高燕紅 胡 衛(wèi) 李 娟

湖南省株洲市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南株洲 412000

偉力精子質(zhì)量檢測(cè)動(dòng)態(tài)分析系統(tǒng)的臨床應(yīng)用

高燕紅 胡 衛(wèi) 李 娟

湖南省株洲市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南株洲 412000

目的 比較國(guó)產(chǎn)偉力彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)（WLJY-9000）與傳統(tǒng)的人工常規(guī)檢查（按WHO標(biāo)準(zhǔn)）兩種方法檢測(cè)參數(shù)的可信度。 方法隨機(jī)選擇2011年5月～2012年2月來(lái)本院檢查的100例精液（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲）標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)兩種檢查參數(shù)如精子密度、活動(dòng)率、活動(dòng)力（a+b）等進(jìn)行分析比較。 結(jié)果 采用兩種檢測(cè)方法所得精子密度、精子活動(dòng)率以及精子活力（a+b）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.9）；通過(guò)20×和40×兩種放大倍數(shù)的一致性測(cè)定數(shù)據(jù)顯示該檢測(cè)系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性。 結(jié)論 該檢測(cè)系統(tǒng)有較好的準(zhǔn)確性、良好的重復(fù)性和一致性，可以代替人工檢測(cè)，為臨床診斷男性不孕不育和體外受精選配優(yōu)質(zhì)精子等提供了參考依據(jù)，在檢測(cè)過(guò)程中也有效避免了一些因人工主觀判斷所產(chǎn)生的誤差，具有多種人工檢測(cè)方法不具有的功能，也為臨床和科研中精液常規(guī)分析的科學(xué)化、規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化創(chuàng)造了條件。

精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)；精子密度；精子活動(dòng)率；精子活力

精液分析是一項(xiàng)評(píng)估男性生育能力最基本和重要的檢查方法，以往的精子計(jì)數(shù)和主觀判斷已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足臨床需要，直觀的形態(tài)分析越來(lái)越顯示出它的重要性，在男性不育癥的臨床診斷中有非常重要的價(jià)值[1]，為臨床治療和療效觀察提供了科學(xué)依據(jù)。目前我國(guó)大多數(shù)基層醫(yī)院依然在使用手工分析方法，由于受不同檢驗(yàn)操作人員的技術(shù)、經(jīng)驗(yàn)和方法等影響，造成了檢測(cè)結(jié)果的差異，降低了精液報(bào)告的客觀性和可比性[2]。WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)巧妙地將現(xiàn)代先進(jìn)的計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)運(yùn)用在精子質(zhì)量分析儀的臨床分析上，不但可對(duì)精液中的精子活力、活動(dòng)率、密度和精子總數(shù)等進(jìn)行定量分析，還可對(duì)精子運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)軌跡特征進(jìn)行分析。另外，此系統(tǒng)還能向操作人員展現(xiàn)出精液中不該存在的一些病理因素，如超量的白細(xì)胞、紅細(xì)胞和活動(dòng)的細(xì)菌等[3]。在臨床檢驗(yàn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)出的精子密度、活動(dòng)率、活動(dòng)力（a+b）和精子總數(shù)與傳統(tǒng)的人工檢測(cè)方法相比具有良好的相關(guān)性和準(zhǔn)確性，可以代替人工檢測(cè)方法，為臨床提供更科學(xué)、客觀和準(zhǔn)確的參考依據(jù)。本研究采用偉力彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)和傳統(tǒng)的人工檢測(cè)方法對(duì)同一份精液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，比較所得結(jié)果的相關(guān)性、準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年5月~2012年2月本院生殖科和男性專(zhuān)科門(mén)診提供的精液標(biāo)本100例（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲），捐獻(xiàn)者禁欲3～7 d后，手淫法采集，將一次射出量裝入潔凈干燥玻璃試管內(nèi)[4]，立即保溫送檢后放置于37℃水浴箱保溫30～60 min（以標(biāo)本液化為準(zhǔn)，最遲不超過(guò)60 min）。

