器官移植手術(shù)技術(shù)和圍手術(shù)期治療水平不斷提高, 器官移植的免疫學(xué)理論逐漸建立并完善,新型免疫抑制藥物大量出現(xiàn)并應(yīng)用于臨床。隨著腎、心臟、肝、角膜移植等相繼獲得成功, 術(shù)后患者的生存率和生活質(zhì)量得到明顯提高, 器官移植術(shù)已成為治療器官衰竭的重要手段。但是移植術(shù)后首先面臨的問題就是免疫排斥反應(yīng)。中醫(yī)是我國的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué), 中醫(yī)藥已廣泛用于移植的科學(xué), 特別是在腎移植中應(yīng)用最廣泛的。國內(nèi)一些研究者對(duì)抗排斥的藥物進(jìn)行了大量研究, 一些抑制免疫功能的藥物, 被廣泛應(yīng)用于移植領(lǐng)域, 并取得了一定的成果?，F(xiàn)對(duì)青藤堿在器官移植免疫耐受方面的研究予以綜述。

1 青藤堿的作用

青藤堿(alkaloid sinomenine, SIN)是從中藥防己科植物青風(fēng)藤中提取的一種生物堿單體, 現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于臨床, 藥用多為其鹽酸鹽, 主要用于對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及系統(tǒng)性紅斑狼瘡等各種風(fēng)濕免疫性疾病以及治療心律失常,它具有免疫抑制、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗心律失常、抗炎等藥理作用。風(fēng)濕性疾病的治療主要就是利用了青藤堿的免疫抑制作用, 隨著免疫抑制作用研究的逐步深入,近年來, 逐漸開始被用于青藤堿移植免疫耐受研究的各種方面。

2 青藤堿在器官移植免疫排斥研究中的作用

2. 1 青藤堿在腎移植免疫排斥中的研究現(xiàn)狀 腎移植是目前最成熟的器官移植手術(shù)之一, 是治療腎功能衰竭的主要手段, 術(shù)后大量的免疫抑制劑也應(yīng)用于腎移植后的抗免疫排斥等的治療, 常用的如環(huán)孢素A等。但CsA毒副作用如肝、腎毒性等問題一直困擾臨床醫(yī)生及患者。青藤堿作為中藥成分現(xiàn)受到廣泛研究。廖德懷等［1］利用青藤堿、環(huán)孢素A作用于腎移植術(shù)后的大鼠, 檢測(cè)受體鼠血中的白細(xì)胞介素6, 證明青藤堿對(duì)同種異體大鼠腎移植急性排斥反應(yīng)有確切的抗免疫排斥作用,其能明顯降低白細(xì)胞介素6的濃度。秦國慶等［2］構(gòu)建大鼠腎移植模型, 術(shù)后予以青藤堿等處理, 檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞PFP表達(dá)水平, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)青藤堿能下調(diào)受體大鼠血中淋巴細(xì)胞穿孔素的表達(dá)水平,進(jìn)一步影響參與急性排斥反應(yīng)的淋巴細(xì)胞起作用。王毅等［3］構(gòu)建大鼠腎移植模型, 術(shù)后予以青藤堿、環(huán)孢素A等作用, 取移植腎組織, 檢測(cè)其中腫瘤壞死因子(TNF)-α、CD80分子表達(dá)水平的變化。結(jié)果表明SIN可能通過調(diào)低移植腎組織中TNF-α及CD80分子的表達(dá)水平而產(chǎn)生抗免疫排斥作用；并與CsA存在協(xié)同作用。王毅等［4］還結(jié)果證明SIN可能通過抑制受體鼠外周血CD4+細(xì)胞增殖 ,降低TNFα、IFNγ的表達(dá)水平 ,從而對(duì)同種異體大鼠腎移植起抗免疫排斥作用。楊龐等［5］利用大鼠腎移植模型術(shù)后給予青藤堿等處理, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)SIN能顯著降低腎移植大鼠外周血T淋巴細(xì)胞 ,且主要是降低CD4+T細(xì)胞 ,并與CsA有協(xié)同作用。楊龐等［6］還發(fā)現(xiàn)青藤堿作用后受體鼠外周血IL - 2水平較對(duì)照組下降。

