夏 濤，李 璐，鄔 薇，吳偉玲，焦?jié)闪?/p>

(南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，南京210003)

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)是指圍生期缺氧窒息導(dǎo)致的腦缺氧缺血性損害，可產(chǎn)生智能低下、腦癱等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，給家庭和社會帶來沉重負(fù)擔(dān)［1］。HIE的病理生理機制非常復(fù)雜，腦血流減少、自由基損傷、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、腦細(xì)胞能量代謝衰竭等多種發(fā)病機制交互作用共同導(dǎo)致HIE的發(fā)生［2］。研究發(fā)現(xiàn)，淋巴細(xì)胞、免疫球蛋白等參與了HIE的炎癥反應(yīng)過程［2，3］。2010 年1 月 ～2012 年12 月，我們觀察了HIE患兒外周血淋巴細(xì)胞免疫分型和血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA的變化，探討細(xì)胞免疫和體液免疫在新生兒HIE發(fā)病中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取同期收治的足月HIE患兒60例為HIE組。均符合中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會新生兒學(xué)組2005年修訂的HIE診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。其中男37例、女23例。胎齡37～42周，出生體質(zhì)量2 500～4 000 g。HIE輕度32例，中重度28例。另隨機選取同期健康足月新生兒30例作為對照組。其中男19例、女11例，胎齡37～42周，出生體質(zhì)量2 500～4 000 g。所有新生兒排除感染性疾病、溶血性疾病、先天畸形等，母親均無自身免疫性疾病及其他可能影響新生兒免疫功能的疾病，新生兒住院期間均未使用任何影響免疫功能的藥物，新生兒家長均簽署知情同意書。兩組新生兒性別構(gòu)成、胎齡、出生體質(zhì)量相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 淋巴細(xì)胞免疫分型及外周血免疫球蛋白水平檢測 兩組新生兒于出生24 h內(nèi)分別取外周血2 mL，采用流式細(xì)胞儀檢測淋巴細(xì)胞免疫分型和NK細(xì)胞比例，采用免疫濁度法測定血清IgG、IgM及IgA。操作按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。計量資料用±s表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD法。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。均采用雙側(cè)檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.2 IgG、IgM及 IgA水平 HIE組患兒外周血IgM、IgA水平低于對照組(P均＜0.01)，且中重度患兒外周血IgM、IgA水平均低于輕度患兒和對照組(P 均 ＜0.05)。見表2。

3 討論

神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)對機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定起重要的調(diào)節(jié)作用，當(dāng)機體受到內(nèi)外環(huán)境的應(yīng)激后，免疫系統(tǒng)可以通過細(xì)胞因子對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用［5］。近年研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞免疫和體液免疫參與HIE發(fā)病過程，免疫紊亂是HIE發(fā)病的重要原因之一。

本研究結(jié)果顯示，HIE患兒T淋巴細(xì)胞亞群分布有變化，主要表現(xiàn)為CD+3、CD+4細(xì)胞水平降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這與Wang等［6］研究結(jié)果相一致。而劉艷萍等［7］研究發(fā)現(xiàn) HIE患兒 CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞比例較正常新生兒均明顯減少，且重度HIE患兒下降更明顯，CD4+/CD8+值下降。上述研究結(jié)果的不一致，可能與樣本的選擇及樣本量的大小有關(guān)。此外，本研究也發(fā)現(xiàn)不同臨床分型的HIE患者病情嚴(yán)重程度與T細(xì)胞亞群數(shù)量異常的嚴(yán)重程度并不平行，可能更決定于T細(xì)胞亞群功能異常。

表1 兩組患兒外周血淋巴細(xì)胞免疫分型比較(±s)

表1 兩組患兒外周血淋巴細(xì)胞免疫分型比較(±s)

組別 n CD+3(%) CD+4(%) CD+8(%) CD+4/CD+8 NK細(xì)胞(%) B淋巴細(xì)胞(%)HIE 組 60 67.30 ±10.16 39.41 ±10.77 23.52 ±8.85 1.98 ±1.23 10.84 ±6.14 20.40 ±10.33輕度 32 67.71 ± 9.56 39.01 ±10.61 23.89 ±8.16 1.95 ±1.37 10.81 ±5.22 19.94 ±10.71中、重度 28 66.83 ±10.97 39.87 ±11.12 23.10 ±9.72 2.01 ±1.07 10.87 ±7.16 20.92 ±10.05對照組 30 68.07 ±11.50 41.28 ±12.43 23.34 ±7.21 1.99 ±1.02 11.23 ±6.33 19.35 ± 7.44