1.2 儀器

北京偉力公司W(wǎng)LJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)，Olympus顯微鏡和Makler計(jì)數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 傳統(tǒng)手工分析方法 將處理好的精液標(biāo)本由有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照WHO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作，用微量吸管將處理好的標(biāo)本加樣到已經(jīng)37℃預(yù)溫的Makler計(jì)數(shù)板和干凈玻片上，計(jì)算精子數(shù)、密度、活力及活動(dòng)率[5]。同時(shí)記錄精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時(shí)間，完善檢驗(yàn)報(bào)告。

1.3.2 質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)分析方法 選擇同一精液標(biāo)本，不做稀釋處理，直接用微量吸管將定量的精液（≤5 μl）滴在清潔、預(yù)溫的計(jì)數(shù)板的精液池上，再蓋上專(zhuān)用蓋玻片后，置于系統(tǒng)的恒溫顯微鏡臺(tái)上，靜置約1 min[6]，待穩(wěn)定后，用專(zhuān)用顯微鏡進(jìn)行鏡檢，并通過(guò)顯微鏡上所連攝像頭將信息傳入精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行分析。同時(shí)輸入精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時(shí)間，完善檢驗(yàn)報(bào)告。

1.3.3 檢測(cè)精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)的可重復(fù)性 對(duì)同一份標(biāo)本用20倍鏡和40倍鏡在同樣條件下連續(xù)檢測(cè)3次，計(jì)算精子密度、活動(dòng)率和精子活力（a+b）百分率，以確定該系統(tǒng)的重復(fù)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方法主要參數(shù)的比較

采用兩種檢測(cè)方法所得精子密度、精子活動(dòng)率以及精子活力（a+b）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表1）。

表1 兩種檢測(cè)方法主要參數(shù)相關(guān)性的比較（n=100，±s）

表1 兩種檢測(cè)方法主要參數(shù)相關(guān)性的比較（n=100，±s）

與手工檢測(cè)法比較，*P＞0.05；與系統(tǒng)檢測(cè)法（40×）比較，#P＞0.05

方法 精子密度（×106/ml） 精子活動(dòng)率（%） 精子活力（a+b）（%）手工檢測(cè)法系統(tǒng)檢測(cè)法（20×）系統(tǒng)檢測(cè)法（40×）25.25±13.298 25.35±13.380*#25.26±13.295*47.98±18.781 46.02±18.982*#45.93±19.033*46.09±17.268 47.02±17.652*#47.32±17.221*

2.2 精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)可重復(fù)性的分析

通過(guò)統(tǒng)計(jì)結(jié)果可以看出，偉力精子檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)的精子密度、活動(dòng)率和活力（a+b）參數(shù)數(shù)值的變異系數(shù)都很小，且兩種放大倍數(shù)檢測(cè)系統(tǒng)的變異系數(shù)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說(shuō)明該檢測(cè)系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性（表2）。

表2 精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)可重復(fù)性的分析（n=100）

3 討論

精液分析是評(píng)價(jià)男性生育功能、提供不育癥的診斷和療效觀察的依據(jù)，也是輔助診斷男性生殖系統(tǒng)疾病、輸精管結(jié)扎術(shù)后療效觀察的重要檢測(cè)項(xiàng)目，同時(shí)還為體外受精篩選優(yōu)質(zhì)精子提供參考依據(jù)[7]，準(zhǔn)確的精子計(jì)數(shù)和精子密度更能為準(zhǔn)確分析人工授精臨床妊娠率提供依據(jù)[9]。傳統(tǒng)的手工分析方法缺乏良好的客觀性，不同檢驗(yàn)人員分析的結(jié)果因?yàn)橹饔^判斷的不同有時(shí)差異較大，對(duì)精子活力的等級(jí)判斷缺少?lài)?yán)格的量化指標(biāo)。在檢測(cè)過(guò)程中因?yàn)闆](méi)有恒溫設(shè)施，在環(huán)境溫度低和檢測(cè)時(shí)間稍長(zhǎng)時(shí)往往使檢測(cè)出的精子活力和活動(dòng)率偏低[10]。