2. 2 青藤堿在肝移植免疫排斥中的研究 肝移植已經(jīng)成為當(dāng)前臨床上治療急慢性肝衰竭的唯一有效的途徑。但抗免疫排斥藥物及應(yīng)用方案仍存在很多弊端,找尋低毒、高效及價(jià)格低廉的抗免疫排斥藥物受到廣泛關(guān)注。蔡振剛等［7］利用大鼠原位肝移植模型, 術(shù)后予以青藤堿等處理, 并檢測(cè)相關(guān)指標(biāo), 結(jié)果顯示青藤堿能夠抑制促炎性因子IL-2和sICAM-1的分泌,促進(jìn)抑炎性因子IL-10及TGF-β1的表達(dá)上調(diào),抑制炎癥反應(yīng)。蔡振剛等［8］大鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)青藤堿能抑制IL-2分泌, 降低TGF-β表達(dá), 增強(qiáng)IL-10分泌；同時(shí)受體肝臟病理結(jié)果證明SIN能夠減輕移植術(shù)后的肝臟損害。蔡振剛等［9］利用彩色多普勒血流成像技術(shù)觀測(cè)大鼠原位肝移植術(shù)后肝臟的血流情況, 結(jié)合病理切片情況, 結(jié)果表明青藤堿處理后的大鼠門靜脈血流速度高于空白對(duì)照組, 而病理損害程度低于空白對(duì)照組；證明青藤堿減輕了移植排斥反應(yīng), 對(duì)肝臟有保護(hù)作用。林峰等［10］在研究大鼠肝移植缺血再灌注損傷的過程中發(fā)現(xiàn)：相較于對(duì)照組青藤堿高低劑量術(shù)后7 d存活率顯著提高, 青藤堿治療組的ALT水平明顯低于對(duì)照組；肝組織中的TNF-α、IL-1βmRNA表達(dá)與對(duì)照組相比均顯著降低,說明青藤堿可以抑制組織中TNF-α、IL-1β等炎癥性細(xì)胞因子表達(dá),抑制肝臟細(xì)胞凋亡, 起到保護(hù)肝移植過程中缺血再灌注損傷的效果。

2. 3 青藤堿在心臟移植免疫排斥中的研究 陳明寶等［11］在研究青藤堿對(duì)大鼠心臟移植急性排斥反應(yīng)的影響過程中發(fā)現(xiàn), 血清透明質(zhì)酸在青藤堿組與對(duì)照組間有明顯差異, 說明血清透明質(zhì)酸可以作為心臟移植排斥的指標(biāo)之一。王海東等［12］在研究青藤堿聯(lián)合環(huán)孢素A對(duì)大鼠移植心術(shù)后存活時(shí)間的研究中發(fā)現(xiàn)青藤堿對(duì)Con A和MLC激活的單個(gè)核細(xì)胞增殖具有顯著的抑制作用,并與CsA有協(xié)同作用；能一定程度延長(zhǎng)術(shù)后移植心的存活時(shí)間。楊帆等［13］在研究大鼠心臟移植排斥反應(yīng)中發(fā)現(xiàn)青藤堿組炎癥反應(yīng)有所減輕,同時(shí)較少淋巴細(xì)胞浸潤(rùn);組織僅極少量表達(dá)ICAM-1和IL-2,證明青藤堿能減輕排斥反應(yīng),明顯延長(zhǎng)移植物的存活。同樣王煒等［14］也發(fā)現(xiàn)在小鼠心臟移植術(shù)后, 青藤堿處理組較對(duì)照組IL-2mRNA表達(dá)水平明顯減低。徐廣全等［15］研究發(fā)現(xiàn)現(xiàn)在相比于對(duì)照組, 青藤堿組移植物的存活時(shí)間顯著延長(zhǎng), 炎癥、血管炎癥、心肌水腫和心肌壞死顯著減少, COX-2蛋白和mRNA表達(dá)在移植后第5天均減少, 所以青藤能延長(zhǎng)心臟同種異體移植物的存活時(shí)間, 減輕炎癥反應(yīng)和保護(hù)心肌損傷。