表2 兩組患兒外周血IgG、IgM及IgA 水平比較(g/L，±s)

表2 兩組患兒外周血IgG、IgM及IgA 水平比較(g/L，±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.01;與 HIE 組輕度者比較，#P ＜0.05

組別 n IgG IgM IgA HIE 組 60 10.47 ±3.69 0.77 ±0.36* 0.79 ±0.41*輕度 32 11.03 ±4.14 0.81 ±0.35 0.87 ±0.48中、重度 28 9.84 ±3.07 0.71 ±0.37﹟ 0.70 ±0.29﹟對照組30 11.41 ±3.10 1.61 ±0.60 1.32 ±0.81

NK細(xì)胞參與T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié)，是細(xì)胞免疫中的非特異性成分，具有激活和增強重要的抗原遞呈細(xì)胞樹突狀細(xì)胞的功能。研究發(fā)現(xiàn)，HIE患兒的NK細(xì)胞活性明顯低于正常新生兒，而且與病情程度相關(guān)［8，9］。CD19是 B淋巴細(xì)胞膜表面標(biāo)志，B淋巴細(xì)胞主要介導(dǎo)體液免疫［10］。本研究結(jié)果顯示，與對照組相比HIE患兒CD+19細(xì)胞比例增高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，可能與本研究樣本量小有關(guān)。

IgA、IgM不能通過胎盤，因此新生兒體內(nèi)的IgA、IgM不是由母體獲得的，而是在出生后由腸道微生物等抗原刺激，迅速由新生兒免疫系統(tǒng)合成［2］。IgM是分子量最大的Ig，是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體［5］。在抗感染早期，IgM作用較IgA更為重要［11］。本研究結(jié)果顯示，HIE患兒外周血IgM、IgA低于對照組，且病情越嚴(yán)重，IgM、IgA水平越低，提示IgM、IgA水平可以作為HIE早期診斷標(biāo)志物之一，同時還可評估HIE的嚴(yán)重程度，指導(dǎo)臨床治療。總之，新生兒HIE的發(fā)生、發(fā)展是多因素參與的復(fù)雜過程，可能既受到細(xì)胞免疫的影響，也有體液免疫的作用，并且兩者相互關(guān)聯(lián)，血清免疫球蛋白可以作為HIE早期診斷、評價腦損傷程度及預(yù)后的參考指標(biāo)。

［1］Soll RF.Cooling for newborns with hypoxic ischemic encephalopathy［J］.Neonatology，2013，104(4):260-262.

［2］Douglas-Escobar M，Weiss MD.Biomarkers of hypoxic-ischemic encephalopathy in newborns［J］.Front Neurol，2012，3(4):144.

［3］Bona E，Andersson AL，Blomgren K，et al.Chemokine and inflammatory cell response to hypoxia-ischemia in immature rats［J］.Pediatr Res，1999，45(4):500-509.

［4］中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會新生兒學(xué)組.新生兒缺氧缺血性腦病診斷標(biāo)準(zhǔn)［J］.中華兒科雜志，2005，43(8):584.

［5］許津莉，賈黎英，郭俊紅，等.缺血缺氧性腦病新生兒免疫功能變化［J］.臨床薈萃，2012，27(16):1459-1461.

［6］Wang J，Lu Q.Expression of T subsets and mIL-2R in peripheral blood of newborns with hypoxic ischemic encephalopathy［J］.World J Pediatr，2008，4(2):140-144.

［7］劉艷萍，覃紹鵬，黃獻(xiàn)文，等.新生兒缺氧缺血性腦病患兒T淋巴細(xì)胞亞群和D-二聚體及心肌酶水平的變化及意義［J］.中國全科醫(yī)學(xué)，2012，15(11):3842-3844.

［8］張曉燕，林麗星，王潔，等.缺氧缺血性腦病新生兒自然殺傷細(xì)胞與T細(xì)胞亞群的變化及其相關(guān)因素［J］.實用兒科臨床雜志，2006，21(14):906-907.

［9］許津莉，孫芳，羅慶華，等.缺氧缺血性腦病新生兒自然殺傷細(xì)胞的動態(tài)變化及臨床意義［J］.河北醫(yī)藥，2012，34(18):2772-2773.

［10］林麗星，楊梅，王潔，等.CD19、CD25在新生兒缺氧缺血性腦病的表達(dá)及臨床意義［J］.臨床兒科雜志，2010，28(4):367-370.

［11］郭惠梅，新生兒缺氧缺血性腦病機體免疫功能變化的研究［J］.醫(yī)學(xué)理論與實踐，2012，25(12):1431-1433.