偉力精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)通過(guò)攝像機(jī)或錄像機(jī)與顯微鏡連接，確定和跟蹤單個(gè)精子的活動(dòng)，根據(jù)設(shè)定的精子運(yùn)動(dòng)的移位、精子大小和精子運(yùn)動(dòng)的有關(guān)參數(shù)，對(duì)采集到的圖像進(jìn)行動(dòng)態(tài)處理和分析[11]。其既可定量分析精子密度、精子活力、精子活動(dòng)率，還可以分析精子運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)軌跡特征，同時(shí)還能發(fā)現(xiàn)一些其他的致病原因，為臨床診斷提供更高效、客觀和科學(xué)的服務(wù)。在進(jìn)行精液檢測(cè)分析中值得注意的是，進(jìn)行檢測(cè)用的計(jì)數(shù)板一定要提前預(yù)溫，如果未預(yù)溫將影響精子活力和活動(dòng)率的測(cè)定。在電腦顯示屏上進(jìn)行抓圖時(shí)要將視野調(diào)至微暗，這有利于提高抓拍精子的準(zhǔn)確性。每次進(jìn)行圖片抓拍計(jì)數(shù)時(shí)一定要將誤抓的紅、白細(xì)胞和卵磷脂小體、原細(xì)胞等從計(jì)數(shù)的精子個(gè)數(shù)中除去，以免影響計(jì)算機(jī)最后對(duì)精子數(shù)、活動(dòng)力、活動(dòng)率的計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)。相信在先進(jìn)的儀器設(shè)備和人工的監(jiān)測(cè)下一定能給臨床提供一份準(zhǔn)確、可信的報(bào)告單。

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本刊醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)欄目介紹

以報(bào)道臨床醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷方法學(xué)為重點(diǎn)，主要報(bào)道檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的最新科研成果，實(shí)用技術(shù)的新進(jìn)展，各種檢驗(yàn)的方法與試劑、儀器的性能和特點(diǎn)等內(nèi)容。稿件要求：資料準(zhǔn)確、數(shù)據(jù)真實(shí)、論據(jù)可靠、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法正確。

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Clinical application of weili sperm quality test and dynamic analysis system

GAO Yan-hong HU WeiLI Juan
Department of Clinical Laboratory,Central Hospital of Zhuzhou City in Hunan Province,Zhuzhou 412000,China

ObjectiveTo compare the parameter credibility of weili color sperm quality test system(WLJY-9000)and traditional manual routine test(WHO standard).Methods100 sperm samples(donor age:24-45 years old)tested in our hospital from May 2011 to February 2012 were randomly selected for test.Sperm density,active sperm rate,sperm motility(a+b)and other parameters were compared.ResultsThe differences of sperm density,active sperm rate,sperm motility (a+b)tested by the two detection methods were not statistically significant(P＞0.9).Through the consistency of the data by the two kinds of magnification(20×and 40×)showed that the detection system had good repeatability and consistency.ConclusionThe detection system could replace manual test due to good accuracy,repeatability and consistency,and it provides reference for clinical diagnosis of male infertility and selection of high-quality sperm for vitro fertilization,it is also effective to prevent certain errors caused by subjective judgment,demonstrating unique functions that manual sperm analysis does not possess,it also creates the condition for scientific,regular and standard sperm routine analysis in clinical application and scientific research.

Sperm quality test system;Sperm density;Active sperm rate;Sperm motility

R446.1

A

1674-4721（2014）02（a）-0098-03

2013-10-23本文編輯：袁 成）