林永恩，任麗萍，蔡奎，劉燕群，馮明

（賀州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 賀州 542899）

賀州市婦女人乳頭瘤病毒感染疫情分析

林永恩，任麗萍，蔡奎，劉燕群，馮明

（賀州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 賀州 542899）

目的分析賀州市婦女人乳頭瘤病毒(HPV)感染基因型與年齡分布特點(diǎn)，為HPV預(yù)防性疫苗研發(fā)及引進(jìn)提供數(shù)據(jù)備案。方法采用PCR體外擴(kuò)增和DNA反向點(diǎn)雜交相結(jié)合的DNA芯片技術(shù)(PCR-RDB)，對(duì)2 092份宮頸分泌物樣本的HPV基因亞型檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，了解本地的HPV感染疫情；同時(shí)將受檢樣本按年齡分為16～25歲、26～35歲、36～45歲、46～55歲、＞55歲五組，分析比較不同組之間的感染特點(diǎn)。結(jié)果2 092例樣本中共檢出陽性590例，陽性率為28.2%，感染的主要基因型前三位是HPV16、58、52。各年齡組感染陽性率依次為66.9%、23.0%、23.0%、30.0%、28.9%；大多數(shù)患者只感染單一基因亞型(75%)，感染雙重以上基因型的比率在各年齡組的依次是43.4%、19.9%、18.9%、22.1%、21.6%。結(jié)論賀州市的HPV流行亞型主要為16、58、52型，各年齡段HPV亞型分布有一定差別，青少年為我市的HPV感染高危人群，青少年人群有接受HPV預(yù)防疫苗的充分必要。

人乳頭瘤病毒；基因亞型；年齡；疫苗

近年來，由于環(huán)境惡化及人們生活方式改變等原因，宮頸癌發(fā)病在我國已呈年輕化趨勢(shì)。已經(jīng)明確，高危型乳頭瘤病毒(HPV)是導(dǎo)致婦女宮頸癌及癌前病變的主要原因[1]。由于HPV的性傳播途徑及人種易感性差異等，其致病基因亞型的流行、分布具有明顯的地域性和人群特征。目前，國外對(duì)宮頸癌的攻克已上升到了疫苗防治的階段[2]。我國的HPV疫苗則仍在初步研發(fā)中。因此本研究旨在通過對(duì)賀州市的HPV基因亞型感染狀況進(jìn)行研究分析，了解本地防治重點(diǎn)人群，為本地區(qū)HPV疫苗的研制及制定完備的宮頸癌防治策略提供數(shù)據(jù)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 病例來源選取2011年11月至2013年8月在我院婦科門診及住院治療的婦女2 092例，年齡16～82歲，剔除二次病例。

1.2 標(biāo)本采集以專用宮頸脫落細(xì)胞采集器進(jìn)行采樣。先以窺陰器暴露宮頸，取出宮頸刷置于官頸口，順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)4～5周后將采樣棉拭子浸入盛有洗脫管中，旋緊洗脫管蓋，做好樣本標(biāo)識(shí)，2℃～8℃保存，一周內(nèi)送檢。

1.3 試劑與儀器采用深圳亞能生物有限公司提供的宮頸脫落細(xì)胞采集器及HPV基因分析檢測(cè)試劑盒。PCR儀為美國的ABI2720，雜交儀為韓國Finepcr公司的Fine PCR Combi H12。

1.4 基因分型與結(jié)果判斷利用PCR-反向點(diǎn)雜交技術(shù)，將人乳頭瘤病毒進(jìn)行定性檢測(cè)并加以23種基因分型。包括18種高危型：HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83，MM4；5種低危型：HPV 6、11、42、43、44。具體操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。對(duì)檢測(cè)結(jié)果根據(jù)芯片上HPV基因亞型分布位點(diǎn)進(jìn)行判斷。于采集標(biāo)本中，若檢出其中任何一種HPV亞型，即診斷為該型HPV陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法研究數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV陽性結(jié)果本組2 092例樣本中共檢出陽性590例，陽性率為28.2%。除44、MM4型以外，其他21種亞型均有檢出。以感染單一亞型為主，占感染人群的75.4%。雙重以上亞型感染占24.6%。

