余雪霏，張銘勛，方博文，鄭 超，汪萌芽

（皖南醫(yī)學(xué)院1.細(xì)胞電生理研究室、2.啟明星小組，安徽蕪湖 241002）

時(shí)反應(yīng)量 －效關(guān)系（timed dose-response relationship，TDRR）不僅是反映藥物作用廣義量效關(guān)系的重要方面［1－2］，也存在于非藥物作用的大鼠光輻射熱甩尾反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中［3］。本文在此基礎(chǔ)上觀察了嗎啡對(duì)甩尾反應(yīng)TDRR的影響，以期為痛覺(jué)與鎮(zhèn)痛作用機(jī)制的研究尋找更為理想的時(shí)反應(yīng)指標(biāo)及分析方法。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 清潔級(jí)♂ SD大鼠20只，體質(zhì)量（290±20）g。南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SCXK（蘇）2008－0010。

1.2 儀器與藥物 光輻射熱測(cè)痛儀（LE 7106，Panlab，USA）。鹽酸嗎啡注射液（10 g·L－1，沈陽(yáng)第一制藥有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 按常規(guī)法對(duì)20只大鼠用光輻射熱測(cè)痛儀在光照強(qiáng)度（Focus值）分別為 10、15、23、34、51、76、99進(jìn)行甩尾反應(yīng)潛伏期（tail-flick latency，TFL）測(cè)定，即為甩尾反應(yīng)的TDRR［3］。再隨機(jī)均分成嗎啡組和對(duì)照組，分別皮下注射嗎啡（10 mg·kg－1）和等容量生理鹽水。在注射后 5、10、20、40、80、160、320 min，重復(fù)進(jìn)行甩尾反應(yīng)的 TDRR檢測(cè)。室溫（25±1）℃。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 大鼠的TFL值及其TDRR數(shù)據(jù)的直線回歸系數(shù)值用±s表示。數(shù)據(jù)用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 嗎啡對(duì)大鼠甩尾反應(yīng)TDRR的影響 從對(duì)照組和嗎啡組各10只大鼠在注射前及注射后各時(shí)間的TFL數(shù)據(jù)中，選注射前、注射后20min和320min的數(shù)據(jù)例示于Tab 1。對(duì)8個(gè)測(cè)試時(shí)間的數(shù)據(jù)進(jìn)行雙組內(nèi)因素（光強(qiáng)度、測(cè)試時(shí)間）的重復(fù)測(cè)量三因素方差分析，結(jié)果顯示光強(qiáng)度、測(cè)試時(shí)間和藥物因素，以及所有因素間交互影響均P＜0.01，提示TFL存在光強(qiáng)度依賴的TDRR，嗎啡對(duì)TFL有時(shí)間依賴性延長(zhǎng)作用。

2.2 嗎啡影響大鼠光輻射熱甩尾反應(yīng)的TDRR分析 對(duì)兩組每只大鼠每個(gè)測(cè)試時(shí)間7個(gè)光強(qiáng)度測(cè)試值所構(gòu)成的TDRR數(shù)據(jù)，分別進(jìn)行直線回歸分析，得到每組80個(gè)回歸系數(shù)（b），作為各測(cè)試時(shí)間TDRR數(shù)據(jù)的代表性參數(shù)。再對(duì)兩組回歸系數(shù)進(jìn)行重復(fù)測(cè)量雙因素方差分析，結(jié)果顯示測(cè)試時(shí)間、藥物因素均P＜0.01，且各組的單因素方差分析表明，嗎啡組不同測(cè)試時(shí)間b值差異P＜0.01，但對(duì)照組P＞0.05，提示嗎啡時(shí)間依賴性影響了大鼠光輻射熱甩尾反應(yīng)的TDRR。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)觀察到，嗎啡不僅延長(zhǎng)了TFL，并使TFL不再呈現(xiàn)光強(qiáng)度依賴性，提示其對(duì)大鼠光輻射熱甩尾反應(yīng)TDRR有明顯影響，而這種影響具有時(shí)間依賴性，所提示的時(shí)間－效應(yīng)關(guān)系，還值得進(jìn)一步分析。本文所采用的TFL的TDRR實(shí)驗(yàn)和分析，以線代點(diǎn)，不僅更全面地顯示嗎啡對(duì)痛覺(jué)反應(yīng)的影響，而且選用TDRR參數(shù)（回歸系數(shù)）進(jìn)行TDRR的比較，也是對(duì)嗎啡作用分析的新資料，對(duì)相關(guān)痛覺(jué)與鎮(zhèn)痛研究有一定的參考價(jià)值。

（致謝：韓杰、晉夢(mèng)瑩、潘亮、張?zhí)K玉提供部分實(shí)驗(yàn)協(xié)助，王邦安高級(jí)實(shí)驗(yàn)師提供技術(shù)協(xié)助。）

Tab 1 Effects of morphine on rat tail-flick latency in response to light radiant heat（±s，n＝10，in seconds）

Tab 1 Effects of morphine on rat tail-flick latency in response to light radiant heat（±s，n＝10，in seconds）

Post-I：Post-injection；Pre-I：Pre-injection.Independent-samples t test：*P＜0.05，**P＜0.01 vs control at the same post-injection time.

Light intensity（Focus values ）10 15 23 34 51 76 99 Control Pre-I 17.7±4.2 19.8±0.6 13.9±4.0 10.Time／min 7±5.2 6.9±4.7 7.2±5.3 4.7±3.7 Post-I 20 18.9±3.5 18.3±5.2 16.4±3.9 16.2±5.4 13.1±6.7 9.2±6.2 7.8±5.6 Post-I 320 20.0±0.0 15.9±26.8 16.2±20.2 12.7±51.2 9.7±34.0 6.3±28.7 4.8±9.0 Morphine Pre-I 19.3±1.8 16.4±5.5 17.7±4.4 10.4±5.5 8.7±5.6 6.9±3.7 6.1±3.2 Post-I 20 20.0±0.0 20.0±0.0 20.0±0.0* 20.0±0.0*20.0±0.0**18.7±3.9**20.0±0.0**Post-I 320 20.0±0.0 19.2±1.6 17.8±3.6 14.7±5.9 11.9±5.4 7.5±4.4 5.1±3.4

參考文獻(xiàn)：

［1］ 汪萌芽，孫瑞元.時(shí)反應(yīng)量－效關(guān)系及其研究現(xiàn)狀［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，1987，3（2）：111－4.

［1］ Wang M Y，Sun R Y.Review on timed dose－response relationship［J］.Chin Pharmacol Bull，1987，3（2）：111－4.

［2］ Wang M Y，Sun R Y.Mathematical models for hyperbolic type of timed dose-response relationship of drugs［J］.Acta Pharmacol Sin，1987，8（6）：481－6.

［3］ 余雪霏，張銘勛，方博文，等.大鼠光輻射熱甩尾試驗(yàn)的時(shí)反應(yīng)量 －效關(guān)系［J］.皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，33（2）：176－80.

［3］ Yu X F，Zhang M X，F(xiàn)ang B W，et al.Timed dose-response relationship in tail-flick response of rats evoked by light radiant heat［J］.Acta Acad Med Wannan，2014，33（2）：176－80.