2. 4 青藤堿在小腸移植免疫排斥中的研究 馮舟等［16］在研究青藤堿對(duì)小腸移植術(shù)后腸活動(dòng)功能影響時(shí)發(fā)現(xiàn)青藤堿治療組較生理鹽水治療組能明顯提高小腸的活動(dòng)功能、減少小腸的炎性損傷程度。靳小石等［17］通過青藤堿作用于小腸移植術(shù)后的大鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)青藤堿處理組在慢性排斥反應(yīng)病理評(píng)分、CD68的表達(dá)水平、TGFβ1和PDGF mRNA的轉(zhuǎn)錄水平及蛋白定量及免疫組化結(jié)果上均明顯高于同系對(duì)照組, 說明青藤堿對(duì)小腸移植有影響, 尚需進(jìn)一步研究其具體效應(yīng)及機(jī)制。2. 5 青藤堿在眼結(jié)膜移植免疫排斥中的研究 我國每年約有數(shù)萬因角膜疾病導(dǎo)致失明的患者, 角膜移植術(shù)是這些患者復(fù)明非常重要的手段。但是手術(shù)后1年的角膜成活率仍然不是很理想, 而尋找高效低毒且經(jīng)濟(jì)的免疫抑制劑是當(dāng)前研究熱點(diǎn)之一。姚建兵等［18］在研究鹽酸青藤堿滴眼液對(duì)角膜移植術(shù)后排斥反應(yīng)的影響中利用大鼠同種異體穿透性角膜移植動(dòng)物模型, 術(shù)后予以青藤堿高中低不同劑量青藤堿作用, 結(jié)果表明不同濃度青藤堿對(duì)大鼠在角膜移植排斥指數(shù)及發(fā)生角膜移植排斥時(shí)間指標(biāo)上均較對(duì)照組有顯著性差異, 說明青藤堿可以對(duì)角膜移植免疫排斥反應(yīng)有防治作用, 且以中濃度效果更好。

3 小結(jié)

近年來, 學(xué)者們通過大量實(shí)驗(yàn)已證明青藤堿的免疫抑制、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用, 但是青藤堿具體的免疫治療機(jī)制仍然不是十分清楚, 嚴(yán)重影響其在國內(nèi)外尤其是歐美的廣泛推廣應(yīng)用。作為一種新生免疫抑制劑, 青藤堿已顯示其抗免疫排斥能力強(qiáng), 不良反應(yīng)小的特點(diǎn), 隨著研究的不斷推進(jìn), 必將在抗移植免疫排斥方面甚至更廣的臨床領(lǐng)域有重要用途。

［1］ 廖德懷,陳正,羅志剛,等.青藤堿對(duì)腎移植大鼠靜脈血白細(xì)胞介素6的影響.中國組織工程研究與臨床康復(fù), 2009,35(9): 521-524.

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［7］ 蔡振剛,王忠裕,等. Sinomenine對(duì)移植肝急性排斥反應(yīng)影響及CDFI、IBS對(duì)肝臟病理損害評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)研究.優(yōu)秀博士論文庫

［8］ 蔡振剛,于志軍,溫爽,等.王忠裕青藤堿對(duì)大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)的影響.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2010,40(4):85-87

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［10］ 林峰,慕寧,王海梁,等.青藤堿對(duì)大鼠原位肝移植缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2008,48(12):241-245.

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［13］ 楊帆,季剛,陳彥彬,等.青藤堿對(duì)大鼠心臟移植排斥反應(yīng)期間ICAM-1和IL-2的影響.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2007,23(3):240-241.

［14］ 王煒,劉彤,朱理瑋,等.青藤堿在小鼠心臟移植中的抗排斥作用.天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2006,12(3):401-403.

［15］ 徐廣全,王斌,金相元,等.青藤堿對(duì)心臟移植大鼠急性排斥反應(yīng)及環(huán)氧化酶2活性的影響.中華醫(yī)學(xué)雜志, 2006,86(13): 911-914.

［16］ 馮舟,朱理瑋,王鵬志,等. 青藤堿改善移植大鼠術(shù)后早期腸運(yùn)動(dòng)功能障礙的研究.優(yōu)秀碩士論文.

［17］ 靳小石, 劉彤, 梁曉宇, 等. 中藥預(yù)防大鼠小腸移植慢性排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究. 2007 中國外科周暨第16屆亞洲外科年會(huì)論文摘 要集, 2007.

［18］ 姚建兵,陸曉和.青藤堿防治角膜移植排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.廣東醫(yī)學(xué), 2005,26(12):1646-1648.

421001 衡陽, 南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院泌尿外科