2.2 HPV亞型分布本研究檢出17種高危型，4種低危型。感染基因亞型前三位是HPV16、58、52；各年齡組感染前三位分別是：16～25歲(6、11、16)，26～35歲(16、11、52)，36～45歲(16、58、52)，46～55歲(16、58、52)，＞55歲(16、52，42)。

2.3 HPV感染者的年齡分布各年齡組間HPV感染陽性率如表1所示，組間陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。各年齡組陽性率的兩兩比較，16～25歲年齡組與其他四組陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而其他四組之間陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表1 2092例女性的年齡分布與HPV陽性率的情況（例）

2.4 HPV多重感染分布590例陽性感染者中單一型感染445例，占75%，雙重以上合并感染145例，占25%，HPV雙重以上感染率的年齡分布見圖1。

圖1 女性HPV雙重以上感染率的年齡分布

3 討論

HPV屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬，嗜皮膚黏膜鱗狀上皮，常見于人類各種疾病，病毒DNA呈球形雙鏈。目前已知有120多種基因亞型，其中80多種與人類腫瘤相關(guān)，是引起婦女宮頸癌的主要病因。世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)研究分析證實(shí)，HPV的流行和型別分布有地域性差異及人群特征。全球流行最多的主要是16型，占51%，按地區(qū)流行的前五位：非洲HPV 16、18、58、52、51；中/南美洲HPV 16、18、61、71、58；北美洲HPV 16、53、52、18、39；亞洲HPV 16、52、58、18、56；歐洲HPV 16、18、31、33、58[3]。我國在此方面大量的研究也有了一定的數(shù)據(jù)積累。深圳華大基因分別針對(duì)廣東深圳、中山兩市的萬名以上流動(dòng)人口的HPV感染情況的研究結(jié)果顯示優(yōu)勢(shì)感染亞型為：HPV 16、52、58，這一結(jié)論對(duì)中國南方地區(qū)乃至全國的HPV亞型流行具有高度的代表性意義[4-5]。本研究發(fā)現(xiàn)賀州市婦女在23種HPV亞型中除高危型中的MM4，低危型中的44型外，共檢出21種亞型，在總體上看感染的基因型為HPV 16、58、52，進(jìn)一步證實(shí)了HPV 52、58兩型是我國南方地區(qū)感染的主要亞型。

大量數(shù)據(jù)顯示，70%以上已婚或已有性生活婦女一生中都會(huì)感染HPV病毒，大多數(shù)HPV感染可在短期內(nèi)消失，機(jī)體通過自身免疫系統(tǒng)使病毒逐漸清除，尤其是低危型HPV更容易被機(jī)體清除，大約持續(xù)18個(gè)月左右，青少年為感染高峰人群[6-7]。本資料顯示，16～25歲陽性檢出率最高為66.9%，主要感染HPV 6、11、16型，中間三個(gè)年齡組主要感染類型以高危型為主，而絕經(jīng)后婦女的HPV低危型感染又占據(jù)了主要的比重，也顯示了免疫、激素水平與亞型分布的密切關(guān)系。姜艷等[8]研究認(rèn)為，HPV感染在青少年高發(fā)，除與青春期有效雌激素水平較低，宮頸外口大量鱗狀細(xì)胞增生等基本生理狀況密切相關(guān)外，還與初次性交年齡提早、性紊亂、性伴侶數(shù)、吸煙、長(zhǎng)期使用避孕藥或行為方式有關(guān)。對(duì)于青少年人群更易患多重HPV感染這一年齡分布特點(diǎn)，國外學(xué)者Lee等[9]的研究則表明，單一HPV基因亞型感染使宮頸癌的患病風(fēng)險(xiǎn)增加19.9倍，而HPV多重基因亞型感染使該風(fēng)險(xiǎn)增加至31.8倍。此外，還有研究認(rèn)為，人乳頭瘤病毒在青少年人群中的分布特征與他們對(duì)有關(guān)HPV的認(rèn)知度低密切相關(guān)。據(jù)一項(xiàng)對(duì)內(nèi)地6 024名女性的問卷調(diào)查顯示，只有15.5%的人聽說過HPV[10]。黃荷等[11]在成都市大學(xué)生對(duì)HPV感染率及行為調(diào)查分析的研究發(fā)現(xiàn)，僅有9.15%的大學(xué)生聽說過HPV。

近年來，發(fā)展中國家年輕宮頸癌的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。隨著宮頸癌與HPV病毒關(guān)系的揭示以及對(duì)HPV病毒的DNA結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)周期、致病機(jī)制等全方位的破解，目前國外對(duì)HPV病毒的防治已到了臨床試用的階段。100多個(gè)國家引進(jìn)了美國默克公司研發(fā)的HPV 6、11、16、18四價(jià)疫苗(Gardasil)及澳大利亞葛蘭素史克公司的HPV 6、11二價(jià)疫苗(Cervarix)，用于預(yù)防接種青少年人群和年輕女性(9～26歲)，對(duì)宮頸癌形成了一個(gè)堅(jiān)實(shí)的防御屏障。在我國，則因疫苗存在一定的安全問題及價(jià)格過高等多種原因尚未引進(jìn)上市。根據(jù)地區(qū)實(shí)際狀況，國內(nèi)已有學(xué)者致力于HPV 16、18和58型復(fù)合疫苗的研究[12]。

綜上所述，我市婦女的HPV感染基因亞型主要為16、58、52型。青少年人群感染疫情嚴(yán)重，預(yù)防性HPV疫苗的接種對(duì)她們的健康而言具有非常重要的意義。同時(shí)，普及有關(guān)HPV相關(guān)知識(shí)，引導(dǎo)青少年改正不良生活方式，有望使HPV的不斷蔓延流行得到控制，進(jìn)而有效地預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。

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Analysis of human papillomavirus infection in women in Hezhou city.

LIN Yong-en,REN Li-ping,CAI Kui,LIU Yan-qun,FENG Ming.Department of Clinical Laboratory,Hezhou People's Hospital,Hezhou 542899,Guangxi,CHINA

ObjectiveTo analyze the genotype and age distribution of human papillomavirus(HPV)infection in women in Hezhou city,providing data for the import,research and development of HPV prophylactic vaccines.MethodsPolymerase chain reaction(PCR)and DNA reveres dot blot hybridization technology were used.The testing results of gene subtypes of 2 092 cervical secretion samples were retrospectively analyzed in order to know the HPV infection of local women.These samples were divided into five groups according to ages∶16～25 group,26～35 group,36～45 group,46～55 group and＞55 group,respectively.The characteristics of infection among five groups were compared.ResultsThere were 590 positive samples(the positive rate was 28.2%)and the three main genotypes were HPV16,58 and 52.The positive rates of five groups were 66.9%,23.0%,23.0%,30.0%and 28.9%respectively.Most patients were infected with a single type of HPV (75%). Patients infected with two or more genotypes of HPVs infive groups were 43.4%, 19.9%, 18.9%, 22.1% and 21.6% respectively. Conclusion The main HPV subtypes in womenin Hezhou city are HPV16, 58, 52 and there are differences in the distribution of HPV subtypes among the fivegroups. Teens are high-risk of HPV infection in Hezhou and it is necessary for them to receive HPV vaccine.

HPV;Genotypes;Age;Vaccine

R737.3

A

1003—6350（2014）19—2859—03

2013-11-11)

賀州市本級(jí)自籌項(xiàng)目（編號(hào)：賀科轉(zhuǎn)1212002）

林永恩。E-mail：hzlyen@126.com

doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2014.19.1125